人调宁蛋白1(CNN1)ELISA试剂盒
检测原理:
双抗体夹心法
这是较为常见的一种方法,其基本原理如下:
包被与捕获:试剂盒的微孔板预先包被了能特异性捕获人CNN1的抗体。向微孔中加入待测样本或标准品,样本中的CNN1会与固相抗体结合。
形成夹心复合物:洗涤后,加入生物素标记的抗CNN1检测抗体,它与已被捕获的CNN1结合,形成“固相抗体-抗原-生物素标记抗体”的夹心复合物。
酶结合与显色:再次洗涤,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的亲和素,它会与生物素紧密结合。最后加入TMB底物溶液,HRP催化TMB显色(蓝色),加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样本中CNN1的浓度呈正相关。
产品名称:
人调宁蛋白1(CNN1)ELISA试剂盒
英文名称:Human Calponin-1,CNN1 ELISA Kit
规格:48T/96T
货号:LZ-E029089
用途:仅供科研研究实验
核心参数概览:
不同原理和厂家的试剂盒参数存在差异,以下是常见的参数范围:
参数 双抗体夹心法 竞争法
检测范围 通常为 0.312 - 20 ng/mL 通常为 1.0 - 25 ng/mL
灵敏度 通常小于 0.12 ng/mL 通常为 0.1 ng/mL
精密度 (CV) 板内 < 10%;板间 < 12% 板内 < 10%;板间 < 12%
适用样本类型:
该试剂盒适用于多种生物样本,主要包括:
血清
血浆(如EDTA、肝素抗凝)
细胞培养上清液
组织匀浆
细胞裂解液
检测流程简要:
一、试剂平衡:将试剂盒各组分于室温放置20分钟,恢复至常温。
二、加样:设空白孔、标准品孔(梯度浓度)、待测样本孔,每孔加入50μL样本或标准品。
三、孵育结合:每孔再加入HRP标记抗体100μL,37℃避光温育60分钟。
四、洗涤:弃液后用洗涤液洗板5次,拍干。
五、显色:每孔加TMB显色液A、B各50μL,37℃避光反应15分钟。
六、终止:每孔加50μL终止液,颜色由蓝转黄。
七、读数:15分钟内于450nm测定OD值,绘制标准曲线并计算浓度。
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注意事项:
样本要求:溶血的标本会影响检测结果,不宜使用。待测样本应尽早检测,如需保存,应在-20℃或-80℃冷冻,并避免反复冻融。
试剂准备:使用前需将所有试剂置于室温(20-25℃)平衡。浓缩洗涤液若有晶体析出,需在37℃下加热至完全溶解后再稀释使用。
操作规范:
为避免交叉污染,添加每个标准品、样品和试剂时应更换移液器枪头。
底物显色液应呈无色或很浅的颜色,若已变蓝则不能使用。
洗板步骤对结果准确性至关重要,无论是手动还是自动洗板,都应确保洗涤充分,并避免微孔在温育过程中干燥。
任何反应试剂不能接触漂白溶剂或其散发的强烈气体。
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