产品信息:

英文名称 Rabbit Peripheral Blood Mononuclear Cells
产品名称 兔外周血单个核细胞
组织来源 血液组织
默认种属 兔
产品规格 5×10^5Cells/T25
货号:YS-01X7200
细胞简介 :

兔外周血单个核细胞分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。外周血单个核细胞(PBMC)即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。目前,主要的分离方法是密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异,因此得以分离出不同的细胞。
方法简介 公司实验室分离的兔外周血单个核细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的兔外周血单个核细胞经过检测,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
兔外周血单个核细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞分离步骤:
从实体组织中分离细胞
这个过程的核心目标是将紧密连接的组织解离成单个细胞,形成单细胞悬液。通常包括以下几个步骤:
组织获取与清洗:在无菌条件下获取目标组织,并使用预冷的、不含钙镁离子的平衡盐溶液(如Hanks液或PBS)反复冲洗,以去除血液、坏死组织和杂质。
组织剪碎:使用无菌的解剖刀或剪刀将组织块剪切成约1-3 mm³的小块,以增大后续处理的表面积。
细胞解离:这是最关键的一步,主要有两种方法,也常结合使用。
机械法:通过物理手段分散细胞。例如,用吸管反复吹打、通过不同孔径的细胞筛(如100-200目)过滤、或使用磁力搅拌器进行温和搅拌。
酶消化法:使用特定的酶来分解细胞间的连接蛋白和细胞外基质。常用的酶包括:
胰蛋白酶 (Trypsin):适用于消化细胞间质较少的软组织,如肝、肾、胚胎组织等。通常在37℃下孵育20-30分钟。
胶原酶 (Collagenase):对胶原纤维有很强的消化作用,特别适用于消化富含结缔组织的硬质组织,如肿瘤、乳腺、皮肤等。
Dispase:一种中性蛋白酶,作用相对温和,对细胞损伤较小。
终止消化与过滤:加入含有血清的完全培养基来终止酶的活性(血清中含有酶抑制剂)。随后,用细胞筛(如100μm或更小孔径)过滤细胞悬液,以去除未消化的组织块和大的细胞团。
离心与洗涤:将过滤后的细胞悬液在较低速度下(如500g)离心5-10分钟,弃去上清液。用新鲜的培养基或缓冲液重悬细胞沉淀,重复洗涤1-2次,以彻底去除残留的酶和细胞碎片。
细胞计数与接种:使用血细胞计数板对分离出的细胞进行计数和活性检测(如台盼蓝染色),然后根据实验需求调整细胞密度,接种到培养皿中进行培养。
细胞分离步骤通用注意事项:
无论采用哪种方法,以下几点对于保证细胞活性和实验成功至关重要:
无菌操作:所有步骤都应在超净台中进行,使用的试剂和器材必须无菌,以防细胞污染。
低温环境:在分离过程中,尽量在冰上或4℃环境下操作,以降低细胞代谢,减少损伤。
等渗溶液:使用的所有缓冲液和培养基都必须是等渗的,并含有必要的缓冲体系,以维持细胞正常的渗透压和pH值。
动作轻柔:在吹打、离心和重悬细胞时,动作要轻柔,避免对细胞造成机械损伤。
公司正在出售的产品:
| 冰冻切片平滑肌组织染色试剂盒 |
D-DIMER单克隆抗体 |
| 细菌氯乙酰转移酶(CAT)活性荧光定量检测试剂盒 |
钾离子通道多聚体结构域蛋白1抗体 |
| 体外非细胞系统细胞色素P450亚酶CYP19(MFC)活性 |
谷胱甘肽S转移酶M3抗体 |
| 组织长链羟脂酰脱氢酶(HYDROXYACYL COA DEHYDROGENASE)活性比色法定量检测试剂盒 |
RAD51AP2蛋白抗体 |
| 锌(Zn)定量检测试剂盒 |
滋养层细胞特异性蛋白α抗体 |
| 石蜡切片组织COLLAGEN III蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
吞噬刺激肽抗体 |
| 细胞IKB-ALPHA蛋白表达比色法定量检测试剂盒 |
FBXL20蛋白抗体 |
| 食物维生素B1比色法定量检测试剂盒 |
脑型脂肪酸结合蛋白抗体 |
| 植物种子活性叶绿体分离试剂盒 |
毒蕈碱型乙酰胆碱受体M5抗体 |
| 组织基质金属(MMP-2)活性荧光定量检测试剂盒 |
有机溶质转运蛋白OSTβ抗体 |
| 组织样品氧化酶活性测定试剂盒 |
APC标记小鼠CD107a单克隆抗体 |
| 初级离心柱DNA回收试剂盒 |
磷酸化T细胞激活核转录因子4抗体 |
| 人胎盘绒毛膜细胞 |
兔外周血单个核细胞Human Retinal Muller Cells |
| 大鼠结膜上皮细胞 |
Rat primary oral mucosal epithelial cells |