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| 销售商： 抚州翊立飒生物科技开发有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
细胞分离步骤通用注意事项
无论采用哪种方法，以下几点对于保证细胞活性和实验成功至关重要：
无菌操作：所有步骤都应在超净台中进行，使用的试剂和器材必须无菌，以防细胞污染。
低温环境：在分离过程中，尽量在冰上或4℃环境下操作，以降低细胞代谢，减少损伤。
等渗溶液：使用的所有缓冲液和培养基都必须是等渗的，并含有必要的缓冲体系，以维持细胞正常的渗透压和pH值。
动作轻柔：在吹打、离心和重悬细胞时，动作要轻柔，避免对细胞造成机械损伤。
商品属性：
| 产品名称 | 大鼠腹膜间皮细胞 |
| 英文名称 | Rat Peritoneal Mesothelial Cells |
| 组织来源 | 腹膜组织 |
| 默认种属 | 大鼠 |
| 产品货号 | YLS-XB11210 |
细胞简介 ：
大鼠腹膜间皮分离自腹膜组织；腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜，主要由间皮细胞构成，藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连；腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜（peritoneum）为全身面积大、配布复杂的浆膜，由皮及少量结缔组织构成，薄而光滑，呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄层；覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行，共同围成不规则的潜在性腔隙，称为腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液，在脏器活动时可减少摩擦。腹膜间皮细胞属于上皮组织中的单层扁平上皮，是覆盖于腹膜表面的一层细胞。间皮细胞是构成间皮的细胞，正常大小约为15-25微米，细胞常呈圆形或者卵圆形。其功用是提供润滑，使器官与器官、器官与胸膜与腹膜间都能得到良好的保护，不会互相磨损受伤。而间皮所生产的润滑和保护作用就是靠间皮细胞所分泌的物质来达成，分泌物多半为细胞外基质、玻尿酸类物质。
方法简介 公司实验室分离的大鼠腹膜间皮采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠腹膜间皮经PCK、Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 PLL（0.1mg/ml）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养全流程：
大鼠腹膜间皮分离自腹膜组织；腹膜是存在于高等脊椎动物腹腔中的一层黏膜，主要由间皮细胞构成，藉由结缔组织的支持所形成的一层膜状组织。腹膜包覆大部分腹腔内的器官，能分泌黏液润湿脏器的表面，减轻脏器间的摩擦。腹腔脏器的血液、淋巴和神经组织经由腹膜与外界相连；腹膜也具有吸收撞击保护内脏的效果。腹膜（peritoneum）为全身面积大、配布复杂的浆膜，由皮及少量结缔组织构成，薄而光滑，呈半透明状。衬于腹、盆腔壁内表面的腹膜称为壁腹膜（parietal-peritoneum）或腹壁薄层；覆盖腹、盆腔器表面的部分称为脏腹膜（visceral-peritoneum）腹膜或腹膜脏层。脏腹膜与壁腹膜互相延续、移行，共同围成不规则的潜在性腔隙，称为腹膜腔（peritoneal-cavity）。腹膜腔是脏、壁两层腹膜之间相互移行围成的潜在性间隙。腹膜腔内有少量浆液，在脏器活动时可减少摩擦。腹膜间皮细胞属于上皮组织中的单层扁平上皮，是覆盖于腹膜表面的一层细胞。间皮细胞是构成间皮的细胞，正常大小约为15-25微米，细胞常呈圆形或者卵圆形。其功用是提供润滑，使器官与器官、器官与胸膜与腹膜间都能得到良好的保护，不会互相磨损受伤。而间皮所生产的润滑和保护作用就是靠间皮细胞所分泌的物质来达成，分泌物多半为细胞外基质、玻尿酸类物质。
方法简介 公司实验室分离的大鼠腹膜间皮采用混合胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠腹膜间皮经PCK、Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
