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| 销售商： 上海联祖生物科技有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
检测原理
固相抗体包被：试剂盒的酶标板微孔中预先包被了能特异性识别人MAPK的抗体（捕获抗体）。
抗原-抗体反应：向微孔中依次加入样本（如血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等）和辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体。样本中的MAPK抗原会同时与固相抗体和酶标检测抗体结合，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的三明治夹心复合物。
洗涤：通过洗涤步骤，去除未与复合物结合的其他物质。
显色反应：加入底物溶液（通常是TMB）。在HRP的催化下，无色的TMB底物会转化为蓝色。
终止与测定：加入终止液（如硫酸）终止反应，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中MAPK的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），通过标准曲线即可计算出样本中MAPK的浓度。
产品属性
主要产品性能参数
参数类别 具体说明
检测方法 双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）
检测样本 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及相关液体样本
检测波长 450nm
特异性 不与其它可溶性结构类似物发生交叉反应
重复性 板内、板间变异系数（CV）通常小于10%-15%
准确性 标准品线性回归与预期浓度的相关系数R值，通常≥0.9900
灵敏度 因产品而异，例如 < 0.1 ng/mL 或 0.16 ng/mL
检测范围 例如：0.313 - 20 ng/mL 或 1.5 - 48 ng/mL
抗原-抗体反应：向微孔中依次加入样本（如血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清等）和辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体。样本中的MAPK抗原会同时与固相抗体和酶标检测抗体结合，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的三明治夹心复合物。
洗涤：通过洗涤步骤，去除未与复合物结合的其他物质。
显色反应：加入底物溶液（通常是TMB）。在HRP的催化下，无色的TMB底物会转化为蓝色。
终止与测定：加入终止液（如硫酸）终止反应，溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中MAPK的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值），通过标准曲线即可计算出样本中MAPK的浓度。
产品属性
| 产品名称 | 人丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)ELISA试剂盒 | 货号 | LZ-E029175 |
| 英文名称 | Human mitogen-activated protein kinases，MAPK ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
| 用途 | 仅供科研实验 | 品牌 | 联祖 |
检测方法 双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）
检测样本 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及相关液体样本
检测波长 450nm
特异性 不与其它可溶性结构类似物发生交叉反应
重复性 板内、板间变异系数（CV）通常小于10%-15%
准确性 标准品线性回归与预期浓度的相关系数R值，通常≥0.9900
灵敏度 因产品而异，例如 < 0.1 ng/mL 或 0.16 ng/mL
检测范围 例如：0.313 - 20 ng/mL 或 1.5 - 48 ng/mL
ELISA试剂盒实验
第一阶段：准备工作 (Pre-preparation)
试剂回温：从冰箱取出试剂盒，将所有试剂（包括浓缩洗涤液、标准品、样本等）在室温（20-25℃）下平衡至少 30分钟。
注意：如果浓缩洗涤液有结晶，需置于37℃水浴助溶并混匀。
标准品稀释：按照说明书要求，使用专用稀释液对标准品进行梯度稀释（通常做7-8个浓度点），现配现用。
样本处理：确保血清、血浆或细胞上清液澄清无沉淀（如有沉淀需再次离心）。
第二阶段：加样与孵育
加样：
在酶标板的对应孔中，分别加入 100 µL（具体体积看说明书）稀释好的标准品和待测样本。
设置空白孔（只加稀释液）。
建议：每个样本做2-3个复孔，数据更可靠。
孵育：
盖上封板膜，放入 37℃ 恒温箱孵育 1-2小时（或按说明书要求，如室温2小时）。
原理：让样本中的抗原与板上的捕获抗体结合。
第三阶段：洗板与检测抗体
洗板（关键步骤）：
弃去孔内液体，每孔加满洗涤液（约300-350 µL），静置浸泡 30-60秒 后甩干。
重复洗涤 3-5次。最后一次需在吸水纸上用力拍干，确保无残留液体。
加检测抗体：
每孔加入 100 µL 稀释好的检测抗体工作液（生物素化抗体）。
盖上封板膜，37℃ 孵育 1小时。
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ELISA试剂盒性能指标速查表
性能指标 关键参数 优质标准参考 意义
灵敏度 最低检测限 (LoD) 数值越低越好 能否测出微量样本
特异性 交叉反应率 < 5% (越低越好) 是否只测目标物，不误判
精密度 变异系数 (CV) 批内 < 10%, 批间 < 15% 结果是否稳定、可重复
准确性 回收率 80% - 120% 结果是否接近真实值
线性范围 标准曲线区间 覆盖样本预期浓度 能否准确定量高低浓度
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