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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
检测原理
包被与捕获：试剂盒的微孔板上预先包被了能特异性结合人FVIII的捕获抗体（通常为FVIII单克隆抗体）。
抗原抗体反应：向微孔中依次加入待测样本（如血清、血浆）和生物素标记的检测抗体。样本中的FVIII（抗原）会同时与包被的捕获抗体和检测抗体结合，形成一个“抗体-抗原-抗体”的夹心复合物，并固定在微孔板上。
酶结合与洗涤：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素（Streptavidin），它会与生物素标记的检测抗体高亲和力结合。通过多次洗涤步骤，去除未结合的游离物质。
显色反应：加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）。在HRP的催化下，TMB由无色变为蓝色。
终止与检测：加入终止液（通常为硫酸）后，反应终止，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中FVIII的浓度呈正相关。最后，使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），通过标准曲线计算出样本中FVIII的浓度。
产品属性
主要产品性能参数
灵敏度 ≤ 0.273 ng/mL (或 < 0.1 ng/mL) 具体数值依厂家而定
检测范围 0.625 - 40 ng/mL 或 0.156 - 10 ng/mL 也有部分试剂盒范围可能不同，需参照说明书
特异性 高 识别人源FVIII，与其他凝血因子无明显交叉反应
重复性 CV < 10% (批内), CV < 12% (批间) 板内和板间变异系数通常小于15%
抗原抗体反应：向微孔中依次加入待测样本（如血清、血浆）和生物素标记的检测抗体。样本中的FVIII（抗原）会同时与包被的捕获抗体和检测抗体结合，形成一个“抗体-抗原-抗体”的夹心复合物，并固定在微孔板上。
酶结合与洗涤：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的亲和素（Streptavidin），它会与生物素标记的检测抗体高亲和力结合。通过多次洗涤步骤，去除未结合的游离物质。
显色反应：加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）。在HRP的催化下，TMB由无色变为蓝色。
终止与检测：加入终止液（通常为硫酸）后，反应终止，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中FVIII的浓度呈正相关。最后，使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），通过标准曲线计算出样本中FVIII的浓度。
产品属性
| 产品名称 | 人凝血因子VIII(FVⅢ)ELISA试剂盒 | 货号 | LZ-E029457 |
| 英文名称 | Human coagulation factor VIII,FVⅢ ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
| 用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 联祖 |
检测范围 0.625 - 40 ng/mL 或 0.156 - 10 ng/mL 也有部分试剂盒范围可能不同，需参照说明书
特异性 高 识别人源FVIII，与其他凝血因子无明显交叉反应
重复性 CV < 10% (批内), CV < 12% (批间) 板内和板间变异系数通常小于15%
ELISA试剂盒的局限性与缺点
1. 操作步骤繁琐，对操作要求高
流程长：典型的ELISA实验涉及加样、多次孵育、多次洗涤、显色、终止等步骤，耗时较长（通常需要3-5小时甚至过夜）。
洗涤关键：洗涤步骤至关重要，洗板不彻底会导致背景值过高（假阳性），洗板过度或干涸则影响灵敏度。这对操作人员的细心程度有一定要求。
2. 易受干扰与“钩状效应”
钩状效应 (Hook Effect)：当样本中目标抗原浓度极高时，可能会饱和捕获抗体和检测抗体，导致信号反而下降，出现假阴性结果。这需要对高浓度样本进行稀释复测。
基质干扰：样本中的杂质（如溶血、脂血、类风湿因子等）可能会干扰抗原抗体结合，导致结果偏差。
交叉反应：虽然特异性较高，但如果抗体质量不佳，仍可能与结构相似的分子发生交叉反应。
3. 仅检测抗原含量，信息有限
ELISA只能告诉你“有多少”抗原，无法提供关于抗原的生物活性（是否具有功能）或结构完整性的信息。例如，变性的蛋白可能仍能被ELISA检测，但已失去生物活性。
4. 试剂成本与稳定性
试剂成本：高质量的抗体（尤其是配对良好的单抗）制备工艺复杂，导致试剂盒成本相对较高。
酶的不稳定性：酶标记物对温度和环境敏感，若保存不当容易失活，影响实验结果。
公司正在出售的产品
| 体液无机磷/游离磷酸根离子比色法定量检测试剂盒 | 荧光或共聚焦显微镜制片封片处理液（荧光稳定、保存） |
| 石蜡切片组织AKT蛋白表达荧光显微镜检测试剂盒 | Bouin固着液 |
| 脱羧酶 | DMEM细胞培养基（无酚红） |
| 细胞甲基化组蛋白H3-K4染色质免疫沉淀分析（CHIP）试剂盒 | 肌酸激酶同工酶MB单克隆抗体 |
| 细胞SRCN2激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） | 腺病毒冻存培养基 |
| EGFR 蛋白免疫共沉淀分析试剂盒 | 化妆品阿斯巴塘（aspartame）含量酶连续循环反应比色法定量检测试剂盒 |
| 体液CMV（CYTOMEGALOVIRUS）病毒定量PCR扩增检测试剂盒 | 己糖激酶3抗体 |
| ras癌基因家族Rab5蛋白抗体 | 含普列克底物蛋白家族B成员2抗体 |
| 阻抑素/肿瘤抑制因子抗体 | FAM90A27P抗体 |
| 钠氢通道蛋白抗体 | 电压门控钾通道蛋白1抗体 |
| 抑癌基因p19抗体 | APC标记人CD18单克隆抗体 |
| 突触核膜蛋白2抗体 | 磷酸核糖胺咪唑羧化酶抗体 |
| 小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 | 人凝血因子VIII(FVⅢ)ELISA试剂盒小鼠碱性磷酸酶(ALP)ELISA试剂盒 |
| 人牛奶过敏原特异性IgE抗体ELISA试剂盒 | 人促黄体激素(LH)ELISA试剂盒 |
注意事项
样本要求：溶血的标本会影响检测结果，不宜使用。待测样本应尽早检测，如需保存，应在-20℃或-80℃冷冻，并避免反复冻融。
试剂准备：使用前需将所有试剂置于室温（20-25℃）平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出，需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范：
为避免交叉污染，添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色，若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要，无论是手动还是自动洗板，都应确保洗涤充分，并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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