人沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒
检测原理:
1. 检测CT抗原(双抗体夹心法)
此方法用于直接检测样本中是否存在沙眼衣原体。
固相抗体包被:试剂盒的酶标板微孔中预先包被了能特异性结合沙眼衣原体抗原(如LPS或MOMP蛋白)的抗体(捕获抗体)。
抗原-抗体反应:向微孔中加入处理后的样本(如尿道拭子、宫颈拭子、尿沉渣等)和酶标记的检测抗体。如果样本中含有沙眼衣原体抗原,它会同时与固相抗体和酶标检测抗体结合,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
洗涤与显色:通过洗涤去除未结合的物质,然后加入底物(如TMB)。在酶的催化下,底物显色(通常为蓝色)。
终止与测定:加入终止液使反应停止,颜色变为黄色。颜色的深浅与样本中沙眼衣原体抗原的含量呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),即可判断结果。
产品名称:
人沙眼衣原体(CT)ELISA试剂盒
英文名称:Human Chlamydia trachomatis,CT ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E029283
用途:仅供科研研究实验
核心参数概览:
参数类别 具体说明
检测方法 双抗体夹心法(检测抗原)或 间接法(检测抗体)
检测样本 抗原检测:男性尿道拭子、女性宫颈拭子、尿沉渣等;抗体检测:血清、血浆
检测波长 450nm
特异性 高特异性,不与其它病原体发生交叉反应
重复性 板内、板间变异系数(CV)通常小于10%-15%
结果判定 抗原检测:标本OD值 ≥ cut-off值为阳性;抗体检测:S/CO比值 ≥ 1.0为阳性
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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