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细胞简介：
大鼠胚胎干细胞分离自囊胚胚胎组织；胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESCs，简称ES、EK或ESC细胞）是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。进一步说，胚胎干细胞（ES细胞）是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。ES细胞具有与早期胚胎细胞相似的形态结构，细胞核大，有一个或几个核仁，胞核中多为常染色质，胞质胞浆少，结构简单。体外培养时，细胞排列紧密，呈集落状生长。用碱性磷酸酶染色，ES细胞呈棕红色，而周围的成纤维细胞呈淡黄色。细胞克隆和周围存在明显界限，形成的克隆细胞彼此界限不清，细胞表面有折光较强的脂状小滴。细胞克隆形态多样，多数呈岛状或巢状。小鼠ES细胞的直径7 微米～18 微米，猪、牛、羊ES细胞的颜色较深，直径12 微米～18 微米。胚胎干细胞与普通细胞有显著差别，有其特定的生长特性和特定的标志，例如碱性磷酸酶活性非常高，带有胚胎阶段特异性表面抗原（ Stage- specific embryonic antigens,SSEA），人类胚胎干细胞还带有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等标志，这些特性和标志均可以用于对胚胎干细胞进行鉴定，除此之外，胚胎干细胞还可以在体外永久传代，并保持正常核型。在体外培养体系中加入分化抑制剂如白血病抑制因子（ Leukaemia inhibitory factor,LF）或者在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层（MEF）上培养时，胚胎干细胞都能呈克隆性增殖，长期保持核型正常和稳定，冻存解冻也不影响不分化的特性。另外，胚胎干细胞还表现岀高水平端粒酶活性，目前证明端粒酶与细胞衰老密切相关，多数成熟细胞的端粒酶活性都很低。这些都是胚胎干细胞与成熟细胞不同的重要特点，也可能是其复制生命期限远比体细胞长的原因。
方法简介 公司实验室分离的大鼠胚胎干细胞采用分离囊胚组织，去除胚胎透明带、使用特制专用培养基筛选培养，胰酶消化传代纯化制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠胚胎干细胞经Oct-4免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性：
产品信息
产品名称 大鼠胚胎干细胞
组织来源 囊胚
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息：
包被条件 明胶（0.1%）
培养基 含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次；
生长特性 贴壁
细胞形态 短梭形、多角形
传代特性 可传5-8代左右
消化液 0.025%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠胚胎干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养过程：
原代细胞与细胞系的比较;
大鼠胚胎干细胞分离自囊胚胚胎组织；胚胎干细胞（Embryonic stem cell，ESCs，简称ES、EK或ESC细胞）是早期胚胎（原肠胚期之前）或原始性腺中分离出来的一类细胞，它具有体外培养无限增殖、自我更新和多向分化的特性。无论在体外还是体内环境，ES细胞都能被诱导分化为机体几乎所有的细胞类型。进一步说，胚胎干细胞（ES细胞）是一种高度未分化细胞。它具有发育的全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官，包括生殖细胞。ES细胞具有与早期胚胎细胞相似的形态结构，细胞核大，有一个或几个核仁，胞核中多为常染色质，胞质胞浆少，结构简单。体外培养时，细胞排列紧密，呈集落状生长。用碱性磷酸酶染色，ES细胞呈棕红色，而周围的成纤维细胞呈淡黄色。细胞克隆和周围存在明显界限，形成的克隆细胞彼此界限不清，细胞表面有折光较强的脂状小滴。细胞克隆形态多样，多数呈岛状或巢状。小鼠ES细胞的直径7 微米～18 微米，猪、牛、羊ES细胞的颜色较深，直径12 微米～18 微米。胚胎干细胞与普通细胞有显著差别，有其特定的生长特性和特定的标志，例如碱性磷酸酶活性非常高，带有胚胎阶段特异性表面抗原（ Stage- specific embryonic antigens,SSEA），人类胚胎干细胞还带有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等标志，这些特性和标志均可以用于对胚胎干细胞进行鉴定，除此之外，胚胎干细胞还可以在体外永久传代，并保持正常核型。在体外培养体系中加入分化抑制剂如白血病抑制因子（ Leukaemia inhibitory factor,LF）或者在小鼠胚胎成纤维细胞饲养层（MEF）上培养时，胚胎干细胞都能呈克隆性增殖，长期保持核型正常和稳定，冻存解冻也不影响不分化的特性。另外，胚胎干细胞还表现岀高水平端粒酶活性，目前证明端粒酶与细胞衰老密切相关，多数成熟细胞的端粒酶活性都很低。这些都是胚胎干细胞与成熟细胞不同的重要特点，也可能是其复制生命期限远比体细胞长的原因。
方法简介 公司实验室分离的大鼠胚胎干细胞采用分离囊胚组织，去除胚胎透明带、使用特制专用培养基筛选培养，胰酶消化传代纯化制备而来，细胞总量约为5×105cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠胚胎干细胞经Oct-4免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性：
