人腮腺炎病毒IgMELISA试剂盒
检测原理:
固相抗体包被:试剂盒的酶标板微孔中预先包被了能特异性结合人IgM抗体μ链的抗体(抗人IgM抗体)。
捕获IgM抗体:向微孔中加入稀释后的待测样本(血清或血浆)。如果样本中含有腮腺炎病毒特异性IgM抗体,它会被板上的抗人IgM抗体捕获并固定。
加入抗原:洗涤后,加入酶标记的腮腺炎病毒抗原。该抗原会与已捕获的特异性IgM抗体结合,形成“抗人IgM抗体-人IgM抗体-酶标病毒抗原”的复合物。
洗涤与显色:再次洗涤,去除未结合的酶标抗原,然后加入底物(如TMB)。在酶的催化下,底物显色(通常为蓝色)。
终止与测定:加入终止液使反应停止,颜色变为黄色。颜色的深浅与样本中腮腺炎病毒特异性IgM抗体的含量呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过计算样本与阴性对照的比值(P/N值或S/N值)来判断结果。
产品名称:
人腮腺炎病毒IgMELISA试剂盒
英文名称:Human paramyxovirus parotitis IgM ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E029295
用途:仅供科研研究实验
核心参数概览:
参数类别 具体说明
检测方法 抗体捕捉法酶联免疫吸附试验(ELISA)
检测样本 人血清或血浆
检测波长 450nm
特异性 高特异性,不与其它病毒(如风疹、麻疹病毒)发生交叉反应
重复性 板内、板间变异系数(CV)通常小于10%-15%
结果判定 通常计算P/N值(样本OD值/阴性对照OD值),P/N ≥ 2.1为阳性;1.5 ≤ P/N < 2.1为可疑;P/N < 1.5为阴性
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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