产品概述
腺瘤性结肠息肉病蛋白2抗体是针对腺瘤性结肠息肉病相关蛋白2的特异性抗体,该蛋白可能参与Wnt信号通路调控、细胞增殖与分化等过程,其功能异常与结肠癌发生发展密切相关。该抗体多以兔多克隆或单克隆形式存在,经过亲和纯化处理,具有高特异性和灵敏度,可与人类、小鼠、大鼠等物种的目标蛋白发生交叉反应。适用于免疫印迹(WB)、酶联免疫吸附实验(ELISA)、免疫组化(IHC-P/IHC-F)、免疫沉淀(IP)、染色质免疫共沉淀(ChIP)等实验,能精准检测目标蛋白的表达水平及与其他蛋白的相互作用,为研究结肠癌发病机制及早期诊断提供重要工具。
产品基本信息
中文名称:腺瘤性结肠息肉病蛋白2抗体
英文名称:Adenomatous Polyposis Coli Protein 2 Antibody
别 名:Adenomatous polyposis coli protein 2; Adenomatous polyposis coli protein-like; APCL; APC2_HUMAN.
研究领域:肿瘤 免疫学 细胞粘附分子 细胞骨架
抗体来源:Rabbit
克隆类型:Polyclonal
交叉反应;(predicted: Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Horse, )
产品应用:ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量:244kDa
细胞定位:细胞浆 细胞膜
性 状:Liquid
浓 度:1mg/ml
免 疫 原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human APCL/APC2: 1-100/2303
亚 型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
Function:
APC2 might function in the Wnt signaling pathway through it's ability to promote the rapid degradation of beta-catenin. It also functions as a tumour suppressor.
实验操作过程建议
Western Blot
凝胶制备:分离胶浓度根据靶蛋白分子量选择(如20kDa用15%胶,100kDa用8%胶);
转膜:用湿转或半干转,转膜电流/电压根据蛋白分子量调整,小分子蛋白缩短转膜时间,大分子蛋白延长时间;
封闭:用5%脱脂牛奶或BSA封闭1-2小时,避免非特异性结合(磷酸化蛋白检测需用BSA封闭);
抗体孵育:一抗4℃孵育过夜,二抗室温孵育1小时,减少背景信号。
IHC/IF
组织切片:厚度控制在4-6μm,避免过厚导致染色不均;
抗原修复:IHC常用柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)高压修复,IF常用Triton X-100透化,根据抗体说明书选择合适方法;
抗体孵育:IHC用3%H₂O₂灭活内源性过氧化物酶,IF用5%BSA封闭非特异性结合,孵育抗体时注意避光(IF);
染色后处理:IHC用苏木素复染细胞核,IF用DAPI染核,封片时避免产生气泡。
ELISA
包被:用碳酸盐缓冲液(pH9.6)稀释抗原/抗体,4℃包被过夜,确保抗原/抗体均匀吸附在板上;
孵育:严格控制孵育时间和温度,避免出现边缘效应;
洗板:每步洗板3-5次,拍干孔内液体,避免残留未结合的抗体或抗原;
显色:加入底物后避光显色,显色时间根据说明书调整,避免显色过度。
IP
细胞裂解:用温和的非离子型去污剂(如NP-40)裂解细胞,保持蛋白复合物的稳定性;
抗体-磁珠孵育:提前将一抗与Protein A/G磁珠孵育1-2小时,形成抗体-磁珠复合物,减少非特异性结合;
洗涤:用含低浓度去污剂的洗涤液洗涤3-5次,去除非特异性结合的蛋白;
洗脱:用中性pH的洗脱液或煮沸法洗脱,避免蛋白变性。
公司正在出售的产品
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羧肽酶D检测试剂盒 CPD ELISA Kit |
| 肺鼠疫耶尔森氏菌F1荚膜蛋白抗体(C端) |
羧肽酶A6检测试剂盒 CPA6 ELISA Kit |
实验操作结果判断
WB:条带单一清晰为有效结果,若出现杂带,可能是抗体非特异性结合或蛋白降解;
IHC/IF:阳性信号定位准确为有效结果,若背景过高,可能是封闭不充分或抗体浓度过高;
ELISA:孔间吸光度值变异系数(CV)<10%为有效结果,若CV过大,可能是包被不均或洗板不彻底;
IP:能检测到靶蛋白及相互作用蛋白为有效结果,若未检测到,可能是蛋白相互作用弱或裂解条件不当。