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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
检测原理
固相抗体包被：试剂盒的酶标板微孔中预先包被了能特异性识别人羟赖氨酸（Hyl）的抗体（捕获抗体）。
抗原-抗体反应：向微孔中依次加入样本（如血清、血浆、组织匀浆等）和酶标记的检测抗体（如HRP标记的抗Hyl抗体）。样本中的羟赖氨酸抗原会同时与固相抗体和酶标检测抗体结合，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的三明治夹心复合物。
洗涤：通过洗涤步骤，去除未与复合物结合的其他物质。
显色反应：加入底物溶液，如四甲基联苯胺（TMB）。在酶（HRP）的催化下，TMB底物会转化为蓝色。
终止与测定：加入终止液（如酸性溶液）终止反应，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中羟赖氨酸的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），通过标准曲线即可计算出样本中Hyl的浓度。
产品属性
主要产品性能参数
参数类别 具体说明
检测方法 双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）
检测样本 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及相关液体样本
检测波长 450nm
特异性 能够特异性识别Hyl，不与其它可溶性结构类似物发生交叉反应
重复性 板内变异系数（CV）通常<10%，板间变异系数（CV）通常<15%
准确性 标准品线性回归与预期浓度的相关系数R值，通常≥0.9900
灵敏度 因产品而异，例如检测浓度小于0.1 ng/mL
检测范围 例如：3.6 ng/mL - 150 ng/mL (仅
抗原-抗体反应：向微孔中依次加入样本（如血清、血浆、组织匀浆等）和酶标记的检测抗体（如HRP标记的抗Hyl抗体）。样本中的羟赖氨酸抗原会同时与固相抗体和酶标检测抗体结合，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的三明治夹心复合物。
洗涤：通过洗涤步骤，去除未与复合物结合的其他物质。
显色反应：加入底物溶液，如四甲基联苯胺（TMB）。在酶（HRP）的催化下，TMB底物会转化为蓝色。
终止与测定：加入终止液（如酸性溶液）终止反应，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中羟赖氨酸的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），通过标准曲线即可计算出样本中Hyl的浓度。
产品属性
| 产品名称 | 人羟赖氨酸(Hyl)ELISA试剂盒 | 货号 | LZ-E029383 |
| 英文名称 | Human hydroxylysine,Hyl ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
| 用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 联祖 |
检测方法 双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）
检测样本 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及相关液体样本
检测波长 450nm
特异性 能够特异性识别Hyl，不与其它可溶性结构类似物发生交叉反应
重复性 板内变异系数（CV）通常<10%，板间变异系数（CV）通常<15%
准确性 标准品线性回归与预期浓度的相关系数R值，通常≥0.9900
灵敏度 因产品而异，例如检测浓度小于0.1 ng/mL
检测范围 例如：3.6 ng/mL - 150 ng/mL (仅
ELISA试剂盒的局限性与缺点
1. 操作步骤繁琐，对操作要求高
流程长：典型的ELISA实验涉及加样、多次孵育、多次洗涤、显色、终止等步骤，耗时较长（通常需要3-5小时甚至过夜）。
洗涤关键：洗涤步骤至关重要，洗板不彻底会导致背景值过高（假阳性），洗板过度或干涸则影响灵敏度。这对操作人员的细心程度有一定要求。
2. 易受干扰与“钩状效应”
钩状效应 (Hook Effect)：当样本中目标抗原浓度极高时，可能会饱和捕获抗体和检测抗体，导致信号反而下降，出现假阴性结果。这需要对高浓度样本进行稀释复测。
基质干扰：样本中的杂质（如溶血、脂血、类风湿因子等）可能会干扰抗原抗体结合，导致结果偏差。
交叉反应：虽然特异性较高，但如果抗体质量不佳，仍可能与结构相似的分子发生交叉反应。
3. 仅检测抗原含量，信息有限
ELISA只能告诉你“有多少”抗原，无法提供关于抗原的生物活性（是否具有功能）或结构完整性的信息。例如，变性的蛋白可能仍能被ELISA检测，但已失去生物活性。
4. 试剂成本与稳定性
试剂成本：高质量的抗体（尤其是配对良好的单抗）制备工艺复杂，导致试剂盒成本相对较高。
酶的不稳定性：酶标记物对温度和环境敏感，若保存不当容易失活，影响实验结果。
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注意事项
样本要求：溶血的标本会影响检测结果，不宜使用。待测样本应尽早检测，如需保存，应在-20℃或-80℃冷冻，并避免反复冻融。
试剂准备：使用前需将所有试剂置于室温（20-25℃）平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出，需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范：
为避免交叉污染，添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色，若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要，无论是手动还是自动洗板，都应确保洗涤充分，并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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