人去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒
检测原理:
固相抗体包被:试剂盒的酶标板微孔中预先包被了能特异性识别人去乙酰化饥饿激素(dGHRL)的抗体(捕获抗体)。
抗原-抗体反应:向微孔中依次加入样本(如血清、血浆、组织匀浆等)和酶标记的检测抗体(如HRP标记的抗dGHRL抗体)。样本中的dGHRL抗原会同时与固相抗体和酶标检测抗体结合,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的三明治夹心复合物。
洗涤:通过洗涤步骤,去除未与复合物结合的其他物质。
显色反应:加入底物溶液,如四甲基联苯胺(TMB)。在酶(HRP)的催化下,TMB底物会转化为蓝色。
终止与测定:加入终止液(如酸性溶液)终止反应,溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中dGHRL的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度(OD值),通过标准曲线即可计算出样本中dGHRL的浓度。
产品名称:
人去乙酰化饥饿激素(dGHRL)ELISA试剂盒
英文名称:Human deacylated appetite-regulating hormone,dGHRL ELISA kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E029355
用途:仅供科研研究实验
核心参数概览:
参数类别 具体说明
检测方法 双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)
检测样本 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及相关液体样本
检测波长 450nm
特异性 能够特异性识别dGHRL,不与饥饿激素(GHRL)或其他结构类似物发生交叉反应
重复性 板内变异系数(CV)通常<10%,板间变异系数(CV)通常<15%
准确性 标准品线性回归与预期浓度的相关系数R值,通常≥0.9900
灵敏度 因产品而异,例如最低检测浓度小于 1.0 ng/mL
检测范围 例如:1-60 μg/L (
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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