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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
细胞简介：
大鼠真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织；真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞（MEC）在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域，由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟，人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比，对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞，则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。
方法简介 公司实验室分离的大鼠真皮微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠真皮微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性：
产品信息
产品名称 大鼠真皮微血管内皮细胞
组织来源 皮肤组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠真皮微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养过程：
原代细胞与细胞系的比较;
大鼠真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织；真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞（MEC）在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域，由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟，人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比，对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞，则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。
方法简介 公司实验室分离的大鼠真皮微血管内皮细胞采用胶原酶-中性蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、最后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠真皮微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性：
| 产品名称 | 大鼠真皮微血管内皮细胞 | 货号 | YS-01X7588 |
| 英文名称 | Rat Dermal Microvascular Endothelial Cells | 组织来源 | 皮肤组织 |
| 规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 种属 | 大鼠 |
产品名称 大鼠真皮微血管内皮细胞
组织来源 皮肤组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息：
包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 内皮细胞样
传代特性 可传2-3代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%
大鼠真皮微血管内皮细胞体外培养周期有限；建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养，以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养过程：
第一阶段：准备与取材
这是整个实验的基础，直接决定了细胞的初始活性和后续培养的成功率。
器材与试剂准备
器材： 确保超净工作台、培养箱、离心机、倒置显微镜等设备运行正常。所有培养瓶、培养皿、移液管、手术器械等必须经过严格的高压灭菌处理。
试剂： 根据细胞类型配制好合适的培养基（如DMEM、RPMI-1640等），并添加胎牛血清（FBS）、抗生素（如青霉素-链霉素）等必需成分。准备好无菌的PBS或Hanks'平衡盐溶液用于洗涤。
组织获取
在无菌条件下，从实验动物或临床手术样本中快速、轻柔地获取目标组织。
取材过程应尽量减少对组织的机械损伤和缺血时间，以保持细胞的高活力。
获取的组织应立即放入预冷（4℃）的、含有高浓度抗生素的PBS或专用运输液中，以抑制污染并维持细胞活性。
第二阶段：分离与纯化
此阶段的目的是从组织中获取高纯度、高活性的单细胞悬液。
组织处理
在超净台内，用含双抗的PBS或Hanks'液反复洗涤组织，彻底去除血液、脂肪和结缔组织等杂质。
用无菌手术剪或刀片将组织剪切成1-3 mm³的小块，以增加酶消化的接触面积。
细胞分离
主要有两种方法，可根据组织类型选择：
酶消化法： 这是最常用的方法。向组织块中加入适量的消化酶（如胰蛋白酶、胶原酶等），在37℃条件下孵育并间歇性振荡或吹打。显微镜下观察，当大部分组织块变得松散、细胞开始游离时，立即加入含血清的培养基终止消化。
组织块贴壁法： 将组织小块直接贴附于培养瓶底，加入少量培养液（不没过组织块），静置数小时让细胞从组织块边缘迁移出来，然后翻转培养瓶，让培养液浸没组织块继续培养。
第三阶段：接种与培养
将分离好的细胞置于模拟体内环境的条件下进行培养。
细胞接种
将调整好浓度的细胞悬液接种到合适的培养容器（如培养瓶、培养板）中。
对于某些难贴壁的细胞，可预先用多聚赖氨酸、胶原等细胞外基质蛋白包被培养表面。
培养条件
将培养容器放入37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱中静置培养。
接种后24小时内，应在倒置显微镜下观察细胞的贴壁情况、形态和有无污染。
第四阶段：观察与传代
监测细胞状态并在适当时机进行扩增。
日常观察
每天通过倒置显微镜观察细胞的形态、密度和生长状态。健康的原代细胞形态规则，折光性好，立体感强。
细胞传代
当细胞增殖至覆盖培养表面80%-90%（汇合度）时，即可进行传代。
弃去旧培养基，用PBS洗涤后，加入适量胰蛋白酶在37℃下消化，待细胞变圆、间隙增大时，加入含血清的培养基终止消化。
吹打成单细胞悬液，离心后按1:2或1:3的比例分装到新的培养瓶中继续培养。
比较维度 原代细胞 细胞系
来源 直接从活体组织分离 由原代细胞或肿瘤组织经长期传代或转化形成
生物学真实性 高，最接近体内状态 较低，长期培养可能导致特性丢失或改变
遗传背景 稳定，通常为二倍体 不稳定，常发生基因突变和染色体异常
细胞群体 异质性，可能包含多种细胞 均质性，来源于单个克隆，背景单一
增殖能力 有限，会衰老死亡 无限，可长期传代
主要应用 药物筛选、毒理研究、个性化医疗 高通量筛选、机制研究、大规模生产
公司正在出售的产品：
| 冰冻切片NADH心肌黄酶（NADH-TR）活性染色试剂盒 | Cy5.5标记的巨噬细胞清道夫受体1抗体 |
| 血小板活化因子乙酰水解酶（PAF AH）活性比色法定量检测试剂盒 | 钾离子通道多聚体结构域蛋白14抗体 |
| 体外非细胞系统细胞色素P450亚酶2A6（COUMARIN）活性 | 谷胱甘肽S转移酶2抗体 |
| 组织中链酮脂酰硫解酶（KETOACYL COA THIOLASE）活性比色法定量检测试剂盒 | Rab蛋白GTP酶激活蛋白1抗体 |
| 饮料钠离子（Na）浓度化学比色法定量检测试剂盒 | 装配衔接蛋白180抗体 |
| ?细胞COLLAGEN III蛋白表达荧光定量检测试剂盒 | 退行性精母细胞同源物1抗体 |
| 冰冻切片组织IKB-ALPHA蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | FBXL14蛋白抗体 |
| 维生素B1微生物培养法定量检测试剂盒 | 脑特异性同源POU结构域蛋白5抗体 |
| 噬菌体溶菌斑点免疫杂交筛选试剂盒 | 豆蔻酰基转移酶1抗体 |
| 细胞基质金属（MMP-3）活性荧光定量检测试剂盒 | 尤文肉瘤FLI1蛋白抗体 |
| 纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒 | APC标记人HLA-DR单克隆抗体 |
| λDNA （HINDIII）标准样（100至2000碱基） | 磷酸化TRAF2和NCK激酶相互作用蛋白抗体 |
| 大鼠外周血来源内皮祖细胞 | 大鼠真皮微血管内皮细胞Rat Placental Chorionic Trophoblast Cells |
| 兔脑动脉平滑肌细胞 | abbit primary bladder stromal fibroblasts |
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