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大鼠视网膜微血管内皮细胞
英文名称:Rat Retinal Microvascular Endothelial Cells总访问:7
国产/进口:国产半年访问:7
产地/品牌:上研生产品类别:细胞生物学试剂
规       格:5×10^5Cells/T25 最后更新:2026-4-9
货       号:YS-01X7369
CAS   号:
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销售商: 上海研生实业有限公司 查看该公司所有产品 >>
  • 产品介绍
  • 公司简介
细胞简介:
大鼠视网膜微血管内皮细胞分离自视网膜组织;视网膜居于眼球壁的内层,是一层透明的薄膜。视网膜由色素上皮层和视网膜感觉层组成,两层间在病理情况下可分开,称为视网膜脱离。色素上皮层与脉络膜紧密相连,由色素上皮细胞组成,它们具有支持和营养光感受器细胞、遮光、散热以及再生和修复等作用。组织学上视网膜分为10层,由外向内分别为:色素上皮层、视锥、视杆细胞层、外界膜、外颗粒层、外丛状层、内颗粒层、内丛状层、神经节细胞层、神经纤维层、内界膜。视网膜内层为衬于血管膜内面的一层薄膜,有感光作用;后部鼻侧有一视神经乳头。视网膜上的感觉层是由三个神经元组成。第一神经元是视细胞层,专司感光,它包括锥细胞和杆细胞。视杆细胞主要在离中心凹较远的视网膜上,而视锥细胞则在中心凹处最多。第二层叫双节细胞,约有10到数百个视细胞通过双节细胞与一个神经节细胞相联系,负责联络作用。第三层叫节细胞层,专管传导。视网膜是一层菲薄的但又非常复杂的结构,它贴于眼球的后壁部,传递来自视网膜感受器冲动的神经纤维跨越视网膜表面,经由视神经到达出口。视网膜的分辨力是不均匀的,在黄斑区,其分辨能力最强。它是组成血管腔面单层扁平上皮样细胞,它所产生和分泌的生物活性物质对维持血管张力、调节血压、抗血栓形成等有重要作用,在视网膜血管疾病的发病机制中有重要病理生理学意义。由于从不同的组织和器官获得的内皮细胞具有不同的特性,在脑和视网膜中,这些内皮细胞具有内屏障的功能,在调节血管生理状态,释放血管活性物质以及新生血管的形成中发挥着重要作用,体外分离培养RCEC对研究视网膜血管性疾病发生发展的病理生理机制以及疾病的早期防治具有重要临床意义。
方法简介 公司实验室分离的大鼠视网膜微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠视网膜微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性: 
产品名称 大鼠视网膜微血管内皮细胞 货号 YS-01X7369
英文名称 Rat Retinal Microvascular Endothelial Cells 组织来源 视网膜组织
规格 5×10⁵Cells/T25培养瓶 种属 大鼠
产品信息
产品名称 大鼠视网膜微血管内皮细胞
组织来源 视网膜组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息:
包被条件 PLL(0.1mg/ml),明胶(0.1%)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠视网膜微血管内皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养过程:
第一阶段:准备与取材
这是整个实验的基础,直接决定了细胞的初始活性和后续培养的成功率。
器材与试剂准备
器材: 确保超净工作台、培养箱、离心机、倒置显微镜等设备运行正常。所有培养瓶、培养皿、移液管、手术器械等必须经过严格的高压灭菌处理。
试剂: 根据细胞类型配制好合适的培养基(如DMEM、RPMI-1640等),并添加胎牛血清(FBS)、抗生素(如青霉素-链霉素)等必需成分。准备好无菌的PBS或Hanks'平衡盐溶液用于洗涤。
