商品属性:
| 产品名称 |
棒状乳杆菌棒状亚种 |
货号 |
BKJ4337 |
| 英文名称 |
Lactobacillus coryniformis subsp. coryniformis |
用途 |
仅供科研实验 |
保存条件:

冻干粉:4–10°C 冷藏,保质期5–10年
甘油菌:-80°C 保存,避免反复冻融
斜面菌种:4°C 短期保存(1–2个月)
复苏与操作流程:
1、冻干粉复苏:
离心使菌粉沉底,酒精消毒后火焰加热管顶,滴加无菌水破裂。
加入0.2–0.3 mL复溶液,轻弹混匀,全部接种至YPD斜面或液体培养基 。
28°C培养24–48小时,观察菌落生长。
2、甘油菌使用:
蘸取少量甘油菌直接涂板或接种液体培养基,无需完全融化 。
28°C摇床培养12–16小时即可获得对数期菌液。
3、质粒转化:
推荐使用电转化法或LiAc/PEG法导入pYD1系列质粒。
转化后涂布SC-Ura平板,28°C倒置培养48–72小时筛选单克隆 。
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检测原理:
一、检测原理的核心逻辑
检测过程遵循“表达 → 展示 → 标记 → 分析”的闭环流程:
外源蛋白与酵母锚定蛋白(如Aga2p)融合表达;
融合蛋白被定向锚定在酵母细胞壁表面;
利用特异性抗体识别融合蛋白上的标签(如c-Myc、HA);
通过荧光标记的二抗与流式细胞仪检测荧光信号,判断蛋白是否成功展示及展示水平。
二、关键检测步骤详解
1. 诱导表达与表面展示
使用GAL1启动子控制融合蛋白表达:在含半乳糖的培养基中诱导,葡萄糖中抑制。
外源蛋白(如scFv抗体、酶)与Aga2p锚定蛋白融合,在酵母内质网中正确折叠并完成糖基化等修饰。
融合蛋白通过Aga1p-Aga2p二硫键系统稳定展示于细胞表面 。
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