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细胞简介：
人骨髓来源内皮祖细胞分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞，亦称为成血管细胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞，缺乏成熟内皮细胞的特征性表型，不能形成管腔样结构，其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示，内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用，并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路，EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这一领域新的热点。
方法简介 公司实验室分离的人骨髓来源内皮祖细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人骨髓来源内皮祖细胞经CD34免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性：
产品信息
产品名称 人骨髓来源内皮祖细胞
组织来源 骨髓
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传1-2代；不建议多次传代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
人骨髓来源内皮祖细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养过程：
原代细胞与细胞系的比较;
人骨髓来源内皮祖细胞分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞，亦称为成血管细胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞，缺乏成熟内皮细胞的特征性表型，不能形成管腔样结构，其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示，内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用，并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路，EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这一领域新的热点。
方法简介 公司实验室分离的人骨髓来源内皮祖细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人骨髓来源内皮祖细胞经CD34免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性：
| 产品名称 | 人骨髓来源内皮祖细胞 | 货号 | YS-01X7496 |
| 英文名称 | Human Bone Marrow-Derived Endothelial Progenitor Cells | 组织来源 | 骨髓 |
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 种属 | 人 |
产品名称 人骨髓来源内皮祖细胞
组织来源 骨髓
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传1-2代；不建议多次传代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
人骨髓来源内皮祖细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养过程：
第一阶段：准备与取材
这是整个实验的基础，直接决定了细胞的初始活性和后续培养的成功率。
器材与试剂准备
器材： 确保超净工作台、培养箱、离心机、倒置显微镜等设备运行正常。所有培养瓶、培养皿、移液管、手术器械等必须经过严格的高压灭菌处理。
试剂： 根据细胞类型配制好合适的培养基（如DMEM、RPMI-1640等），并添加胎牛血清（FBS）、抗生素（如青霉素-链霉素）等必需成分。准备好无菌的PBS或Hanks'平衡盐溶液用于洗涤。
组织获取
在无菌条件下，从实验动物或临床手术样本中快速、轻柔地获取目标组织。
取材过程应尽量减少对组织的机械损伤和缺血时间，以保持细胞的高活力。
获取的组织应立即放入预冷（4℃）的、含有高浓度抗生素的PBS或专用运输液中，以抑制污染并维持细胞活性。
第二阶段：分离与纯化
此阶段的目的是从组织中获取高纯度、高活性的单细胞悬液。
组织处理
在超净台内，用含双抗的PBS或Hanks'液反复洗涤组织，彻底去除血液、脂肪和结缔组织等杂质。
用无菌手术剪或刀片将组织剪切成1-3 mm³的小块，以增加酶消化的接触面积。
细胞分离
主要有两种方法，可根据组织类型选择：
酶消化法： 这是最常用的方法。向组织块中加入适量的消化酶（如胰蛋白酶、胶原酶等），在37℃条件下孵育并间歇性振荡或吹打。显微镜下观察，当大部分组织块变得松散、细胞开始游离时，立即加入含血清的培养基终止消化。
组织块贴壁法： 将组织小块直接贴附于培养瓶底，加入少量培养液（不没过组织块），静置数小时让细胞从组织块边缘迁移出来，然后翻转培养瓶，让培养液浸没组织块继续培养。
第三阶段：接种与培养
将分离好的细胞置于模拟体内环境的条件下进行培养。
细胞接种
将调整好浓度的细胞悬液接种到合适的培养容器（如培养瓶、培养板）中。
对于某些难贴壁的细胞，可预先用多聚赖氨酸、胶原等细胞外基质蛋白包被培养表面。
培养条件
将培养容器放入37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱中静置培养。
接种后24小时内，应在倒置显微镜下观察细胞的贴壁情况、形态和有无污染。
第四阶段：观察与传代
监测细胞状态并在适当时机进行扩增。
日常观察
每天通过倒置显微镜观察细胞的形态、密度和生长状态。健康的原代细胞形态规则，折光性好，立体感强。
细胞传代
当细胞增殖至覆盖培养表面80%-90%（汇合度）时，即可进行传代。
弃去旧培养基，用PBS洗涤后，加入适量胰蛋白酶在37℃下消化，待细胞变圆、间隙增大时，加入含血清的培养基终止消化。
吹打成单细胞悬液，离心后按1:2或1:3的比例分装到新的培养瓶中继续培养。
比较维度 原代细胞 细胞系
来源 直接从活体组织分离 由原代细胞或肿瘤组织经长期传代或转化形成
生物学真实性 高，最接近体内状态 较低，长期培养可能导致特性丢失或改变
遗传背景 稳定，通常为二倍体 不稳定，常发生基因突变和染色体异常
细胞群体 异质性，可能包含多种细胞 均质性，来源于单个克隆，背景单一
增殖能力 有限，会衰老死亡 无限，可长期传代
主要应用 药物筛选、毒理研究、个性化医疗 高通量筛选、机制研究、大规模生产
公司正在出售的产品：
| 体液多胺氧化酶（PAO）活性比色法定量检测试剂盒 | 上皮细胞癌转化蛋白2单克隆抗体 |
| 细胞GSK3激酶总活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 肌醇六磷酸激酶1抗体 |
| 通用型高效液相色谱法定量检测试剂盒 | 富含组氨酸蛋白1抗体 |
| 通用型WNV（WEST NILE）病毒定性检测试剂盒 | PDZ结构域PDZK1蛋白抗体 |
| 人体MMP9 RFLP基因分析试剂盒 | 肿瘤坏死因子配体超家族成员10C |
| 石蜡切片组织DAP KINASE蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 | 死亡受体4抗体 |
| 石蜡切片组织BAX蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | DPS1蛋白抗体 |
| 线粒体可溶性总蛋白制备试剂盒 | 磷脂酶A2受体1抗体 |
| 酵母菌SD-GAL/RAF培养基 | 脆性X综合征相关蛋白AFF1抗体 |
| 细胞RSE激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 血清淀粉样蛋白4抗体 |
| 活体组织氧化应激活性氧（ROS）初级绿色荧光测定试剂盒 | 5号染色体开放阅读框4抗体 |
| 半胱-1（CASPASE-1） | 跨膜蛋白74抗体 |
| 大鼠子宫内膜干细胞 | 人骨髓来源内皮祖细胞Rat Aortic Smooth Muscle Cells |
| 人尾椎肿瘤细胞 | Primary human intestinal mucosal epithelial cells；HSIEpC |
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