固相抗体包被:试剂盒的酶标板微孔中预先包被了特异性识别AZU的抗体(捕获抗体)。
抗原-抗体反应:向微孔中依次加入样本(如血清、血浆)和辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体。样本中的AZU抗原会同时与固相抗体和酶标检测抗体结合,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的三明治夹心复合物。
洗涤:通过洗涤步骤,去除未与复合物结合的其他物质。
显色反应:加入底物溶液(通常是TMB)。在HRP的催化下,无色的TMB底物会转化为蓝色。
终止与测定:加入终止液(如硫酸)终止反应,溶液颜色由蓝色变为黄色。颜色的深浅与样本中AZU的浓度呈正相关。使用酶标仪在450nm波长下测定各孔的吸光度(OD值),通过标准曲线即可计算出样本中AZU的浓度。
产品属性
| 产品名称 |
人天青杀素(AZU)ELISA试剂盒 |
货号 |
LZ-E029091 |
| 英文名称 |
Human azurocidin,AZU ELISA Kit |
规格 |
48T/96T |
| 用途 |
仅供科研实验 |
品牌 |
联祖 |
主要产品性能参数
以下是人天青杀素(AZU)ELISA试剂盒的一些通用技术参数,具体数值因不同品牌和产品而异,请以产品说明书为准。
参数类别 具体说明
检测方法 双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)
检测样本 血清、血浆、组织匀浆、细胞培养上清及相关液体样本
检测波长 450nm
特异性 不与其它可溶性结构类似物发生交叉反应
重复性 板内、板间变异系数(CV)通常小于15%
准确性 标准品线性回归与预期浓度的相关系数R值,通常≥0.9900
灵敏度 最低检测浓度通常小于0.1 ng/ml
ELISA试剂盒的局限性与缺点
1. 操作步骤繁琐,对操作要求高
流程长:典型的ELISA实验涉及加样、多次孵育、多次洗涤、显色、终止等步骤,耗时较长(通常需要3-5小时甚至过夜)。
洗涤关键:洗涤步骤至关重要,洗板不彻底会导致背景值过高(假阳性),洗板过度或干涸则影响灵敏度。这对操作人员的细心程度有一定要求。
2. 易受干扰与“钩状效应”
钩状效应 (Hook Effect):当样本中目标抗原浓度极高时,可能会饱和捕获抗体和检测抗体,导致信号反而下降,出现假阴性结果。这需要对高浓度样本进行稀释复测。
基质干扰:样本中的杂质(如溶血、脂血、类风湿因子等)可能会干扰抗原抗体结合,导致结果偏差。
交叉反应:虽然特异性较高,但如果抗体质量不佳,仍可能与结构相似的分子发生交叉反应。
3. 仅检测抗原含量,信息有限
ELISA只能告诉你“有多少”抗原,无法提供关于抗原的生物活性(是否具有功能)或结构完整性的信息。例如,变性的蛋白可能仍能被ELISA检测,但已失去生物活性。
4. 试剂成本与稳定性
试剂成本:高质量的抗体(尤其是配对良好的单抗)制备工艺复杂,导致试剂盒成本相对较高。
酶的不稳定性:酶标记物对温度和环境敏感,若保存不当容易失活,影响实验结果。
公司正在出售的产品
| 活体细胞半胱-5(CASPASE-5)活性原位荧光染色检测试剂盒 |
载玻片细胞CASPASE-3蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒 |
| 细胞NF KAPPA B P65蛋白表达比色法定量检测试剂盒 |
明胶载玻片 |
| 细胞氧化型甘肽(GSSG)浓度荧光定量检测试剂盒 |
组织EPHB3激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
| 蛋类总乳酸比色法定量检测试剂盒 |
细菌营养琼脂平板 |
| 组织科萨基病毒A(Coxsackievirus A)定性检测试剂盒 |
组织PDK1激酶活性定量检测试剂盒(A/B/C) |
| 全组织衰老特异性早期脂褐素油性红原位染色试剂盒 |
10 倍 TBE分子生物级浓缩缓冲溶液 |
| 腺苷酸活化蛋白激酶γ1单克隆抗体 |
肌萎缩相关蛋白1抗体 |
| PerCP-Cy5.5标记人CD81单克隆抗体 |
甘油激酶3抗体 |
| 轴丝中链动力蛋白抗体 |
叶绿体伴侣蛋白抗体 |
| 8-羟基脱氧鸟苷抗体 |
类固醇5α还原酶1抗体 |
| WD重复蛋白77抗体 |
HER2受体抗体 |
| 碳酸氢钠协同转运蛋白4-A4抗体 |
ELMOD2蛋白抗体 |
| 小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒 |
人天青杀素(AZU)ELISA试剂盒小鼠血管生成素2(ANG-2)ELISA试剂盒 |
| 人铁蛋白重链(FTH)ELISA试剂盒 |
人P-TAU蛋白(P-TAU)ELISA试剂盒 |
注意事项
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。