产品概述
岩藻糖1磷酸鸟苷酰转移酶抗体是针对岩藻糖1磷酸鸟苷酰转移酶制备的特异性抗体,岩藻糖1磷酸鸟苷酰转移酶是参与岩藻糖代谢途径的关键酶,能够催化岩藻糖1磷酸与鸟苷三磷酸(GTP)反应生成鸟苷二磷酸岩藻糖(GDP-岩藻糖),GDP-岩藻糖是糖蛋白、糖脂等分子中岩藻糖基化的供体,其功能异常可导致岩藻糖代谢紊乱,引发岩藻糖贮积症等疾病。该抗体可用于免疫组化、免疫印迹等实验,帮助研究人员检测岩藻糖1磷酸鸟苷酰转移酶的表达水平和定位,为探讨岩藻糖代谢机制及相关疾病发病机制提供研究工具,在代谢性疾病研究等领域具有应用价值。
产品基本信息
中文名称:岩藻糖1磷酸鸟苷酰转移酶抗体
英文名称:FPGT Rabbit pAb
英文别名:FPGT; FPGT_HUMAN; Fucose 1 phosphate guanyltransferase; Fucose 1 phosphate guanylyltransferase; Fucose-1-phosphate guanylyltransferase; GDP beta L fucose pyrophosphorylase; GDP L fucose diphosphorylase; GDP L fucose pyrophosphorylase; GDP-L-fucose diphosphorylase; GDP-L-fucose pyrophosphorylase; GFPP.
产品应用:WB=1:500-2000, IHC-P=1:100-500, IHC-F=1:100-500, IF=1:100-500, ICC/IF=1:100-500, ELISA=1:5000-10000
抗体来源:Rabbit
免疫源:KLH conjugated synthetic peptide derived from human FPGT
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量:67 kDa
浓度:1mg/ml
储存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
实验操作过程建议
Western Blot
凝胶制备:分离胶浓度根据靶蛋白分子量选择(如20kDa用15%胶,100kDa用8%胶);
转膜:用湿转或半干转,转膜电流/电压根据蛋白分子量调整,小分子蛋白缩短转膜时间,大分子蛋白延长时间;
封闭:用5%脱脂牛奶或BSA封闭1-2小时,避免非特异性结合(磷酸化蛋白检测需用BSA封闭);
抗体孵育:一抗4℃孵育过夜,二抗室温孵育1小时,减少背景信号。
IHC/IF
组织切片:厚度控制在4-6μm,避免过厚导致染色不均;
抗原修复:IHC常用柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)高压修复,IF常用Triton X-100透化,根据抗体说明书选择合适方法;
抗体孵育:IHC用3%H₂O₂灭活内源性过氧化物酶,IF用5%BSA封闭非特异性结合,孵育抗体时注意避光(IF);
染色后处理:IHC用苏木素复染细胞核,IF用DAPI染核,封片时避免产生气泡。
ELISA
包被:用碳酸盐缓冲液(pH9.6)稀释抗原/抗体,4℃包被过夜,确保抗原/抗体均匀吸附在板上;
孵育:严格控制孵育时间和温度,避免出现边缘效应;
洗板:每步洗板3-5次,拍干孔内液体,避免残留未结合的抗体或抗原;
显色:加入底物后避光显色,显色时间根据说明书调整,避免显色过度。
IP
细胞裂解:用温和的非离子型去污剂(如NP-40)裂解细胞,保持蛋白复合物的稳定性;
抗体-磁珠孵育:提前将一抗与Protein A/G磁珠孵育1-2小时,形成抗体-磁珠复合物,减少非特异性结合;
洗涤:用含低浓度去污剂的洗涤液洗涤3-5次,去除非特异性结合的蛋白;
洗脱:用中性pH的洗脱液或煮沸法洗脱,避免蛋白变性。
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抗体鉴定的关键注意事项
科研实验
新抗体需先通过ELISA和验证效价和特异性,再进行后续实验;
不同种属的抗体交叉反应性不同,实验前需确认抗体适用的样本种属(如人源、小鼠源)。
临床检测
抗体阳性结果需结合临床症状综合判断,部分抗体阳性仅提示感染史(如丙肝抗体阳性需结合HCV-RNA检测判断是否现症感染);
自身抗体检测可能存在假阳性,需多次复查或结合其他指标确诊。