功能学验证 这是验证人微血管周细胞是否“名副其实”的关键步骤,通过检测细胞是否具备其应有的生理功能来确认其身份。
人微血管周细胞特异性功能检测:例如,检测肝细胞的糖原合成能力、胰岛细胞分泌胰岛素的能力或神经元的电生理活动。
细胞行为分析:通过细胞迁移、侵袭等实验来评估其功能特性。
特殊染色:使用特定的染色方法来显示细胞内的特殊物质。例如,用油红O染色来鉴定脂肪人微血管周细胞的脂滴,或用PAS染色来显示糖原。
产品信息:

英文名称 Human Microvascular Pericyte Cells
产品名称 人微血管周细胞
组织来源 微血管组织
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
货号:YS-01X7515
细胞简介 :

人微血管周细胞分离自微血管组织;周细胞(pericyte)又称Rouget细胞和壁细胞,是一种包围全身毛细血管和静脉中内皮细胞的细胞,可以收缩。周细胞嵌入毛细血管内皮细胞的基膜中,通过物理接触和旁分泌信号与内皮细胞进行细胞通讯,监视和稳定内皮细胞的成熟过程。此外,周细胞还具有调控毛细血管血流量、细胞碎屑清除和吞噬以及血脑屏障渗透性的作用,其多功能性是目前研究的热点之一,所以对血管周细胞的生物学特征、标记物、细胞功能等的研究都为相关研究提供基础资料。周细胞产生手指状的外延以调控毛细血管的血流量。周细胞和内皮细胞之间共同拥有一个基膜,基膜上有多种细胞连接,包括多种整合素、神经钙黏素、纤连蛋白以及接合素。它还参与毛细血管直径的双向调控;毛细血管受损时,周细胞还可增殖,分化为内皮细胞和成纤维细胞。
方法简介 公司实验室分离的人血管周细胞采用胶原酶-中性蛋白酶联合消化法及不锈钢网筛过滤法结合密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人微血管周细胞经alpha-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
人微血管周细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞分离步骤:
从液体样本中分离细胞
对于血液、骨髓、腹水等本身就是细胞悬液的样本,分离过程主要基于细胞的物理特性(如密度、大小)或生物学特性(如表面标志物)进行纯化。
1. 密度梯度离心法
这是从外周血中分离外周血单个核细胞,主要包括淋巴细胞和单核细胞)最常用的方法。
原理:利用不同细胞的密度差异。通过离心,使细胞在特定密度的分离液(如Ficoll-Hypaque,密度为1.077 g/ml)中分层。
简要步骤:
将抗凝血用PBS等倍稀释。
小心地将稀释后的血液叠加在密度梯度分离液的上层,保持清晰的界面。
在室温下进行水平离心(如2000 rpm,20分钟,升降速要慢)。
离心后,试管中会形成清晰的层次:最上层是血浆和血小板,中间灰白色的薄层是PBMCs,下层是分离液和红细胞/粒细胞。
小心吸取中间的PBMC层,用缓冲液洗涤离心2次,即可获得较纯的单个核细胞。
2. 基于细胞特性的分离方法
当需要更高纯度的特定细胞亚群时,会采用以下技术:
贴壁筛选法:利用某些细胞(如单核细胞、成纤维细胞)能够贴附在培养皿表面生长,而其他细胞(如淋巴细胞)不能贴壁的特性,通过简单的换液操作即可分离。
流式细胞分选术 (FACS):一种高精度、高通量的细胞分选技术。它利用荧光标记的特异性抗体识别细胞表面的特定分子,通过仪器将单个细胞液滴带上不同电荷,在电场中偏转,从而将目标细胞从混合群体中精确地分选出来,纯度可达95%以上。
免疫磁珠法 (MACS):一种操作简便、快速且能获得高纯度细胞的方法。将特异性抗体包被在磁性微球上,与细胞悬液孵育后,抗体与目标细胞结合。然后将混合液通过置于磁场中的分离柱,结合了磁珠的细胞被吸附在柱内,未结合的细胞则流出。移出磁场后,即可洗脱得到高纯度的目标细胞,纯度可达95%-99%。
主要应用领域:
得益于其独特的生物学特性,原代细胞被广泛应用于:
药物筛选与毒性测试: 能够更准确地预测药物在人体内的疗效和毒副作用,尤其是在药物代谢和毒理学研究中。
疾病机制研究: 利用患者来源的原代细胞构建疾病模型,可以更真实地研究癌症、遗传病等疾病的发病机理。
再生医学与组织工程: 作为种子细胞,用于开发细胞疗法、修复或替换受损的组织和器官。
基础细胞生物学研究: 用于研究细胞的正常生理功能,如信号传导、代谢、衰老等。
病毒学与疫苗生产: 用于病毒的分离、培养以及疫苗的生产。
公司正在出售的产品:
| 血液葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)活性酶动力比色法 |
11号染色体开放阅读框77抗体 |
| 细菌磷脂酶C(Phospholipase C)活性荧光定量检测试剂盒 |
角膜上皮蛋白TGFBI抗体 |
| 可溶性纯化叶绿体总蛋白制备试剂盒 |
过氧化物酶体生物合成因子11B抗体 |
| 组织游离酶连续循环比色法定量检测试剂盒 |
RHOD蛋白抗体 |
| 人血液前白蛋白(prealbumin;PA)免疫比浊法定量检测试剂盒 |
组织胺H4受体抗体 |
| 性染色体分离(Ericsson法)试剂盒 |
微小染色体维持缺陷蛋白结合蛋白抗体 |
| 石蜡切片组织钙钠交换体(NCX)蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
FITC标记人CD9单克隆抗体 |
| 通用型鱼气单细胞菌属(Aeromonas salmonicida) |
尿路上皮特异蛋白1a抗体 |
| 吸烟者人体肺组织S9组分(5毫克/毫升) |
二甲基化组蛋白H3K4抗体 |
| 组织对氧磷酶2(PON2)活性比色法定量检测试剂盒 |
运动神经元生存蛋白1抗体 |
| 脂肪肝比色法定量检测试剂盒 |
A型禽流感病毒H7N9 M1蛋白抗体 |
| 微型RNA(miRNA)同位素探针制备试剂盒 |
磷酸化非受体性蛋白酪氨酸激酶ETK抗体 |
| 人口腔黏膜成纤维细胞 |
人微血管周细胞Human Colon Cancer Tissue-Derived Cells |
| 人肺癌细胞 |
Primary human epididymal fibroblasts cells |