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人热休克蛋白70(HSP70)ELISA试剂盒
检测原理：包被与捕获：试剂盒的微孔板上预先包被了能特异性结合人HSP70的捕获抗体。
抗原抗体反应：向微孔中依次加入待测样本（如血清、血浆、细胞培养上清、组织匀浆或细胞裂解液等）和辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体。样本中的HSP70（抗原）会同时与包被的捕获抗体和HRP标记的检测抗体结合，形成一个“抗体-抗原-抗体”的夹心复合物，并固定在微孔板上。
洗涤：通过洗涤步骤，去除未结合的游离物质。
显色反应：加入底物TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）。在HRP的催化下，TMB由无色变为蓝色。
终止与检测：加入终止液（通常为硫酸）后，反应终止，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中HSP70的浓度呈正相关。最后，使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），通过标准曲线计算出样本中HSP70的浓度。
产品名称：人热休克蛋白70(HSP70)ELISA试剂盒
英文名称：Human ＨｅａｔＳｈｏｃｋＰｒｏｔｅｉｎｓ70,HSP70 ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：LZ-E029336
用途：仅供科研研究实验
核心参数概览：
特异性：试剂盒具有高特异性，能识别人源HSP70，与人源其他相关蛋白无明显交叉反应。
重复性：用于衡量检测结果的稳定性。通常以变异系数（CV）表示，板内和板间变异系数一般均小于15%。
灵敏度：指试剂盒能够检测到的最低HSP70浓度。不同试剂盒的灵敏度不同，例如，有的产品灵敏度可低至 < 18.75 pg/mL 或 80 pg/mL。
检测范围：指试剂盒能够准确定量的浓度区间。例如，标准品的浓度范围可能为 31.25 pg/mL 至 2000 pg/mL 或 156 pg/mL 至 10,000 pg/m
检测流程简要：
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书a要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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标准曲线：每次实验都必须重新制作标准曲线，不可沿用旧数据。
洗涤步骤：洗涤不充分是导致误差的主要原因，需严格按照说明书洗板（通常3-5次）。
用途限制：此类试剂盒通常仅供科研使用，不可用于临床诊断
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