| 产品名称 | 大鼠胚胎干细胞 | 货号 | YS-01X7741 |
| 英文名称 | Rat Embryonic Stem Cells | 组织来源 | 囊胚 |
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 种属 | 大鼠 |
产品名称 大鼠胚胎干细胞
组织来源 囊胚
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息：
包被条件 明胶（0.1%）
培养基 含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次；
生长特性 贴壁
细胞形态 短梭形、多角形
传代特性 可传5-8代左右
消化液 0.025%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠胚胎干细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养过程：
第一阶段：准备与取材
这是整个实验的基础，直接决定了细胞的初始活性和后续培养的成功率。
器材与试剂准备
器材： 确保超净工作台、培养箱、离心机、倒置显微镜等设备运行正常。所有培养瓶、培养皿、移液管、手术器械等必须经过严格的高压灭菌处理。
试剂： 根据细胞类型配制好合适的培养基（如DMEM、RPMI-1640等），并添加胎牛血清（FBS）、抗生素（如青霉素-链霉素）等必需成分。准备好无菌的PBS或Hanks'平衡盐溶液用于洗涤。
组织获取
在无菌条件下，从实验动物或临床手术样本中快速、轻柔地获取目标组织。
取材过程应尽量减少对组织的机械损伤和缺血时间，以保持细胞的高活力。
获取的组织应立即放入预冷（4℃）的、含有高浓度抗生素的PBS或专用运输液中，以抑制污染并维持细胞活性。
第二阶段：分离与纯化
此阶段的目的是从组织中获取高纯度、高活性的单细胞悬液。
组织处理
在超净台内，用含双抗的PBS或Hanks'液反复洗涤组织，彻底去除血液、脂肪和结缔组织等杂质。
用无菌手术剪或刀片将组织剪切成1-3 mm³的小块，以增加酶消化的接触面积。
细胞分离
主要有两种方法，可根据组织类型选择：
酶消化法： 这是最常用的方法。向组织块中加入适量的消化酶（如胰蛋白酶、胶原酶等），在37℃条件下孵育并间歇性振荡或吹打。显微镜下观察，当大部分组织块变得松散、细胞开始游离时，立即加入含血清的培养基终止消化。
组织块贴壁法： 将组织小块直接贴附于培养瓶底，加入少量培养液（不没过组织块），静置数小时让细胞从组织块边缘迁移出来，然后翻转培养瓶，让培养液浸没组织块继续培养。
第三阶段：接种与培养
将分离好的细胞置于模拟体内环境的条件下进行培养。
细胞接种
将调整好浓度的细胞悬液接种到合适的培养容器（如培养瓶、培养板）中。
对于某些难贴壁的细胞，可预先用多聚赖氨酸、胶原等细胞外基质蛋白包被培养表面。
培养条件
将培养容器放入37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱中静置培养。
接种后24小时内，应在倒置显微镜下观察细胞的贴壁情况、形态和有无污染。
第四阶段：观察与传代
监测细胞状态并在适当时机进行扩增。
日常观察
每天通过倒置显微镜观察细胞的形态、密度和生长状态。健康的原代细胞形态规则，折光性好，立体感强。
细胞传代
当细胞增殖至覆盖培养表面80%-90%（汇合度）时，即可进行传代。
弃去旧培养基，用PBS洗涤后，加入适量胰蛋白酶在37℃下消化，待细胞变圆、间隙增大时，加入含血清的培养基终止消化。
吹打成单细胞悬液，离心后按1:2或1:3的比例分装到新的培养瓶中继续培养。
比较维度 原代细胞 细胞系
来源 直接从活体组织分离 由原代细胞或肿瘤组织经长期传代或转化形成
生物学真实性 高，最接近体内状态 较低，长期培养可能导致特性丢失或改变
遗传背景 稳定，通常为二倍体 不稳定，常发生基因突变和染色体异常
细胞群体 异质性，可能包含多种细胞 均质性，来源于单个克隆，背景单一
增殖能力 有限，会衰老死亡 无限，可长期传代
主要应用 药物筛选、毒理研究、个性化医疗 高通量筛选、机制研究、大规模生产
公司正在出售的产品：
| 细胞半胱-12（CASPASE-12）活性比色法定量检测试剂盒 | 去甲基化酶MBD2单克隆抗体 |
| 细胞AMPK激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 环指蛋白98抗体 |
| 通用型脯（proline）含量比色法定量检测试剂盒 | 富含亮氨酸重复蛋白6抗体 |
| 通用型科萨基病毒A（Coxsackievirus A）定量PCR扩增检测试剂盒 | Pacific Blue标记人CD11b单克隆抗体 |
| 人体P14基因甲基化检测试剂盒 | 肿瘤/睾丸抗原11.2抗体 |
| 石蜡切片组织TRAIL 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | 丝氨酸肽酶4抗体 |
| P38蛋白表达西方杂交分析试剂盒 | DNA聚合酶η抗体 |
| （包括标记探针） | 磷酸化自噬相关蛋白4D抗体 |
| 酵母细胞溶解试剂盒 | 促代谢型谷氨酸受体2+4抗体 |
| 组织钙调蛋白（CaM）活性酶连续循环比色法定量检测试剂盒 | 血管紧张素II受体样蛋白1抗体 |
| 细胞培养悬液氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒 | 3-磷酸甘油醛脱氢酶 |
| SiRNA完整表达文库构建技术试剂盒 | 口蹄疫病毒A型抗体 |
| 大鼠卵巢颗粒细胞 | 大鼠胚胎干细胞Rat Oral Mucosal Fibroblasts |
| 小鼠结膜成纤维细胞 | Mouse primary carotid smooth muscle cells |
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