人乳头状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)试剂盒

检测原理：
双抗体夹心法
固相抗体包被：试剂盒的酶标板微孔中预先包被了能特异性结合人IgG抗体的抗体（抗人IgG抗体）。
捕获IgG抗体：向微孔中加入稀释后的待测样本。如果样本中含有HPV特异性IgG抗体，它会被板上的抗人IgG抗体捕获并固定。
加入抗原：洗涤后，加入酶标记的HPV特异性抗原（如病毒样颗粒VLPs）。该抗原会与已捕获的HPV特异性IgG抗体结合，形成“抗人IgG抗体-人IgG抗体-酶标HPV抗原”的复合物。
洗涤与显色：再次洗涤，去除未结合的物质，然后加入底物（如TMB）。在酶的催化下，底物显色（通常为蓝色）。
终止与测定：加入终止液使反应停止，颜色变为黄色。颜色的深浅与样本中HPV特异性IgG抗体的含量呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线或Cut-off值计算其浓度或判断阴阳性。
产品名称：人乳头状瘤病毒抗体IgG(HPV-IgG)试剂盒
英文名称：human papillomavirus IgG,HPV-IgG ELISA Kit
规格：48T/96T
货号：LZ-E029303
用途：仅供科研研究实验
核心参数概览：
参数类别  具体说明
检测方法  双抗体夹心法或间接法酶联免疫吸附试验（ELISA）
检测样本  血清、血浆（EDTA、肝素抗凝）、细胞培养上清等
检测波长  450nm
特异性  能够特异性识别人HPV-IgG抗体，与其它病毒抗体无明显交叉反应
重复性  板内变异系数（CV）通常<10%，板间变异系数（CV）通常<15%
结果判定  通过计算Cut-off值（如阴性对照平均值+0.15）或标准曲线，样本OD值≥Cut-off值为阳性
灵敏度  因产品而异，例如 1.0 ng/mL
样本处理要求：
1‌、血清‌：全血室温静置2小时或4℃过夜，1000×g离心20分钟取上清；可暂存于-20℃或-80℃，避免反复冻融
2‌、血浆‌：推荐使用EDTA或肝素抗凝管采集，采样后30分钟内于2–8℃、1000×g离心15分钟，取上清检测
3‌、组织匀浆‌：用预冷PBS冲洗组织去除残留血液，按1:9（重量:体积）比例加入含蛋白酶抑制剂的PBS进行研磨，超声或反复冻融辅助裂解后，5000×g离心5–10分钟取上清
检测流程简要：
‌一、试剂平衡‌：将试剂盒各组分于室温放置20分钟，恢复至常温。
‌二、加样‌：设空白孔、标准品孔（梯度浓度）、待测样本孔，每孔加入50μL样本或标准品。
‌三、孵育结合‌：每孔再加入HRP标记抗体100μL，37℃避光温育60分钟。
‌四、洗涤‌：弃液后用洗涤液洗板5次，拍干。
‌五、显色‌：每孔加TMB显色液A、B各50μL，37℃避光反应15分钟。
六、终止‌：每孔加50μL终止液，颜色由蓝转黄。
七、读数‌：15分钟内于450nm测定OD值，绘制标准曲线并计算浓度。
注意事项：
1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。样本在使用前也要在室温平衡60分钟。
2. 浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。
3. 各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。
4. 请每次测定的同时做标准曲线，最好做复孔。
5. 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6. 底物请避光保存。
7. 严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8. 所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9. 本试剂不同批号组分不得混用。
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