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人缺氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒
检测原理：人HIF-1α ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。其核心逻辑是利用两种特异性抗体“夹住”样本中的HIF-1α抗原，通过显色反应定量。
包被：酶标板上预包被了针对人HIF-1α的特异性捕获抗体（通常为单克隆抗体）。
加样与结合：
往包被的微孔中加入待测样本（细胞裂解液、组织匀浆、血清等）和酶标检测抗体（通常是HRP标记的抗HIF-1α抗体，或通过生物素-亲和素系统连接）。
样本中的HIF-1α抗原会同时与固相上的捕获抗体和液相中的酶标抗体结合，形成“抗体-抗原-酶标抗体”的免疫复合物。
洗板：洗去未结合的游离成分。
显色：加入底物溶液（如TMB）。TMB在辣根过氧化物酶（HRP）的催化下转化成蓝色。
终止与测定：加入终止液（酸性溶液），颜色由蓝变黄。颜色的深浅与样本中HIF-1α的浓度呈正相关。
产品名称：人缺氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒
英文名称：Human Hypoxia inducible factor -1α,HIF-1α ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：LZ-E029342
用途：仅供科研研究实验
核心参数概览：
检测类型 双抗体夹心法 (Sandwich ELISA)
检测范围 125 - 8000 pg/mL (常见范围，部分高敏试剂盒可达 1-64 pg/mL)
灵敏度 < 78 pg/mL (部分高敏试剂盒 < 1.0 pg/mL)
特异性 针对人HIF-1α，与HIF-2α及其他细胞因子无明显交叉反应
重复性 板内变异系数 (CV) < 10%；板间变异系数 (CV) < 15%
适用样本 细胞裂解液、组织匀浆、血清、血浆、细胞培养上清
检测流程简要：
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书a要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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标准曲线：每次实验都必须重新制作标准曲线，不可沿用旧数据。
洗涤步骤：洗涤不充分是导致误差的主要原因，需严格按照说明书洗板（通常3-5次）。
用途限制：此类试剂盒通常仅供科研使用，不可用于临床诊断
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