人羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒

检测原理：
包被与捕获：试剂盒的微孔板预先包被了能特异性识别人羟脯氨酸（Hyp）的捕获抗体。
抗原结合：向微孔中加入待测样本（如血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等），样本中的Hyp抗原会与固相上的捕获抗体结合。
形成夹心复合物：洗涤后，加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗人Hyp检测抗体，它会与已被捕获的Hyp结合，形成“固相捕获抗体-Hyp抗原-酶标检测抗体”的夹心复合物。部分试剂盒会采用生物素-亲和素系统进行信号放大。
显色与检测：再次洗涤并加入TMB底物溶液，HRP催化TMB显色（蓝色），加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样本中Hyp的浓度呈正相关。最后，使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），通过绘制标准曲线即可计算出样本中Hyp的浓度。
产品名称：人羟脯氨酸(Hyp)ELISA试剂盒
英文名称：Human hydroxyproline，Hyp ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：LZ-E029381
用途：仅供科研研究实验
核心参数概览：
检测方法：双抗体夹心法
检测范围：不同试剂盒的检测范围差异较大，例如 78.1 - 5000 ng/mL 或 0.625 - 20 μg/mL。
灵敏度：通常在 < 50 ng/mL 级别，例如 33 ng/mL 或 0.1 μg/mL。
精密度：
批内变异系数（CV）：通常小于 10%
批间变异系数（CV）：通常小于 15%
样本处理要求：
1‌、血清‌：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟取上清；可暂存于-20℃或-80℃，避免反复冻融
2‌、血浆‌：推荐使用EDTA或肝素抗凝管采集，采样后30分钟内于2–8℃、1000×g离心15分钟，取上清检测
3‌、组织匀浆‌：用预冷PBS冲洗组织去除残留血液，按1:9（重量:体积）比例加入含蛋白酶抑制剂的PBS进行研磨，超声或反复冻融辅助裂解后，5000×g离心5–10分钟取上清
检测流程简要：
‌一、试剂平衡‌：将试剂盒各组分于室温放置20分钟，恢复至常温。
‌二、加样‌：设空白孔、标准品孔（梯度浓度）、待测样本孔，每孔加入50μL样本或标准品。
‌三、孵育结合‌：每孔再加入HRP标记抗体100μL，37℃避光温育60分钟。
‌四、洗涤‌：弃液后用洗涤液洗板5次，拍干。
‌五、显色‌：每孔加TMB显色液A、B各50μL，37℃避光反应15分钟。
六、终止‌：每孔加50μL终止液，颜色由蓝转黄。
七、读数‌：15分钟内于450nm测定OD值，绘制标准曲线并计算浓度。
注意事项：
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
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