人乳头状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)试剂盒
检测原理:
人HPV-IgM ELISA试剂盒通常采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验。其核心逻辑是利用特异性抗原捕获样本中的IgM抗体,再通过酶标二抗进行显色定量。
包被:酶标板上预包被了高纯度的HPV特异性抗原(通常是HPV衣壳蛋白L1病毒样颗粒,如HPV6/11/16/18 L1 VLP)。
加样与结合:
往包被的微孔中加入待测样本(血清或血浆)。
如果样本中存在HPV特异性IgM抗体,它会与固相上的抗原特异性结合,形成“抗原-抗体”复合物。
加酶标二抗:
加入酶标记的抗人IgM抗体(HRP标记的抗人IgM μ链单克隆抗体)。
酶标二抗会特异性结合被捕获的人IgM抗体,形成“抗原-IgM抗体-酶标二抗”的复合物。
洗板与显色:
洗去未结合的成分,加入TMB底物溶液。TMB在HRP催化下变蓝。
终止与测定:
加入终止液(酸性溶液),颜色由蓝变黄。颜色的深浅与样本中HPV-IgM抗体的浓度呈正相关。
(注:部分特定试剂盒可能采用竞争法,原理为样本抗体与酶标抗体竞争结合固相抗原,此时OD值与浓度呈负相关,请以具体说明书为准。)
产品名称:
人乳头状瘤病毒抗体IgM(HPV-IgM)试剂盒
英文名称:Human papillomavirus IgM,HPV-IgM ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E029302
用途:仅供科研研究实验
核心参数概览:
参数项目 指标详情
检测类型 双抗体夹心法 (Sandwich ELISA)
检测范围 需咨询厂家(通常以滴度或相对单位表示,或设定Cut-off值定性)
灵敏度 需咨询厂家(定性检测主要关注特异性)
特异性 针对人HPV-IgM,与IgG、IgA及其他病毒抗体无明显交叉反应
重复性 板内变异系数 (CV) < 10%;板间变异系数 (CV) < 15%
适用样本 血清、血浆
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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