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大鼠晶状体上皮细胞
英文名称:Rat Lens Epithelial Cells总访问:1
国产/进口:国产半年访问:1
产地/品牌:上研生产品类别:细胞生物学试剂
规       格:5×10^5Cells/T25 最后更新:2026-4-9
货       号:YS-01X7384
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  • 产品介绍
  • 公司简介
细胞简介:
大鼠晶状体上皮细胞分离自晶状体组织;晶状体源自胚胎发育外胚层,仅含有上皮细胞及其产物,晶状体囊膜作为屏障将晶状体与其它类型细胞完全分开;因而,晶状体上皮细胞培养既无神经和血管组织的干扰,又不受其它类型细胞如成纤维细胞的污染,保证了培养中细胞成分的单一性。晶状体上皮细胞主要负责调节晶状体的生理平衡,包括电解质和液体的输送。在正常的发育过程中,晶状体上皮细胞分化和成熟,然后迁移到晶状体内部,产生晶体蛋白,自身也拉长而变成晶状体纤维细胞,并最终失去细胞核和其它的细胞器。研究表明,晶状体上皮细胞的分化和极化受到了眼部液体中的生长因子的调控,包括表皮生长因子和胰岛素等。细胞贴壁后为扁平不规则多角形,呈单层生长、连成膜状。晶状体上皮细胞是紧密贴附于晶状体前囊内表面的单层上皮细胞,其异常增殖和分化与白内障和后囊混浊的发生密切相关,体外培养是研究其生长规律的主要手段。
方法简介 公司实验室分离的大鼠晶状体上皮细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法,并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠晶状体上皮细胞经BFSP2(晶状体蛋白)免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
商品属性:
产品名称 大鼠晶状体上皮细胞 货号 YS-01X7384
英文名称 Rat Lens Epithelial Cells 组织来源 晶状体组织
规格 5×10⁵Cells/T25培养瓶 种属 大鼠
产品信息
产品名称 大鼠晶状体上皮细胞
组织来源 晶状体组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
培养信息:
包被条件 鼠尾胶原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 上皮细胞样
传代特性 可传1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠晶状体上皮细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
原代细胞培养过程:
第一阶段:准备与取材
这是整个实验的基础,直接决定了细胞的初始活性和后续培养的成功率。
器材与试剂准备
器材: 确保超净工作台、培养箱、离心机、倒置显微镜等设备运行正常。所有培养瓶、培养皿、移液管、手术器械等必须经过严格的高压灭菌处理。
试剂: 根据细胞类型配制好合适的培养基(如DMEM、RPMI-1640等),并添加胎牛血清(FBS)、抗生素(如青霉素-链霉素)等必需成分。准备好无菌的PBS或Hanks'平衡盐溶液用于洗涤。
组织获取
在无菌条件下,从实验动物或临床手术样本中快速、轻柔地获取目标组织。
取材过程应尽量减少对组织的机械损伤和缺血时间,以保持细胞的高活力。
获取的组织应立即放入预冷(4℃)的、含有高浓度抗生素的PBS或专用运输液中,以抑制污染并维持细胞活性。
第二阶段:分离与纯化
此阶段的目的是从组织中获取高纯度、高活性的单细胞悬液。
组织处理
在超净台内,用含双抗的PBS或Hanks'液反复洗涤组织,彻底去除血液、脂肪和结缔组织等杂质。
用无菌手术剪或刀片将组织剪切成1-3 mm³的小块,以增加酶消化的接触面积。
细胞分离
主要有两种方法,可根据组织类型选择:
酶消化法: 这是最常用的方法。向组织块中加入适量的消化酶(如胰蛋白酶、胶原酶等),在37℃条件下孵育并间歇性振荡或吹打。显微镜下观察,当大部分组织块变得松散、细胞开始游离时,立即加入含血清的培养基终止消化。
组织块贴壁法: 将组织小块直接贴附于培养瓶底,加入少量培养液(不没过组织块),静置数小时让细胞从组织块边缘迁移出来,然后翻转培养瓶,让培养液浸没组织块继续培养。
第三阶段:接种与培养
将分离好的细胞置于模拟体内环境的条件下进行培养。
细胞接种
将调整好浓度的细胞悬液接种到合适的培养容器(如培养瓶、培养板)中。
对于某些难贴壁的细胞,可预先用多聚赖氨酸、胶原等细胞外基质蛋白包被培养表面。
培养条件
将培养容器放入37℃、5% CO₂的恒温恒湿培养箱中静置培养。
接种后24小时内,应在倒置显微镜下观察细胞的贴壁情况、形态和有无污染。
第四阶段:观察与传代
监测细胞状态并在适当时机进行扩增。
日常观察
每天通过倒置显微镜观察细胞的形态、密度和生长状态。健康的原代细胞形态规则,折光性好,立体感强。
细胞传代
当细胞增殖至覆盖培养表面80%-90%(汇合度)时,即可进行传代。
弃去旧培养基,用PBS洗涤后,加入适量胰蛋白酶在37℃下消化,待细胞变圆、间隙增大时,加入含血清的培养基终止消化。
吹打成单细胞悬液,离心后按1:2或1:3的比例分装到新的培养瓶中继续培养。
原代细胞与细胞系的比较;
比较维度  原代细胞  细胞系
来源  直接从活体组织分离  由原代细胞或肿瘤组织经长期传代或转化形成
生物学真实性  高,最接近体内状态  较低,长期培养可能导致特性丢失或改变
遗传背景  稳定,通常为二倍体  不稳定,常发生基因突变和染色体异常
细胞群体  异质性,可能包含多种细胞  均质性,来源于单个克隆,背景单一
增殖能力  有限,会衰老死亡  无限,可长期传代
主要应用  药物筛选、毒理研究、个性化医疗  高通量筛选、机制研究、大规模生产
公司正在出售的产品:
组织糖原硫酸蒽酮比色法定量检测试剂盒 14号染色体开放阅读框156抗体
组织溶酶体脂酶(酸性脂酶)活性比色法定量检测试剂盒 结构蛋白家族1抗体
大量质粒DNA氯化铯纯化试剂盒 含锚蛋白重复序列-细胞因子信号抑制物盒蛋白家族17抗体
组织硝酸盐含量比色法定量检测试剂盒 RNA结合蛋白22抗体
冰冻切片苏木素染色试剂盒 组织相容性抗原DQA1/DQA2抗体
LEUCOCYTE ELASTASE 未知糖基化转移酶AER61抗体
IP3R受体蛋白表达ELISA定量检测试剂盒 FITC标记小鼠CD31单克隆抗体
牛病毒性腹泻病毒I型(Bovine Viral Diarrhoea Virus -1;BVDV-1) 凝血因子13抗体(纤维蛋白稳定因子)
通用型科萨基病毒A(Coxsackievirus A)定量PCR扩增检测试剂盒 二酰基甘油激酶5/DGK-ε抗体
半乳糖基转移酶(galactosyl transferase) 再生基因蛋白4抗体
钙镁磷酸平衡盐(PBS)缓冲溶液 BCL2样10促凋亡蛋白抗体
组蛋白H3-S31磷酸化检测试剂盒 磷酸化含SH2结构域接头蛋白B抗体
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