功能学验证 这是验证大鼠膀胱平滑肌细胞是否“名副其实”的关键步骤,通过检测细胞是否具备其应有的生理功能来确认其身份。
大鼠膀胱平滑肌细胞特异性功能检测:例如,检测肝细胞的糖原合成能力、胰岛细胞分泌胰岛素的能力或神经元的电生理活动。
细胞行为分析:通过细胞迁移、侵袭等实验来评估其功能特性。
特殊染色:使用特定的染色方法来显示细胞内的特殊物质。例如,用油红O染色来鉴定脂肪大鼠膀胱平滑肌细胞的脂滴,或用PAS染色来显示糖原。
产品信息:

英文名称 Rat Bladder Smooth Muscle Cells
产品名称 大鼠膀胱平滑肌细胞
组织来源 膀胱组织
默认种属 大鼠
产品规格 5×10^5Cells/T25
货号:YS-01X7232
细胞简介 :

大鼠膀胱平滑肌细胞分离自膀胱组织;膀胱是主要由平滑肌细胞组成的中空器官,膀胱平滑肌的舒张和收缩使得膀胱分别储存和排出尿液。膀胱平滑肌细胞表型的调控和可诱导一氧化氮合酶的表达与多种病理状况有关,包括膀胱功能障碍。研究表明,组织缺氧抑制膀胱平滑肌细胞的增殖,膀胱平滑肌细胞的分化依赖于膀胱上皮细胞释放的因子。膀胱平滑肌细胞外基质的分泌表型可通过细胞所经历的机械变形频率而改变。平滑肌是许多疾病中的共同路径,因此,了解在疾病发生及持续过程中平滑肌怎样变化,这是治疗方法取得进展的重要一步。膀胱壁由三层组织组成,由内而外为黏膜层、肌层和外膜。其中,肌层主要由平滑肌构成。膀胱平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。体外培养膀胱平滑肌细胞不仅为组织工程膀胱、尿道提供种植细胞的必要手段,也是研究平滑肌瘤的基础与前提。
方法简介 公司实验室分离的大鼠膀胱平滑肌细胞采用胰蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测 公司实验室分离的大鼠膀胱平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
培养信息:

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 贴壁
细胞形态 成纤维细胞样
传代特性 可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
大鼠膀胱平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
细胞分离步骤:
从实体组织中分离细胞
这个过程的核心目标是将紧密连接的组织解离成单个细胞,形成单细胞悬液。通常包括以下几个步骤:
组织获取与清洗:在无菌条件下获取目标组织,并使用预冷的、不含钙镁离子的平衡盐溶液(如Hanks液或PBS)反复冲洗,以去除血液、坏死组织和杂质。
组织剪碎:使用无菌的解剖刀或剪刀将组织块剪切成约1-3 mm³的小块,以增大后续处理的表面积。
细胞解离:这是最关键的一步,主要有两种方法,也常结合使用。
机械法:通过物理手段分散细胞。例如,用吸管反复吹打、通过不同孔径的细胞筛(如100-200目)过滤、或使用磁力搅拌器进行温和搅拌。
酶消化法:使用特定的酶来分解细胞间的连接蛋白和细胞外基质。常用的酶包括:
胰蛋白酶 (Trypsin):适用于消化细胞间质较少的软组织,如肝、肾、胚胎组织等。通常在37℃下孵育20-30分钟。
胶原酶 (Collagenase):对胶原纤维有很强的消化作用,特别适用于消化富含结缔组织的硬质组织,如肿瘤、乳腺、皮肤等。
Dispase:一种中性蛋白酶,作用相对温和,对细胞损伤较小。
终止消化与过滤:加入含有血清的完全培养基来终止酶的活性(血清中含有酶抑制剂)。随后,用细胞筛(如100μm或更小孔径)过滤细胞悬液,以去除未消化的组织块和大的细胞团。
离心与洗涤:将过滤后的细胞悬液在较低速度下(如500g)离心5-10分钟,弃去上清液。用新鲜的培养基或缓冲液重悬细胞沉淀,重复洗涤1-2次,以彻底去除残留的酶和细胞碎片。
细胞计数与接种:使用血细胞计数板对分离出的细胞进行计数和活性检测(如台盼蓝染色),然后根据实验需求调整细胞密度,接种到培养皿中进行培养。
细胞分离步骤通用注意事项:
无论采用哪种方法,以下几点对于保证细胞活性和实验成功至关重要:
无菌操作:所有步骤都应在超净台中进行,使用的试剂和器材必须无菌,以防细胞污染。
低温环境:在分离过程中,尽量在冰上或4℃环境下操作,以降低细胞代谢,减少损伤。
等渗溶液:使用的所有缓冲液和培养基都必须是等渗的,并含有必要的缓冲体系,以维持细胞正常的渗透压和pH值。
动作轻柔:在吹打、离心和重悬细胞时,动作要轻柔,避免对细胞造成机械损伤。
公司正在出售的产品:
| 细胞羧酸酯酶(carboxylesterase;CE)活性比色法定量检测试剂盒 |
配对盒基因9重组兔单抗 |
| 细胞ERK1/2激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
环指蛋白6抗体 |
| 转基因玉米MON810品系基因检测试剂盒 |
富含亮氨酸重复蛋白32抗体 |
| 通用型人体鼻病毒(rhinovirus)定性检测试剂盒 |
P53诱导细胞凋亡抑制蛋白α抗体 |
| 人体SOCS-3基因甲基化检测试剂盒 |
中心体蛋白CEP120抗体 |
| 石蜡切片组织EGFR 蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 |
丝氨酸蛋白酶抑制剂SPINK5抗体 |
| AKT蛋白表达西方杂交分析试剂盒 |
DNA聚合酶α2抗体 |
| 细胞染色质免疫沉淀分析(CHIP)试剂盒 |
磷酸化转录因子SOX9蛋白抗体 |
| PH8-9显色(THYMOL BLUE)指示溶液 |
雌激素下调基因1蛋白抗体 |
| 植物酸性磷酸酶总活性比色法定量检测试剂盒 |
血管活性肠肽抗体 |
| 细胞氧化应激活性氧(ROS)光泽精化学发光法定量检测试剂盒 |
3号染色体开放阅读框37抗体 |
| 饮料甘素(dulcin)含量薄层色谱法定性检测试剂盒 |
可溶性载质转运蛋白22A17抗体 |
| 大鼠表皮角质形成细胞 |
大鼠膀胱平滑肌细胞Rat Dorsal Root Neuron Cells |
| 鸭脑微血管内皮细胞 |
Primary sheep lung microvascular endothelial cells |