组织获取
在无菌条件下,从实验动物或临床手术样本中快速、轻柔地获取目标组织。
取材过程应尽量减少对组织的机械损伤和缺血时间,以保持细胞的高活力。
获取的组织应立即放入预冷(4℃)的、含有高浓度抗生素的PBS或专用运输液中,以抑制污染并维持细胞活性。
第二阶段:分离与纯化
此阶段的目的是从组织中获取高纯度、高活性的单细胞悬液。
组织处理
在超净台内,用含双抗的PBS或Hanks'液反复洗涤组织,彻底去除血液、脂肪和结缔组织等杂质。
用无菌手术剪或刀片将组织剪切成1-3 mm³的小块,以增加酶消化的接触面积。
细胞分离
主要有两种方法,可根据组织类型选择:
酶消化法: 这是最常用的方法。向组织块中加入适量的消化酶(如胰蛋白酶、胶原酶等),在37℃条件下孵育并间歇性振荡或吹打。显微镜下观察,当大部分组织块变得松散、细胞开始游离时,立即加入含血清的培养基终止消化。
组织块贴壁法: 将组织小块直接贴附于培养瓶底,加入少量培养液(不没过组织块),静置数小时让细胞从组织块边缘迁移出来,然后翻转培养瓶,让培养液浸没组织块继续培养。
第三阶段:接种与培养
将分离好的细胞置于模拟体内环境的条件下进行培养。
细胞接种
将调整好浓度的细胞悬液接种到合适的培养容器(如培养瓶、培养板)中。
对于某些难贴壁的细胞,可预先用多聚赖氨酸、胶原等细胞外基质蛋白包被培养表面。
培养条件
将培养容器放入37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱中静置培养。
接种后24小时内,应在倒置显微镜下观察细胞的贴壁情况、形态和有无污染。
第四阶段:观察与传代
监测细胞状态并在适当时机进行扩增。
日常观察
每天通过倒置显微镜观察细胞的形态、密度和生长状态。健康的原代细胞形态规则,折光性好,立体感强。
细胞传代
当细胞增殖至覆盖培养表面80%-90%(汇合度)时,即可进行传代。
弃去旧培养基,用PBS洗涤后,加入适量胰蛋白酶在37℃下消化,待细胞变圆、间隙增大时,加入含血清的培养基终止消化。
吹打成单细胞悬液,离心后按1:2或1:3的比例分装到新的培养瓶中继续培养。
原代细胞与细胞系的比较;
比较维度  原代细胞  细胞系
来源  直接从活体组织分离  由原代细胞或肿瘤组织经长期传代或转化形成
生物学真实性  高,最接近体内状态  较低,长期培养可能导致特性丢失或改变
遗传背景  稳定,通常为二倍体  不稳定,常发生基因突变和染色体异常
细胞群体  异质性,可能包含多种细胞  均质性,来源于单个克隆,背景单一
增殖能力  有限,会衰老死亡  无限,可长期传代
主要应用  药物筛选、毒理研究、个性化医疗  高通量筛选、机制研究、大规模生产
公司正在出售的产品:
染色试剂盒 PE标记人CD10单克隆抗体
血滤纸片样品半乳糖总含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 间隙连接蛋白26/GJB2抗体
体外非细胞系统细胞色素P450亚酶CYP2E1(NPH)活性 骨/软骨蛋白多糖1抗体
组织肝脂酶活性比色法定量检测试剂盒 RAP1GAP酶激活蛋白抗体
细胞糖原酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 自噬相关蛋白16A抗体
肌动蛋白聚合作用(polymerization)检测试剂盒 脱支酶同源蛋白DBR1抗体
TUBULIN蛋白表达西方杂交分析试剂盒 FBXW8蛋白抗体
食物(folic acid)含量比色法定量检测试剂盒 内皮素转化酶2抗体
通用腺病毒骨架载体(pAdEasy-1) 短链脱氢酶/还原酶家族4样2蛋白抗体
细胞基质金属抑制剂2(TIMP-2)活性荧光定量检测试剂盒 诱捕受体3抗体
真菌/酵母细胞线粒体内膜功能/膜电位红色荧光(TMRM)测定试剂盒 APC标记小鼠CD62L单克隆抗体
乙肝病毒DNA纯化试剂盒 磷酸化白介素-1受体相关激酶1抗体
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