功能学验证 这是验证人气管上皮细胞是否“名副其实”的关键步骤,通过检测细胞是否具备其应有的生理功能来确认其身份。
人气管上皮细胞特异性功能检测:例如,检测肝细胞的糖原合成能力、胰岛细胞分泌胰岛素的能力或神经元的电生理活动。
细胞行为分析:通过细胞迁移、侵袭等实验来评估其功能特性。
特殊染色:使用特定的染色方法来显示细胞内的特殊物质。例如,用油红O染色来鉴定脂肪人气管上皮细胞的脂滴,或用PAS染色来显示糖原。
产品信息:

英文名称 Human Tracheal Epithelial Cells
产品名称 人气管上皮细胞
组织来源 气管
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
货号:YS-01X7035
细胞简介 :

人气管上皮细胞分离自气管组织;气管(Trachea),呼吸器官的一部分;为后壁略平的圆筒型管状。上端平第六颈椎下缘,与环状软骨相连;向下至第四、五胸椎体(相当胸骨角平面)交界处,分左、右主支气管,分叉处称为气管杈。气管主要由14-16个半环状软骨构成,有弹性,软骨为“C”字形的软骨环,缺口向后,各软骨环以韧带连接起来,环后方缺口处由平滑肌和致密结缔组织连接,保持了持续张开状态。管腔衬以粘膜,表面覆盖纤毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空气中的灰尘颗粒,纤毛不断向咽部摆动将粘液与灰尘排出,以净化吸入的气体。气管上皮是气道与外界环境接触的第一道防线,不仅是各种病原体、炎症介质作用的靶细胞,还作为效应细胞合成、释放多种炎性介质和细胞因子从而参与气道炎症及免疫反应。体外培养的原代气管上皮细胞因与体内组织在形态结构和功能活动上存在很大的相似性,因此,在基础及临床研究中极为重要。
方法简介 公司实验室分离的人气管上皮细胞采用链霉蛋白酶-中性蛋白酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人气管上皮细胞经PCK免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
人气管上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞分离步骤:
从实体组织中分离细胞
这个过程的核心目标是将紧密连接的组织解离成单个细胞,形成单细胞悬液。通常包括以下几个步骤:
组织获取与清洗:在无菌条件下获取目标组织,并使用预冷的、不含钙镁离子的平衡盐溶液(如Hanks液或PBS)反复冲洗,以去除血液、坏死组织和杂质。
组织剪碎:使用无菌的解剖刀或剪刀将组织块剪切成约1-3 mm³的小块,以增大后续处理的表面积。
细胞解离:这是最关键的一步,主要有两种方法,也常结合使用。
机械法:通过物理手段分散细胞。例如,用吸管反复吹打、通过不同孔径的细胞筛(如100-200目)过滤、或使用磁力搅拌器进行温和搅拌。
酶消化法:使用特定的酶来分解细胞间的连接蛋白和细胞外基质。常用的酶包括:
胰蛋白酶 (Trypsin):适用于消化细胞间质较少的软组织,如肝、肾、胚胎组织等。通常在37℃下孵育20-30分钟。
胶原酶 (Collagenase):对胶原纤维有很强的消化作用,特别适用于消化富含结缔组织的硬质组织,如肿瘤、乳腺、皮肤等。
Dispase:一种中性蛋白酶,作用相对温和,对细胞损伤较小。
终止消化与过滤:加入含有血清的完全培养基来终止酶的活性(血清中含有酶抑制剂)。随后,用细胞筛(如100μm或更小孔径)过滤细胞悬液,以去除未消化的组织块和大的细胞团。
离心与洗涤:将过滤后的细胞悬液在较低速度下(如500g)离心5-10分钟,弃去上清液。用新鲜的培养基或缓冲液重悬细胞沉淀,重复洗涤1-2次,以彻底去除残留的酶和细胞碎片。
细胞计数与接种:使用血细胞计数板对分离出的细胞进行计数和活性检测(如台盼蓝染色),然后根据实验需求调整细胞密度,接种到培养皿中进行培养。
细胞分离步骤通用注意事项:
无论采用哪种方法,以下几点对于保证细胞活性和实验成功至关重要:
无菌操作:所有步骤都应在超净台中进行,使用的试剂和器材必须无菌,以防细胞污染。
低温环境:在分离过程中,尽量在冰上或4℃环境下操作,以降低细胞代谢,减少损伤。
等渗溶液:使用的所有缓冲液和培养基都必须是等渗的,并含有必要的缓冲体系,以维持细胞正常的渗透压和pH值。
动作轻柔:在吹打、离心和重悬细胞时,动作要轻柔,避免对细胞造成机械损伤。
公司正在出售的产品:
| 细胞苏木素伊红染色试剂盒 |
SARS病毒核衣壳蛋白单克隆抗体 |
| 体液硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒 |
间隙连接蛋白31抗体 |
| 体外非细胞系统细胞色素P450亚酶CYP2B2(PROD)活性 |
骨骼肌蛋白FHL1抗体 |
| 组织辅脂酶(COLIPASE)活性比色法定量检测试剂盒 |
Rap鸟嘌呤核苷酸交换因子2抗体 |
| 组织尿素比色法定量检测试剂盒 |
自噬相关蛋白4C抗体 |
| FIS-1蛋白表达检测试剂盒 |
唾液酸结合性免疫球蛋白样凝集素11抗体 |
| 石蜡切片组织MAPK蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
FCHSD2蛋白抗体 |
| 组织N-链接硫酸酯化糖胺多糖(N-sGAG)含量二甲基亚甲基蓝(DMMB)比色法定量检测试剂盒 |
内皮细胞分化鞘脂G蛋白偶联受体1抗体 |
| 小量腺病毒溶斑纯化试剂盒 |
对接蛋白4抗体 |
| 细胞基质金属抑制剂1(TIMP-1)活性荧光定量检测试剂盒 |
原癌蛋白CBL2抗体 |
| 蓝色荧光染色体核型分析试剂盒 |
APC标记小鼠H-2Db单克隆抗体 |
| 动物牙齿DNA萃取试剂盒 |
磷酸化白细胞介素1受体衔接蛋白抗体 |
| 人肺小动脉平滑肌细胞 |
人气管上皮细胞Human Pulmonary Great Artery Smooth Muscle Cells |
| 人颈动脉平滑肌细胞 |
Human primary ovarian stromal cells |