功能学验证 这是验证人主动脉平滑肌细胞是否“名副其实”的关键步骤,通过检测细胞是否具备其应有的生理功能来确认其身份。
人主动脉平滑肌细胞特异性功能检测:例如,检测肝细胞的糖原合成能力、胰岛细胞分泌胰岛素的能力或神经元的电生理活动。
细胞行为分析:通过细胞迁移、侵袭等实验来评估其功能特性。
特殊染色:使用特定的染色方法来显示细胞内的特殊物质。例如,用油红O染色来鉴定脂肪人主动脉平滑肌细胞的脂滴,或用PAS染色来显示糖原。
产品信息:

英文名称 Human Aortic Smooth Muscle Cells
产品名称 人主动脉平滑肌细胞
组织来源 主动脉组织
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
货号:YS-01X7289
细胞简介 :

人主动脉平滑肌细胞分离自主动脉组织;主动脉是体循环的动脉主干。其运行路径为:升主动脉起于左心室,至右侧第2胸肋关节高度移行为主动脉弓,弓行向左后至第4胸椎体下缘移行为降主动脉;在第12胸椎体高度穿膈的主动脉裂孔移行为腹主动脉,以上为胸主动脉,至第4腰椎体下缘分为左、右髂总动脉;髂总动脉在骶髂关节高度分为髂内、外动脉。主动脉平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。主动脉平滑肌细胞在心血管疾病发生、发展中具有重要作用,以主动脉平滑肌细胞为实验研究对象,探讨心血管疾病相关发病机制是目前研究的热点;体外培养的主动脉平滑肌细胞对于研究其生理功能、药物作用以及各种致病因素作用下的病理生理改变具重要意义。
方法简介 公司实验室分离的人主动脉平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人主动脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
人主动脉平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞分离步骤:
从实体组织中分离细胞
这个过程的核心目标是将紧密连接的组织解离成单个细胞,形成单细胞悬液。通常包括以下几个步骤:
组织获取与清洗:在无菌条件下获取目标组织,并使用预冷的、不含钙镁离子的平衡盐溶液(如Hanks液或PBS)反复冲洗,以去除血液、坏死组织和杂质。
组织剪碎:使用无菌的解剖刀或剪刀将组织块剪切成约1-3 mm³的小块,以增大后续处理的表面积。
细胞解离:这是最关键的一步,主要有两种方法,也常结合使用。
机械法:通过物理手段分散细胞。例如,用吸管反复吹打、通过不同孔径的细胞筛(如100-200目)过滤、或使用磁力搅拌器进行温和搅拌。
酶消化法:使用特定的酶来分解细胞间的连接蛋白和细胞外基质。常用的酶包括:
胰蛋白酶 (Trypsin):适用于消化细胞间质较少的软组织,如肝、肾、胚胎组织等。通常在37℃下孵育20-30分钟。
胶原酶 (Collagenase):对胶原纤维有很强的消化作用,特别适用于消化富含结缔组织的硬质组织,如肿瘤、乳腺、皮肤等。
Dispase:一种中性蛋白酶,作用相对温和,对细胞损伤较小。
终止消化与过滤:加入含有血清的完全培养基来终止酶的活性(血清中含有酶抑制剂)。随后,用细胞筛(如100μm或更小孔径)过滤细胞悬液,以去除未消化的组织块和大的细胞团。
离心与洗涤:将过滤后的细胞悬液在较低速度下(如500g)离心5-10分钟,弃去上清液。用新鲜的培养基或缓冲液重悬细胞沉淀,重复洗涤1-2次,以彻底去除残留的酶和细胞碎片。
细胞计数与接种:使用血细胞计数板对分离出的细胞进行计数和活性检测(如台盼蓝染色),然后根据实验需求调整细胞密度,接种到培养皿中进行培养。
细胞分离步骤通用注意事项:
无论采用哪种方法,以下几点对于保证细胞活性和实验成功至关重要:
无菌操作:所有步骤都应在超净台中进行,使用的试剂和器材必须无菌,以防细胞污染。
低温环境:在分离过程中,尽量在冰上或4℃环境下操作,以降低细胞代谢,减少损伤。
等渗溶液:使用的所有缓冲液和培养基都必须是等渗的,并含有必要的缓冲体系,以维持细胞正常的渗透压和pH值。
动作轻柔:在吹打、离心和重悬细胞时,动作要轻柔,避免对细胞造成机械损伤。
公司正在出售的产品:
| 电镜样品固着液(Karnovsky固着液) |
AF680标记的程序性死亡配体1抗体 |
| 组织ZAP70激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
激活STAT蛋白抑制因子4抗体 |
| 食物果聚糖化学比色法定量检测试剂盒 |
干扰素alpha诱导蛋白6抗体 |
| 细菌(PROTEASE)比色法(440)定量检测试剂盒 |
PE标记人CD44单克隆抗体 |
| 核固红复染试剂盒 |
转化生长因子β活化激酶1抗体 |
| 载玻片细胞VEGF蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
天门冬氨酸β羟化酶抗体 |
| 细胞CASPASE-5蛋白表达比色法定量检测试剂盒 |
EXOC7蛋白抗体 |
| 同位素[γ32P]ATP激酶标记微卫星扩增试剂盒 |
绵羊肺腺瘤病毒囊膜蛋白单克隆抗体 |
| 细胞HHV6-A(HUMAN HERPESVIRUS 6-A)病毒定性检测试剂盒 |
蛋白酶活化受体4抗体 |
| 组织CDK6/CYC D1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
胰岛素样生长因子结合蛋白3抗体 |
| 动物细胞β-半乳糖苷酶活性高质敏感比色法定量检测试剂盒 |
Ⅹ型胶原抗体 |
| 动物硬组织可溶性膜蛋白相位分离制备试剂盒 |
淋巴细胞抗原6B抗体 |
| 人脐动脉内皮细胞 |
人主动脉平滑肌细胞Human Skin Cancer Tissue-Derived Cells |
| 大鼠心肌干细胞 |
Rat thymic stromal cells |