产品信息:

英文名称 Rabbit Pancreatic Stellate Cells
产品名称 兔胰腺星状细胞
组织来源 胰腺组织
默认种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25
货号:YS-01X7192
功能学验证 这是验证兔胰腺星状细胞是否“名副其实”的关键步骤,通过检测细胞是否具备其应有的生理功能来确认其身份。
兔胰腺星状细胞特异性功能检测:例如,检测肝细胞的糖原合成能力、胰岛细胞分泌胰岛素的能力或神经元的电生理活动。
细胞行为分析:通过细胞迁移、侵袭等实验来评估其功能特性。
特殊染色:使用特定的染色方法来显示细胞内的特殊物质。例如,用油红O染色来鉴定脂肪兔胰腺星状细胞的脂滴,或用PAS染色来显示糖原。
细胞简介 :

兔胰腺星状细胞分离自胰腺组织;胰腺分为外分泌腺和内分泌腺两部分。外分泌腺由腺泡和腺管组成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有碳酸氢钠、胰蛋白酶原、脂肪酶、淀粉酶等。胰液通过胰腺管排入十二指肠,有消化蛋白质、脂肪和糖的作用。内分泌腺由大小不同的细胞团──胰岛所组成,胰岛主要由4种细胞组成:α细胞、β细胞、γ细胞及PP细胞。α细胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β细胞分泌胰岛素,降低血糖;γ细胞分泌生长抑素,以旁分泌的方式抑制α、β细胞的分泌;PP细胞分泌胰多肽,抑制胃肠运动、胰液分泌和胆囊收缩。纤维化是慢性胰腺炎的典型病理特征,活化的胰腺星状细胞(PSC)是胰腺纤维化的主要效应细胞,PSC分离和成功培养是体外研究胰腺纤维化的重要前提。未活性化的PSC胞浆中富含维A脂滴,并表达Desmin蛋白,活化后的PSC则表达α-平滑肌肌动蛋白(alpha-SMA)。PSC具有静息态与激活态两种,并分别具有特异的标志物。静息状态PSC胞质内富含的维生素A脂滴可以被油红O染成红色,阳性表达Desmin。激活状态PSC阳性表达alpha-SMA。油红O染色发现,原代分离的细胞培养6d,胞浆中仍可见明显的脂滴,传代后,橙红色的脂滴颗粒显著减少甚至消失。免疫细胞化学染色显示,细胞接种24h仍然表达Desmin,48h后Desmin基本不再表达。培养48h后绝大多数细胞开始表达alpha-SMA,随着培养时间的增长和传代次数的增加,细胞表达alpha-SMA,而不再表达Desmin,说明细胞活化。提示PSC接种24h后即启动了激活过程,至培养第6d大多数细胞激活,传代后细胞处于高度激活状态。原代胰腺星状细胞可作为慢性胰腺炎新药的细胞筛选模型,目前研究发现:胰腺受损时,在各种刺激因子作用下使胰腺星状细胞活化,导致细胞形态、功能发生变化,促使基质增生、胶原蛋白的大量生成及不规则沉积。
方法简介 公司实验室分离的兔胰腺星状细胞采用胶原酶消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的兔胰腺星状细胞经α-SMA、Desmin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传3-5代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
兔胰腺星状细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞分离步骤:
从实体组织中分离细胞
这个过程的核心目标是将紧密连接的组织解离成单个细胞,形成单细胞悬液。通常包括以下几个步骤:
组织获取与清洗:在无菌条件下获取目标组织,并使用预冷的、不含钙镁离子的平衡盐溶液(如Hanks液或PBS)反复冲洗,以去除血液、坏死组织和杂质。
