产品概述
腺苷酸激酶-1(AK1)抗体是针对AK1蛋白的特异性抗体,AK1是细胞内参与能量代谢的关键酶,可催化腺苷酸之间的磷酸基团转移,维持细胞内ATP、ADP、AMP的平衡,在肌肉组织、神经系统等能量需求旺盛的组织中高表达,其功能异常与肌病、神经退行性疾病等相关。该抗体多以兔多克隆或单克隆形式存在,经过亲和纯化处理,具有高特异性和灵敏度,可与人类、小鼠、大鼠等物种的AK1蛋白发生交叉反应。适用于免疫印迹(WB)、免疫组化(IHC)、免疫荧光(IF)、酶活性检测配套实验等,能精准检测AK1的表达水平,为研究细胞能量代谢调控机制及相关疾病发病机制提供重要工具。
产品基本信息
中文名称:腺苷酸激酶-1抗体
英文名称:Adenylate Kinase 1 Antibody
别 名:AK 1; AK1; AK-1; KAD1_HUMAN; Adenylate kinase isoenzyme 1; Adenylate kinase soluble; ATP AMP transphosphorylase; Myokinase; ATP-AMP transphosphorylase 1.
研究领域:肿瘤 心血管 信号转导 新陈代谢
抗体来源:Rabbit
克隆类型:Polyclonal
交叉反应:(predicted: Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep, Goat, Monkey, )
产品应用:ELISA=1:5000-10000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复)
not yet tested in other applications.
optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.
理论分子量:21kDa
细胞定位:细胞浆
性 状:Liquid
浓 度:1mg/ml
免 疫 原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human Adenylate Kinase 1: 131-194/194
亚 型:IgG
纯化方法:affinity purified by Protein A
保存条件;Shipped at 4℃. Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles.
注意事项:This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.
Function:
Catalyzes the reversible transfer of the terminal phosphate group between ATP and AMP. Small ubiquitous enzyme involved in energy metabolism and nucleotide synthesis that is essential for maintenance and cell growth.
实验操作过程建议
Western Blot
凝胶制备:分离胶浓度根据靶蛋白分子量选择(如20kDa用15%胶,100kDa用8%胶);
转膜:用湿转或半干转,转膜电流/电压根据蛋白分子量调整,小分子蛋白缩短转膜时间,大分子蛋白延长时间;
封闭:用5%脱脂牛奶或BSA封闭1-2小时,避免非特异性结合(磷酸化蛋白检测需用BSA封闭);
抗体孵育:一抗4℃孵育过夜,二抗室温孵育1小时,减少背景信号。
IHC/IF
组织切片:厚度控制在4-6μm,避免过厚导致染色不均;
抗原修复:IHC常用柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)高压修复,IF常用Triton X-100透化,根据抗体说明书选择合适方法;
抗体孵育:IHC用3%H₂O₂灭活内源性过氧化物酶,IF用5%BSA封闭非特异性结合,孵育抗体时注意避光(IF);
染色后处理:IHC用苏木素复染细胞核,IF用DAPI染核,封片时避免产生气泡。
ELISA
包被:用碳酸盐缓冲液(pH9.6)稀释抗原/抗体,4℃包被过夜,确保抗原/抗体均匀吸附在板上;
孵育:严格控制孵育时间和温度,避免出现边缘效应;
洗板:每步洗板3-5次,拍干孔内液体,避免残留未结合的抗体或抗原;
显色:加入底物后避光显色,显色时间根据说明书调整,避免显色过度。
IP
细胞裂解:用温和的非离子型去污剂(如NP-40)裂解细胞,保持蛋白复合物的稳定性;
抗体-磁珠孵育:提前将一抗与Protein A/G磁珠孵育1-2小时,形成抗体-磁珠复合物,减少非特异性结合;
洗涤:用含低浓度去污剂的洗涤液洗涤3-5次,去除非特异性结合的蛋白;
洗脱:用中性pH的洗脱液或煮沸法洗脱,避免蛋白变性。
公司正在出售的产品
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实验操作结果判断
WB:条带单一清晰为有效结果,若出现杂带,可能是抗体非特异性结合或蛋白降解;
IHC/IF:阳性信号定位准确为有效结果,若背景过高,可能是封闭不充分或抗体浓度过高;
ELISA:孔间吸光度值变异系数(CV)<10%为有效结果,若CV过大,可能是包被不均或洗板不彻底;
IP:能检测到靶蛋白及相互作用蛋白为有效结果,若未检测到,可能是蛋白相互作用弱或裂解条件不当。