包被条件 PLL（0.1mg/ml）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
细胞培养全流程：
原代培养的成功率取决于“快”和“准”。以下是标准化的操作流程：
1. 组织获取与预处理 (关键第一步)
黄金窗口期： 组织离体后，细胞活性会迅速下降。必须在 4-6小时内 完成分离培养。
低温运输： 使用含高浓度抗生素（如双抗或三抗）和血清的预冷培养基（如DMEM/F12）在 4℃ 下运输，以抑制酶活性，降低细胞代谢。
清洗与剪切： 在超净台中，用PBS反复冲洗去除血污，剔除脂肪和结缔组织，用眼科剪将组织剪成 1mm³ 左右的微小碎块。
2. 细胞分离方法 (三大主流)
根据组织类型选择合适的“解离”策略：
方法 适用场景 操作要点 优缺点
酶消化法 大多数实体组织（肝、肾、肿瘤） 使用胰蛋白酶、胶原酶等。需严格控制温度（37℃）和时间。 得率高，但容易损伤细胞膜受体。
组织块贴壁法 软组织、胚胎组织、上皮 将组织块直接贴附瓶底，细胞从边缘游出。 操作简单，损伤小，但生长周期长，得率低。
机械分散法 脑组织、脾脏等松软组织 研磨、过筛网（70μm/40μm）、吹打。 速度快，但细胞损伤较大，易成团。
酶的选择技巧：
胰蛋白酶 (Trypsin)： 作用强，适合细胞间质少的软组织。
胶原酶 (Collagenase)： 专一性水解胶原蛋白，适合纤维性结缔组织（如乳腺、骨、心脏）。
DNA酶 (DNase I)： 若消化液变粘稠（DNA释放），需加入DNase I防止细胞聚集。
3. 接种与培养
终止消化： 加入含 10%-20% 胎牛血清 (FBS) 的培养基，血清中的抗胰蛋白酶因子可立即停止消化反应，保护细胞。
过滤离心： 用细胞筛过滤去除未消化的组织块，离心（1000rpm, 5-10min）收集细胞沉淀。
培养环境： 37℃、5% CO₂、饱和湿度。
观察： 原代细胞贴壁较慢（通常需24-48小时），期间尽量减少移动培养瓶。
主要应用领域：
原代细胞因其高仿真性，在以下领域具有不可替代的价值：
药物研发：用于药物筛选、药效评估、药物代谢和毒性测试，其结果比细胞系更能准确预测药物在人体内的真实反应。
疾病机制研究：作为更贴近生理或病理状态的模型，用于研究癌症、遗传病、感染性疾病等的发生发展机制。
精准医疗：利用患者自身的肿瘤组织分离原代细胞进行药敏试验，可以为个体化治疗方案提供指导。
再生医学与细胞治疗：作为种子细胞，用于组织工程和细胞移植等前沿研究。
基础研究：在基因组学、蛋白质组学、细胞信号通路等研究中，提供更真实的细胞模型。
公司正在出售的产品：
| 硬组织固着液（Susa 固着液） | 激肽酶1抗体 |
| 纸类柠檬酸比色法定量检测试剂盒 | 核酸－蛋白结合凝胶电泳定量分析（McKay）试剂盒 |
| 小量蓝藻菌基因组DNA氯化铯萃取试剂盒 | 冰冻切片β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒 |
| 10倍Tris-T浓缩缓冲清理溶液 | OSGIN2蛋白抗体 |
| 细胞PDGF-A蛋白表达荧光定量检测试剂盒 | 副溶血性弧菌菌体鞭毛蛋白抗体 |
| 纯化溶酶体酸性磷酸酶活性比色法定量检测试剂盒 | 转录接头蛋白EP300抗体 |
| CASPASE-6蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | 铁蛋白Fe65样蛋白2抗体 |
| AF680标记的肌动蛋白α/α-SMA/α Actin单克隆抗体 | FA20A抗体 |
| RNA探针同位素（[α32P]CTP）聚合酶标记试剂盒 | 磷酸化真核翻译起始因子4B抗体 |
| 细胞脯肽酶（prolidase；PLD）紫外比色法定量检测试剂盒 | 蛋白酶体PSMβ3抗体 |
| 体液腺苷酸环化酶（Adenylate Cyclase）活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒 | 大鼠腹膜间皮细胞ADP核糖基化样因子1抗体 |
| 胰淀粉酶抗体 | 淋巴组织表达受体蛋白样蛋白2抗体 |
| 大鼠肾皮质上皮细胞 | 兔髓核细胞 |
| Rat Oligodendrocyte Cells | Primary rat microglia cell |
手机版：大鼠腹膜间皮细胞
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