根据试剂盒设计的不同,主要有两种检测原理,其中间接法在科研试剂盒中较为常见。
间接法
这是目前许多VZV-IgM检测试剂盒采用的原理。
包被:酶标板上预包被了纯化的水痘-带状疱疹病毒(VZV)特异性抗原。
加样与结合:
加入待测样本(血清或血浆)。如果样本中含有抗VZV的IgM抗体,它会与固相上的病毒抗原特异性结合。
加酶标二抗:
加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IgM抗体(µ链特异性)。该二抗只识别并结合人IgM抗体。
显色与测定:
加入TMB底物液显色。若样本中存在VZV-IgM,则形成“抗原-IgM-酶标二抗”复合物,HRP催化底物显色。颜色的深浅与样本中VZV-IgM的浓度呈正相关。
产品属性
| 产品名称 |
人水痘带状疱疹病毒IgMELISA试剂盒 |
货号 |
LZ-E029194 |
| 英文名称 |
Human Varicella zoster virus IgM,VZV IgM ELISA Kit |
规格 |
48T/96T |
| 用途 |
仅供科研实验 |
品牌 |
联祖 |
主要产品性能参数
参数项目 指标详情
检测类型 间接法 (Indirect ELISA) 或 双抗体夹心法
检测范围 定性检测(阴性/阳性)或 半定量 (S/CO值)
灵敏度 高特异性,能检测低滴度IgM抗体
特异性 针对人VZV-IgM,与IgG或其他病毒抗体无交叉反应
重复性 板内变异系数 (CV) < 10%;板间变异系数 (CV) < 12%
适用样本 血清、血浆(EDTA/柠檬酸盐/肝素)
ELISA试剂盒实验
第一阶段:准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温:从冰箱取出试剂盒,将所有试剂(包括浓缩洗涤液、标准品、样本等)在室温(20-25℃)下平衡至少 30分钟。
注意:如果浓缩洗涤液有结晶,需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释:按照说明书要求,使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释(通常做7-8个浓度点),现配现用。
样本处理:确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀(如有沉淀需再次离心)。
第二阶段:加样与孵育
加样:
在酶标板的对应孔中,分别加入 100 µL(具体体积看说明书)稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔(只加稀释液)。
建议:每个样本做2-3个复孔,数据更可靠。
孵育:
盖上封板膜,放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时(或按说明书要求,如室温2小时)。
原理:让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段:洗板与检测抗体
洗板(关键步骤):
弃去孔内液体,每孔加满洗涤液(约300-350 µL),静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干,确保无残留液体。
加检测抗体:
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液(生物素化抗体)。
盖上封板膜,37℃ 孵育 1小时。
公司正在出售的产品
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人水痘带状疱疹病毒IgMELISA试剂盒小鼠髓样分化因子88(MyD88)ELISA试剂盒 |
| 人水通道蛋白3(AQP-3)ELISA试剂盒 |
人α横纹肌肌动蛋白(α-SCA)ELISA试剂盒 |
ELISA试剂盒性能指标速查表
性能指标 关键参数 优质标准参考 意义
灵敏度 最低检测限 (LoD) 数值越低越好 能否测出微量样本
特异性 交叉反应率 < 5% (越低越好) 是否只测目标物,不误判
精密度 变异系数 (CV) 批内 < 10%, 批间 < 15% 结果是否稳定、可重复
准确性 回收率 80% - 120% 结果是否接近真实值
线性范围 标准曲线区间 覆盖样本预期浓度 能否准确定量高低浓度