检测原理:
本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)将特异性抗体包被于微孔板上,形成固相抗体层。加入样本后,目标抗原TNFsR-Ⅱ 小鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅱ与固相抗体结合,形成“固相抗体-抗原”复合物。随后加入酶标记的二抗体,与抗原另一表位结合,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”复合物。加入底物显色后,颜色深浅与抗原浓度成正比,通过酶标仪定量分析。
检测前准备工作:
1. 请提前20分钟从冰箱中取出试剂盒,平衡至室温。
2. 从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象;放置室温,轻摇均匀,待结晶完全溶解后再配置洗涤液。可将20ml浓缩洗涤液用蒸馏水或去离子水稀释配置成400ml工作浓度的洗涤液,未用完的放回4℃
3. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。。
结果判断与计算:
1. 所有OD值建议减除空白值后再行计算,如空白OD低于0.1,也可以直接计算。
2. 以标准品浓度作横坐标,OD值作纵坐标,手工绘制或用软件绘制标准曲线,根据样品OD值计算出相应含量,再乘上稀释倍数即可。
试剂盒性能:
1、 检测范围:15.6-1000pg/mL
2、 特异性:同时可检测重组或天然的某种蛋白或抗体,不与其它细胞因子有交叉反应。
3、 重复性:板内,板间变异系数均小于10%。
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