功能学验证 这是验证人Ⅱ型肺泡上皮细胞是否“名副其实”的关键步骤,通过检测细胞是否具备其应有的生理功能来确认其身份。
人Ⅱ型肺泡上皮细胞特异性功能检测:例如,检测肝细胞的糖原合成能力、胰岛细胞分泌胰岛素的能力或神经元的电生理活动。
细胞行为分析:通过细胞迁移、侵袭等实验来评估其功能特性。
特殊染色:使用特定的染色方法来显示细胞内的特殊物质。例如,用油红O染色来鉴定脂肪人Ⅱ型肺泡上皮细胞的脂滴,或用PAS染色来显示糖原。
产品信息:

英文名称 Human Alveolar Type II Epithelial Cells
产品名称 人Ⅱ型肺泡上皮细胞
组织来源 肺组织
默认种属 人
产品规格 5×10^5Cells/T25
货号:YS-01X7622
细胞简介 :

人Ⅱ型肺泡上皮细胞分离自肺组织;肺泡由单层上皮细胞构成的半球状囊泡。肺中的支气管经多次反复分枝成无数细支气管,它们的末端膨大成囊,囊的四周有很多突出的小囊泡,即为肺泡。小肺泡细胞,又称I型肺泡细胞,厚约0.1微米,基底部是基底膜,无增殖能力。大肺泡细胞,又称Ⅱ型肺泡细胞,分泌表面活性物质(二棕榈酰卵磷脂),以降低肺泡表面张力。Ⅱ型肺泡细胞位于Ⅰ型肺泡细胞之间,数量较Ⅰ型肺泡细胞多,但覆盖面积比Ⅰ型肺泡细胞小。细胞立方形或圆形,顶端突入肺泡腔。细胞核圆形,胞质着色浅、呈泡沫状。电镜下,细胞游离而有少量微绒毛,胞质内富含线粒体和溶酶体,有较发达的粗面内质网和高尔基复合体。核上方有较多的分泌颗粒,电子密度高、大小不等,直径约0.1-1.0μm颗粒内含有平行排列的板层状结构,称为嗜饿性板层小体。小体内的主要成分为磷脂,以二棕榈酰卵磷脂为主,此外还有糖胺多糖及蛋白质等。颗粒内物质释放出来后,在肺泡表面形成一层粘液层,称为表面活性物质(surfactant)。表面活性物质有降低肺泡表面张力、稳定肺泡大小的作用。呼气时肺泡缩小,表面活性物质密度增加,表面张力降低,防止肺泡过度塌陷;吸气时肺泡扩张,表面活性物质密度减小,肺泡回缩力加大,可防止肺泡过度膨胀。表面活性物质的缺乏或变性均可引起肺不张,过度通气可造成表面活性物质缺乏;吸入毒气可直接破坏表面活性物质。Ⅱ型肺泡细胞有分裂、增殖并分化为Ⅰ型肺泡细胞的潜能,故具有修复受损伤上皮的作用。
方法简介 公司实验室分离的人Ⅱ型肺泡上皮细胞采用弹性蛋白酶消化法制备而来制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的人Ⅱ型肺泡上皮细胞经SP-C免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代左右
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
人Ⅱ型肺泡上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞分离步骤:
从实体组织中分离细胞
这个过程的核心目标是将紧密连接的组织解离成单个细胞,形成单细胞悬液。通常包括以下几个步骤:
组织获取与清洗:在无菌条件下获取目标组织,并使用预冷的、不含钙镁离子的平衡盐溶液(如Hanks液或PBS)反复冲洗,以去除血液、坏死组织和杂质。
组织剪碎:使用无菌的解剖刀或剪刀将组织块剪切成约1-3 mm³的小块,以增大后续处理的表面积。
细胞解离:这是最关键的一步,主要有两种方法,也常结合使用。
机械法:通过物理手段分散细胞。例如,用吸管反复吹打、通过不同孔径的细胞筛(如100-200目)过滤、或使用磁力搅拌器进行温和搅拌。
酶消化法:使用特定的酶来分解细胞间的连接蛋白和细胞外基质。常用的酶包括:
胰蛋白酶 (Trypsin):适用于消化细胞间质较少的软组织,如肝、肾、胚胎组织等。通常在37℃下孵育20-30分钟。
胶原酶 (Collagenase):对胶原纤维有很强的消化作用,特别适用于消化富含结缔组织的硬质组织,如肿瘤、乳腺、皮肤等。
Dispase:一种中性蛋白酶,作用相对温和,对细胞损伤较小。
终止消化与过滤:加入含有血清的完全培养基来终止酶的活性(血清中含有酶抑制剂)。随后,用细胞筛(如100μm或更小孔径)过滤细胞悬液,以去除未消化的组织块和大的细胞团。
离心与洗涤:将过滤后的细胞悬液在较低速度下(如500g)离心5-10分钟,弃去上清液。用新鲜的培养基或缓冲液重悬细胞沉淀,重复洗涤1-2次,以彻底去除残留的酶和细胞碎片。
细胞计数与接种:使用血细胞计数板对分离出的细胞进行计数和活性检测(如台盼蓝染色),然后根据实验需求调整细胞密度,接种到培养皿中进行培养。
细胞分离步骤通用注意事项:
无论采用哪种方法,以下几点对于保证细胞活性和实验成功至关重要:
无菌操作:所有步骤都应在超净台中进行,使用的试剂和器材必须无菌,以防细胞污染。
低温环境:在分离过程中,尽量在冰上或4℃环境下操作,以降低细胞代谢,减少损伤。
等渗溶液:使用的所有缓冲液和培养基都必须是等渗的,并含有必要的缓冲体系,以维持细胞正常的渗透压和pH值。
动作轻柔:在吹打、离心和重悬细胞时,动作要轻柔,避免对细胞造成机械损伤。
公司正在出售的产品:
| 冰冻切片糖原高碘酸希尔(PAS)法染色试剂盒 |
AF750标记的烟碱型乙酰胆碱受体α7抗体 |
| 组蛋白脱乙酰化酶3(HDAC3)活性比色法定量检测试剂盒 |
钾离子通道蛋白15抗体 |
| 体外非细胞系统细胞色素P450亚酶4F3B(LEUKOTRINE B4) |
谷氨酰-tRNA合成酶蛋白1抗体 |
| 纯化微粒体磷脂酶D(Phospholipase D)总活性荧光定量检测试剂盒 |
P因子/备解素抗体 |
| 细胞N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)活性比色法定量检测试剂盒 |
转运蛋白3抗体 |
| 冰冻切片组织APC蛋白表达CDK2显色光学显微镜检测试剂盒 |
突触受体相关蛋白43抗体 |
| 冰冻切片组织PI-3 KINASE P110BETA蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
FBN3蛋白抗体 |
| 体液精(arginine)含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 |
脑胶质瘤发病机制相关蛋白1抗体 |
| YPD培养基 |
凋亡诱导蛋白D抗体 |
| 细胞基质金属(MMP-9)活性比色法定量检测试剂盒 |
抑制细胞凋亡样蛋白2抗体 |
| 纯化线粒体DNA萃取试剂盒 |
APC标记人CD42b单克隆抗体 |
| 动物组织石蜡切片糖蛋白高碘酸希尔(PAS)法 |
磷酸化Ras GTP酶活化蛋白结合蛋白1抗体 |
| 大鼠血管外膜成纤维细胞 |
人Ⅱ型肺泡上皮细胞Rat Thymic Lymphocyte Cells |
| 兔肝卵圆细胞 |
Rabbit primary femoral artery endothelial cells |