功能学验证 这是验证人外周血单个核细胞是否“名副其实”的关键步骤,通过检测细胞是否具备其应有的生理功能来确认其身份。
人外周血单个核细胞特异性功能检测:例如,检测肝细胞的糖原合成能力、胰岛细胞分泌胰岛素的能力或神经元的电生理活动。
细胞行为分析:通过细胞迁移、侵袭等实验来评估其功能特性。
特殊染色:使用特定的染色方法来显示细胞内的特殊物质。例如,用油红O染色来鉴定脂肪人外周血单个核细胞的脂滴,或用PAS染色来显示糖原。
产品信息:

英文名称 Human Peripheral Blood Mononuclear Cells
产品名称 人外周血单个核细胞
组织来源 外周血
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
货号:YS-01X7487
细胞简介 :

人外周血单个核细胞分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中首次提出外周血这一新概念。外周血单个核细胞(PBMC)即外周血中具有单个核的细胞,包括淋巴细胞和单核细胞。目前,主要的分离方法是密度梯度离心法,因为血液中各有形成分的比重存在差异,因此得以分离出不同的细胞。
方法简介 公司实验室分离的人外周血单个核细胞采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人外周血单个核细胞经过检测,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 半贴半悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
人外周血单个核细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞分离步骤:
从实体组织中分离细胞
这个过程的核心目标是将紧密连接的组织解离成单个细胞,形成单细胞悬液。通常包括以下几个步骤:
组织获取与清洗:在无菌条件下获取目标组织,并使用预冷的、不含钙镁离子的平衡盐溶液(如Hanks液或PBS)反复冲洗,以去除血液、坏死组织和杂质。
组织剪碎:使用无菌的解剖刀或剪刀将组织块剪切成约1-3 mm³的小块,以增大后续处理的表面积。
细胞解离:这是最关键的一步,主要有两种方法,也常结合使用。
机械法:通过物理手段分散细胞。例如,用吸管反复吹打、通过不同孔径的细胞筛(如100-200目)过滤、或使用磁力搅拌器进行温和搅拌。
酶消化法:使用特定的酶来分解细胞间的连接蛋白和细胞外基质。常用的酶包括:
胰蛋白酶 (Trypsin):适用于消化细胞间质较少的软组织,如肝、肾、胚胎组织等。通常在37℃下孵育20-30分钟。
胶原酶 (Collagenase):对胶原纤维有很强的消化作用,特别适用于消化富含结缔组织的硬质组织,如肿瘤、乳腺、皮肤等。
Dispase:一种中性蛋白酶,作用相对温和,对细胞损伤较小。
终止消化与过滤:加入含有血清的完全培养基来终止酶的活性(血清中含有酶抑制剂)。随后,用细胞筛(如100μm或更小孔径)过滤细胞悬液,以去除未消化的组织块和大的细胞团。
离心与洗涤:将过滤后的细胞悬液在较低速度下(如500g)离心5-10分钟,弃去上清液。用新鲜的培养基或缓冲液重悬细胞沉淀,重复洗涤1-2次,以彻底去除残留的酶和细胞碎片。
细胞计数与接种:使用血细胞计数板对分离出的细胞进行计数和活性检测(如台盼蓝染色),然后根据实验需求调整细胞密度,接种到培养皿中进行培养。
细胞分离步骤通用注意事项:
无论采用哪种方法,以下几点对于保证细胞活性和实验成功至关重要:
无菌操作:所有步骤都应在超净台中进行,使用的试剂和器材必须无菌,以防细胞污染。
低温环境:在分离过程中,尽量在冰上或4℃环境下操作,以降低细胞代谢,减少损伤。
等渗溶液:使用的所有缓冲液和培养基都必须是等渗的,并含有必要的缓冲体系,以维持细胞正常的渗透压和pH值。
动作轻柔:在吹打、离心和重悬细胞时,动作要轻柔,避免对细胞造成机械损伤。
公司正在出售的产品:
| 组织半胱-2(CASPASE-2)活性荧光定量检测试剂盒 |
人纤维蛋白原单克隆抗体 |
| 组织CDK6/CYC D3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
活化的Notch1蛋白抗体 |
| 血液游离氨基酸含量比色法定量检测试剂盒 |
富含脯氨酸蛋白12抗体 |
| 组织HHV6-A(HUMAN HERPESVIRUS 6-A)病毒定性检测试剂盒 |
Pacific Blue标记小鼠Ly-6C单克隆抗体 |
| 组蛋白赖特异性脱甲基酶1( LYSINE SPECIFIC DEMETHYLASE-1;LSD-1)活性荧光定量检测试剂盒 |
肿瘤蛋白D53抗体 |
| 冰冻切片组织CASPASE-5蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
丝裂原活化蛋白激酶激酶5抗体 |
| 石蜡切片组织VEGF蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
DNA修复甲基磺酸敏感性基因19抗体 |
| 动物硬组织可溶性膜蛋白(粗提)制备试剂盒 |
磷酸甲羟戊酸激酶抗体 |
| 细菌内生孢子(ENDOSPORE)染色试剂盒 |
促肾上腺皮质激素受体 |
| 组织YES激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
血管性血友病因子结构域蛋白VW5B1抗体 |
| 细胞内氧化应激活性氧(ROS)红色荧光测定试剂盒(超氧阴离子) |
4-羟化酶α1抗体 |
| 随机引物DNA探针同位素标记产物完全双链制备试剂盒 |
跨膜蛋白176A抗体 |
| 人结肠黏膜上皮细胞 |
人外周血单个核细胞Human Glioma Tissue-Derived Cells |
| 人附睾成纤维细胞 |
Human primary liver cancer associated fibroblasts;CAFs |