人输卵管特异性糖蛋白(OVGP1)ELISA试剂盒
检测原理:
1. 双抗体夹心法
包被与捕获:微孔板预先包被了特异性识别人OVGP1的捕获抗体。
抗原结合:加入待测样本(如血清、血浆、组织匀浆等),样本中的OVGP1抗原与固相抗体结合。
形成夹心复合物:洗涤后,加入生物素标记的抗OVGP1检测抗体,与已捕获的OVGP1结合。随后加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,形成“固相抗体-OVGP1抗原-生物素标记抗体-HRP标记亲和素”复合物。
显色与检测:加入TMB底物显色(蓝色),加终止液后变黄色。颜色深浅与样本中OVGP1浓度呈正相关。在450nm波长下测定OD值,通过标准曲线计算浓度。
产品名称:
人输卵管特异性糖蛋白(OVGP1)ELISA试剂盒
英文名称:Human OVGP1 ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E029201
用途:仅供科研研究实验
核心参数概览:
检测方法:双抗体夹心法 或 竞争法
检测范围:
夹心法示例:0.312 - 20 ng/mL
竞争法示例:250 - 5000 pg/mL
灵敏度:
夹心法示例:< 0.117 ng/mL
竞争法示例:1.0 pg/mL
精密度:
批内变异系数(CV):通常小于 10%
批间变异系数(CV):通常小于 12%
检测流程简要:
第一阶段:准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温:从冰箱取出试剂盒,将所有试剂(包括浓缩洗涤液、标准品、样本等)在室温(20-25℃)下平衡至少 30分钟。
注意:如果浓缩洗涤液有结晶,需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释:按照说明书要求,使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释(通常做7-8个浓度点),现配现用。
样本处理:确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀(如有沉淀需再次离心)。
第二阶段:加样与孵育
加样:
在酶标板的对应孔中,分别加入 100 µL(具体体积看说明书)稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔(只加稀释液)。
建议:每个样本做2-3个复孔,数据更可靠。
孵育:
盖上封板膜,放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时(或按说明书要求,如室温2小时)。
原理:让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段:洗板与检测抗体
洗板(关键步骤):
弃去孔内液体,每孔加满洗涤液(约300-350 µL),静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干,确保无残留液体。
加检测抗体:
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液(生物素化抗体)。
盖上封板膜,37℃ 孵育 1小时。
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注意事项:
标准曲线:每次实验都必须重新制作标准曲线,不可沿用旧数据。
洗涤步骤:洗涤不充分是导致误差的主要原因,需严格按照说明书洗板(通常3-5次)。
用途限制:此类试剂盒通常仅供科研使用,不可用于临床诊断
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