功能学验证 这是验证人骨髓单核细胞是否“名副其实”的关键步骤,通过检测细胞是否具备其应有的生理功能来确认其身份。
人骨髓单核细胞特异性功能检测:例如,检测肝细胞的糖原合成能力、胰岛细胞分泌胰岛素的能力或神经元的电生理活动。
细胞行为分析:通过细胞迁移、侵袭等实验来评估其功能特性。
特殊染色:使用特定的染色方法来显示细胞内的特殊物质。例如,用油红O染色来鉴定脂肪人骨髓单核细胞的脂滴,或用PAS染色来显示糖原。
产品信息:

英文名称 Human Bone Marrow Monocyte Cells
产品名称 人骨髓单核细胞
组织来源 骨髓
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
货号:YS-01X7559
细胞简介 :

人骨髓单核细胞分离自骨髓;骨髓是机体的造血组织,位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种:红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用,白细胞能杀灭与抑制各种病原体,包括细菌、病毒等;某些淋巴细胞能制造抗体。因此,骨髓不但是造血器官,它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨质间的网眼中,是一种海绵状的组织,能产生血细胞的骨髓略呈红色,称为红骨髓。出生时,红骨髓充满全身骨髓腔,随着年龄增大,脂肪细胞增多,相当部分红骨髓被黄骨髓取代,最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。骨髓单核细胞是一种未成熟的单核细胞,在骨髓细胞中约占0.04%,被认为是破骨细胞的前体细胞,较外周血单个核细胞诱导的破骨细胞得率高、全骨髓诱导法产生的破骨细胞数量多,纯度高,较脾细胞诱导法分化效率高。骨髓单核细胞(BMMNCs)是从股骨或胫骨骨髓中分离提取出来的原代细胞,它属干细胞类型。目前,大多数研究用淋巴细胞分离液分离提取骨髓单核细胞,最近也有采用免疫磁珠分离法分离骨髓单核细胞。
方法简介 公司实验室分离的人骨髓单核细胞采用密度梯度离心法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人骨髓单核细胞经CD68免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 巨噬细胞样
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
人骨髓单核细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞分离步骤:
从实体组织中分离细胞
这个过程的核心目标是将紧密连接的组织解离成单个细胞,形成单细胞悬液。通常包括以下几个步骤:
组织获取与清洗:在无菌条件下获取目标组织,并使用预冷的、不含钙镁离子的平衡盐溶液(如Hanks液或PBS)反复冲洗,以去除血液、坏死组织和杂质。
组织剪碎:使用无菌的解剖刀或剪刀将组织块剪切成约1-3 mm³的小块,以增大后续处理的表面积。
细胞解离:这是最关键的一步,主要有两种方法,也常结合使用。
机械法:通过物理手段分散细胞。例如,用吸管反复吹打、通过不同孔径的细胞筛(如100-200目)过滤、或使用磁力搅拌器进行温和搅拌。
酶消化法:使用特定的酶来分解细胞间的连接蛋白和细胞外基质。常用的酶包括:
胰蛋白酶 (Trypsin):适用于消化细胞间质较少的软组织,如肝、肾、胚胎组织等。通常在37℃下孵育20-30分钟。
胶原酶 (Collagenase):对胶原纤维有很强的消化作用,特别适用于消化富含结缔组织的硬质组织,如肿瘤、乳腺、皮肤等。
Dispase:一种中性蛋白酶,作用相对温和,对细胞损伤较小。
终止消化与过滤:加入含有血清的完全培养基来终止酶的活性(血清中含有酶抑制剂)。随后,用细胞筛(如100μm或更小孔径)过滤细胞悬液,以去除未消化的组织块和大的细胞团。
离心与洗涤:将过滤后的细胞悬液在较低速度下(如500g)离心5-10分钟,弃去上清液。用新鲜的培养基或缓冲液重悬细胞沉淀,重复洗涤1-2次,以彻底去除残留的酶和细胞碎片。
细胞计数与接种:使用血细胞计数板对分离出的细胞进行计数和活性检测(如台盼蓝染色),然后根据实验需求调整细胞密度,接种到培养皿中进行培养。
细胞分离步骤通用注意事项:
无论采用哪种方法,以下几点对于保证细胞活性和实验成功至关重要:
无菌操作:所有步骤都应在超净台中进行,使用的试剂和器材必须无菌,以防细胞污染。
低温环境:在分离过程中,尽量在冰上或4℃环境下操作,以降低细胞代谢,减少损伤。
等渗溶液:使用的所有缓冲液和培养基都必须是等渗的,并含有必要的缓冲体系,以维持细胞正常的渗透压和pH值。
动作轻柔:在吹打、离心和重悬细胞时,动作要轻柔,避免对细胞造成机械损伤。
公司正在出售的产品:
| 细胞过氧化物酶(peroxidase)活性比色法定量检测试剂盒 |
溶血卵磷脂酰基转移酶1重组兔单抗 |
| 组织DYRK1A激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
活性氧物种调节因子1抗体 |
| 细胞总氨基酸含量比色法定量检测试剂盒 |
富含脯氨酸跨膜蛋白2抗体 |
| 通用型HHV6(HUMAN HERPESVIRUS 6)病毒定性检测试剂盒 |
PATL2蛋白抗体 |
| 人体Caveolin-1 RFLP基因分析试剂盒 |
肿瘤坏死因子-α抗体 |
| 石蜡切片组织HISTONE H3蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
丝裂原诱导蛋白2抗体 |
| 石蜡切片组织BAD蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
DOCK9蛋白抗体 |
| 植物组织可溶性膜蛋白高纯制备试剂盒 |
磷酸乙醇胺转移酶2抗体 |
| 细菌脂肪酶(LIPASE)活性比色法定量检测试剂盒 |
醋酸阿托西班抗体 |
| 组织TIE2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
血红素抗体 |
| 活体细胞氧化应激活性氧(ROS)原位染色试剂盒(超氧阴离子) |
5号染色体开放阅读框33抗体 |
| 冰冻切片脂质尼罗红染色试剂盒 |
跨膜蛋白49抗体 |
| 大鼠滋养层干细胞 |
人骨髓单核细胞Rat Rectal Smooth Muscle Cells |
| 人胃平滑肌细胞 |
Human primary Schwann cells |