功能学验证 这是验证人脐带血来源内皮祖细胞是否“名副其实”的关键步骤,通过检测细胞是否具备其应有的生理功能来确认其身份。
人脐带血来源内皮祖细胞特异性功能检测:例如,检测肝细胞的糖原合成能力、胰岛细胞分泌胰岛素的能力或神经元的电生理活动。
细胞行为分析:通过细胞迁移、侵袭等实验来评估其功能特性。
特殊染色:使用特定的染色方法来显示细胞内的特殊物质。例如,用油红O染色来鉴定脂肪人脐带血来源内皮祖细胞的脂滴,或用PAS染色来显示糖原。
产品信息:

英文名称 Human Umbilical Cord Blood-Derived Endothelial Progenitor Cells
产品名称 人脐带血来源内皮祖细胞
组织来源 脐带血
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
货号:YS-01X7548
细胞简介 :

人脐带血来源内皮祖细胞分离自脐带血;脐带血是胎儿娩出、脐带结扎并离断后残留在胎盘和脐带中的血液。近十几年的研究发现,脐带血中含有可以重建造血和免疫系统的造血干细胞,可用于造血干细胞移植;因此,脐带血已成为造血干细胞的重要来源。脐带血中含有大量的干细胞,干细胞是生命的种子,它会分化成机体的各种细胞,结出各种不同的果实——血液细胞、神经细胞、骨骼细胞等。干细胞是具有自我更新、高度增殖和多项分化潜能的细胞群体;这些细胞可以通过分裂维持自身细胞的特性和数量,又可进一步分化为各种组织细胞,从而在组织修复等方面发挥积极作用。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞,亦称为成血管细胞(Angioblast),是一群具有游走特性,能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞,缺乏成熟内皮细胞的特征性表型,不能形成管腔样结构,其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示,内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用,并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路,EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这一领域新的热点。
方法简介 公司实验室分离的人脐带血来源内皮祖细胞采用密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人脐带血来源内皮祖细胞经CD34免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传1-2代;不建议多次传代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
人脐带血来源内皮祖细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞分离步骤:
从液体样本中分离细胞
对于血液、骨髓、腹水等本身就是细胞悬液的样本,分离过程主要基于细胞的物理特性(如密度、大小)或生物学特性(如表面标志物)进行纯化。
1. 密度梯度离心法
这是从外周血中分离外周血单个核细胞,主要包括淋巴细胞和单核细胞)最常用的方法。
原理:利用不同细胞的密度差异。通过离心,使细胞在特定密度的分离液(如Ficoll-Hypaque,密度为1.077 g/ml)中分层。
简要步骤:
将抗凝血用PBS等倍稀释。
小心地将稀释后的血液叠加在密度梯度分离液的上层,保持清晰的界面。
在室温下进行水平离心(如2000 rpm,20分钟,升降速要慢)。
离心后,试管中会形成清晰的层次:最上层是血浆和血小板,中间灰白色的薄层是PBMCs,下层是分离液和红细胞/粒细胞。
小心吸取中间的PBMC层,用缓冲液洗涤离心2次,即可获得较纯的单个核细胞。
2. 基于细胞特性的分离方法
当需要更高纯度的特定细胞亚群时,会采用以下技术:
贴壁筛选法:利用某些细胞(如单核细胞、成纤维细胞)能够贴附在培养皿表面生长,而其他细胞(如淋巴细胞)不能贴壁的特性,通过简单的换液操作即可分离。
流式细胞分选术 (FACS):一种高精度、高通量的细胞分选技术。它利用荧光标记的特异性抗体识别细胞表面的特定分子,通过仪器将单个细胞液滴带上不同电荷,在电场中偏转,从而将目标细胞从混合群体中精确地分选出来,纯度可达95%以上。
免疫磁珠法 (MACS):一种操作简便、快速且能获得高纯度细胞的方法。将特异性抗体包被在磁性微球上,与细胞悬液孵育后,抗体与目标细胞结合。然后将混合液通过置于磁场中的分离柱,结合了磁珠的细胞被吸附在柱内,未结合的细胞则流出。移出磁场后,即可洗脱得到高纯度的目标细胞,纯度可达95%-99%。
主要应用领域:
得益于其独特的生物学特性,原代细胞被广泛应用于:
药物筛选与毒性测试: 能够更准确地预测药物在人体内的疗效和毒副作用,尤其是在药物代谢和毒理学研究中。
疾病机制研究: 利用患者来源的原代细胞构建疾病模型,可以更真实地研究癌症、遗传病等疾病的发病机理。
再生医学与组织工程: 作为种子细胞,用于开发细胞疗法、修复或替换受损的组织和器官。
基础细胞生物学研究: 用于研究细胞的正常生理功能,如信号传导、代谢、衰老等。
病毒学与疫苗生产: 用于病毒的分离、培养以及疫苗的生产。
公司正在出售的产品:
| 细胞脂肪酸费斯克勒(Fischler)染色试剂盒 |
AF750标记的CD20抗体 |
| 组织腺苷酸环化酶(Adenylate Cyclase)活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒 |
甲基化样蛋白22抗体 |
| 麦子纤维素酶解法定量检测试剂盒 |
高迁移率家族蛋白3抗体 |
| 细胞胶原蛋白(collagen)比色法定量检测试剂盒 |
PE标记小鼠H-2Dk单克隆抗体 |
| 细胞总脂肪酶(lipase)活性比色法定量检测试剂盒 |
转录因子HES3抗体 |
| 石蜡切片组织PAR-1蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
同源盒基因HOXA4蛋白抗体 |
| 石蜡切片组织INSULIN 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
FAM194A蛋白抗体 |
| 药品糖精(saccharin)含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
钼辅因子合成蛋白2抗体 |
| 酵母细胞冻存试剂盒 |
低密度脂蛋白相关蛋白2结合蛋白抗体 |
| 细胞PTEN活性定磷比色法定量检测试剂盒 |
乙酰化组蛋白H3抗体 |
| 细胞过氧化酶体分离试剂盒 |
Allgrove综合征相关蛋白抗体 |
| AMCA蛋白标记试剂盒 |
磷酸化CREB转录共激活因子TORC2抗体 |
| 人肺大动脉平滑肌细胞 |
人脐带血来源内皮祖细胞Human Osteoblast Cells |
| 人脉络膜成纤维细胞 |
Primary human cerebral vascular pericytes cells |