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| 销售商： 抚州翊立飒生物科技开发有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
商品属性：
| 产品名称 | 大鼠肝内胆管上皮细胞 |
| 英文名称 | Rat Intrahepatic Bile Duct Epithelial Cells |
| 组织来源 | 肝脏组织 |
| 默认种属 | 大鼠 |
| 产品货号 | YLS-XB11196 |
细胞简介 ：
大鼠肝内胆管上皮分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。通过控制激素调控的分泌和吸收，在保持、调整和扩大胆小管的结构中发挥重要作用，肝内胆管上皮细胞在先天性和获得性免疫应答方面起着积极作用。肝内胆管上皮细胞约占肝细胞总数的5%，其在肝内胆道系统内形成复杂的网状管形结构。肝内胆管上皮细胞具有复杂的生理代谢功能，参与肝脏的代谢、排泌、免疫等生理过程，在肝脏疾病的发生发展过程中起一定的作用。研究表明，常见的肝内胆管病变例如原发性硬化性胆管炎、胆管癌等疾病，都是以肝内胆管上皮细胞为病变靶位，进而引起肝内胆管上皮损伤。因此，了解正常肝内胆管上皮细胞的生物学特征和病变肝内胆管上皮细胞的病理特征对研究肝内胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。
方法简介 公司实验室分离的大鼠肝内胆管上皮采用胶原酶灌注消化法后，再用胶原酶-DNA酶联合消化，接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中，通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠肝内胆管上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作流程：
大鼠肝内胆管上皮分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。通过控制激素调控的分泌和吸收，在保持、调整和扩大胆小管的结构中发挥重要作用，肝内胆管上皮细胞在先天性和获得性免疫应答方面起着积极作用。肝内胆管上皮细胞约占肝细胞总数的5%，其在肝内胆道系统内形成复杂的网状管形结构。肝内胆管上皮细胞具有复杂的生理代谢功能，参与肝脏的代谢、排泌、免疫等生理过程，在肝脏疾病的发生发展过程中起一定的作用。研究表明，常见的肝内胆管病变例如原发性硬化性胆管炎、胆管癌等疾病，都是以肝内胆管上皮细胞为病变靶位，进而引起肝内胆管上皮损伤。因此，了解正常肝内胆管上皮细胞的生物学特征和病变肝内胆管上皮细胞的病理特征对研究肝内胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。
方法简介 公司实验室分离的大鼠肝内胆管上皮采用胶原酶灌注消化法后，再用胶原酶-DNA酶联合消化，接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中，通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠肝内胆管上皮经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
关键操作流程：
原代细胞的制备是整个实验成功的基础，其核心在于将组织分散成单个活细胞。
1. 组织取材与预处理
无菌操作：整个过程必须在超净台内严格无菌进行，所有器械和溶液都需灭菌。
快速处理：组织从生物体取出后应尽快处理，以维持细胞活力。若不能立即处理，需在4℃条件下短期保存。
清洗与剪切：用预冷的PBS或Hank's液反复冲洗组织，去除血污和杂物。然后用无菌眼科剪将组织剪成约1mm³的微小碎块。
2. 细胞分离方法
根据组织类型和研究目的，主要有以下三种分离策略：
分离方法 原理与适用组织 优点 缺点
酶消化法 利用酶（如胰蛋白酶、胶原酶）降解细胞间质，适用于肝、肾、皮肤、肿瘤等大多数实体组织。 细胞得率高，分离效果好，是最常用的方法。 酶可能对细胞造成损伤，需精确控制消化时间和温度。
组织块培养法 将组织块直接贴附于培养瓶，细胞从边缘自然迁出。适用于上皮、胚胎等细胞间质少的组织。 操作简单，对细胞损伤小，能较好保留细胞特性。 细胞迁出和增殖周期长，得率相对较低。
机械分散法 通过剪切、研磨、筛网过滤或吸管吹打等物理方式分散组织，适用于脑组织等柔软样本。 快速，避免了酶对细胞的潜在毒性。 细胞损伤大，得率和存活率低，易形成细胞团块。
常用酶简介
胰蛋白酶 (Trypsin)：作用强，适用于细胞间质较少的软组织。其活性依赖不含钙、镁离子的环境。
胶原酶 (Collagenase)：特异性水解胶原蛋白，对细胞损伤小，尤其适用于富含结缔组织的坚硬器官（如乳腺、骨、软骨）。
3. 细胞培养与观察
终止消化：酶消化后，需加入含血清的培养基来终止反应，因为血清中含有抑制胰蛋白酶活性的因子。
过滤与接种：通过细胞滤网过滤，去除未消化的组织块，离心收集细胞后用完全培养基重悬，接种到培养瓶中。
耐心观察：原代细胞生长通常较缓慢，可能需要24小时甚至更长时间才能在镜下观察到贴壁的细胞。
常见难点与解决方案：
原代培养常被称为“玄学”，主要因为以下痛点：
1. 细胞不贴壁或死亡率高
原因： 消化过度、物理损伤或“失巢凋亡”。
对策： 优化酶浓度和时间；在培养基中添加 ROCK抑制剂 或特定的贴壁因子（如层粘连蛋白、纤连蛋白）。
2. 杂细胞污染（主要是成纤维细胞）
现象： 成纤维细胞生长极快，会迅速淹没目的细胞（如上皮细胞）。
对策：
差速贴壁法： 利用成纤维细胞贴壁快（1-2小时）的特性，先让其在培养瓶贴壁，收集未贴壁的悬液（含目的细胞）进行培养。
抑制剂法： 使用阿糖胞苷或特定抗体清除杂细胞。
3. 批次差异大
原因： 供体年龄、健康状况、取材部位不同。
对策： 尽量使用同一批次冻存的细胞进行实验；或者在实验设计时增加生物学重复。
公司正在出售的产品：
| 冰冻切片特恩布尔（TURNBULL-DAB）非血红素铁（二价）强化染色试剂盒 | 环指蛋白167抗体 |
| 土壤α活性EPS-G7酶偶联比色法定量检测试剂盒 | 同位素核酸蛋白结合反应试剂盒 |
| 蓝藻甲磺酸乙脂突变诱导试剂盒 | SiRNA大量SperfusinX脂质体腹腔法动物转染试剂盒 |
| 10倍磷酸平衡盐（PBS）缓冲溶液 | OTOP1蛋白抗体 |
| 载玻片细胞PDGF-B蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 复制因子A蛋白2 |
| 组织糖原磷酸化酶激酶（GLYCOGEN PHOSPHORYLASE KINASE）活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒 | 转录激活蛋白PURB抗体 |
| 冰冻切片组织PAR-1蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 调亡诱导因子抗体 |
| AF680标记的过氧化酶活化增生受体γ抗体 | DNAJA4蛋白抗体 |
| RHODAMINE 110蛋白标记试剂盒 | 磷酸化粘着斑蛋白抗体 |
| 羟赖（HYL）含量高效液相色谱定量检测试剂盒 | 蛋白酶体PSMα7抗体 |
| 细胞腺苷酸环化酶（Adenylate Cyclase）活性荧光定量检测试剂盒 | 大鼠肝内胆管上皮细胞ADP核糖基化因子6抗体 |
| 胰岛素原抗体 | 淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒LCMV L抗体 |
| 鸡卵泡基膜细胞 | 人肾足细胞 |
| Rat Oligodendrocyte Precursor Cells | Rat primary atrial cardiomyocytes |
手机版：大鼠肝内胆管上皮细胞
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