组织剪碎:使用无菌的解剖刀或剪刀将组织块剪切成约1-3 mm³的小块,以增大后续处理的表面积。
细胞解离:这是最关键的一步,主要有两种方法,也常结合使用。
机械法:通过物理手段分散细胞。例如,用吸管反复吹打、通过不同孔径的细胞筛(如100-200目)过滤、或使用磁力搅拌器进行温和搅拌。
酶消化法:使用特定的酶来分解细胞间的连接蛋白和细胞外基质。常用的酶包括:
胰蛋白酶 (Trypsin):适用于消化细胞间质较少的软组织,如肝、肾、胚胎组织等。通常在37℃下孵育20-30分钟。
胶原酶 (Collagenase):对胶原纤维有很强的消化作用,特别适用于消化富含结缔组织的硬质组织,如肿瘤、乳腺、皮肤等。
Dispase:一种中性蛋白酶,作用相对温和,对细胞损伤较小。
终止消化与过滤:加入含有血清的完全培养基来终止酶的活性(血清中含有酶抑制剂)。随后,用细胞筛(如100μm或更小孔径)过滤细胞悬液,以去除未消化的组织块和大的细胞团。
离心与洗涤:将过滤后的细胞悬液在较低速度下(如500g)离心5-10分钟,弃去上清液。用新鲜的培养基或缓冲液重悬细胞沉淀,重复洗涤1-2次,以彻底去除残留的酶和细胞碎片。
细胞计数与接种:使用血细胞计数板对分离出的细胞进行计数和活性检测(如台盼蓝染色),然后根据实验需求调整细胞密度,接种到培养皿中进行培养。
细胞分离步骤通用注意事项:
无论采用哪种方法,以下几点对于保证细胞活性和实验成功至关重要:
无菌操作:所有步骤都应在超净台中进行,使用的试剂和器材必须无菌,以防细胞污染。
低温环境:在分离过程中,尽量在冰上或4℃环境下操作,以降低细胞代谢,减少损伤。
等渗溶液:使用的所有缓冲液和培养基都必须是等渗的,并含有必要的缓冲体系,以维持细胞正常的渗透压和pH值。
动作轻柔:在吹打、离心和重悬细胞时,动作要轻柔,避免对细胞造成机械损伤。
公司正在出售的产品:
| 冰冻切片游离毛地黄皂苷法(DIGITONIN)舒尔茨染色试剂盒 |
AF750标记的白细胞共同抗原CD45抗体 |
| 酵母钙ATP酶(Ca++ -ATPase)活性比色法定量检测试剂盒 |
甲基化组蛋白H3(mono methyl K79)单克隆抗体 |
| 调料比色法定量检测试剂盒 |
睾酮调节细胞凋亡诱导和肿瘤抑制基因抗体 |
| 组织脯肽酶(prolidase;PLD)紫外比色法定量检测试剂盒 |
Phocein蛋白抗体 |
| 组织巨噬细胞型抗酒石酸酸性磷酸酶(STRACP)活性比色法定量检测试剂盒 |
转录因子MAFG抗体 |
| 冰冻切片组织P35蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
同源异型盒基因HOXA5蛋白抗体 |
| 细胞INSULIN R-ALPHA 蛋白表达比色法定量检测试剂盒 |
FAM21D蛋白抗体 |
| 食物糖精(saccharin)含量红外光谱法定量检测试剂盒 |
钠钙交换蛋白2抗体 |
| 体液HPV6(HUMAN PAPILLOMAVIRUS-6)病毒定性检测试剂盒 |
第8号染色体开放阅读框78抗体 |
| 体液肌酸激酶同工酶肌肉型(CK-MM)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒 |
乙型肝炎病毒X蛋白反转录蛋白4抗体 |
| 动物组织高纯内质网分离试剂盒 |
AP2关联激酶1抗体 |
| 蛋白电泳2倍样品处理液 |
磷酸化DNA修复蛋白NBS1抗体 |
| 人外周血白细胞 |
兔胰腺星状细胞Human Placental Mesenchymal Stem Cells |
| 大鼠甲状腺上皮细胞 |
Primary rat conjunctival sac fibroblasts |