志贺氏菌菌体蛋白抗体
商品属性
| 产品名称 |
志贺氏菌菌体蛋白抗体 |
货号 |
GOY-01K2102 |
| 英文名称 |
Shigella tropina Rabbit pAb |
品牌 |
谷研 |
| 规格 |
50µL、100µL、200µL |
用途 |
仅供科研实验 |
产品概述
志贺氏菌菌体蛋白是志贺氏菌(如痢疾杆菌)细胞壁和细胞膜的组成蛋白,参与细菌的黏附、侵袭和致病过程。志贺氏菌菌体蛋白抗体可特异性识别志贺氏菌菌体抗原,常用于感染性疾病诊断和疫苗研究,可通过ELISA、免疫荧光等实验检测样本中的志贺氏菌。
英文名称:Shigella tropina Rabbit pAb
中文名称:志贺氏菌菌体蛋白抗体
英文别名:Shigella dysenteriae; Shigella
产品应用:ELISA=1:5000-10000
抗体来源:Rabbit
免疫源:Whole cell protein of Shigella tropina
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量:None
浓度:1mg/ml
储存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
实验操作过程建议
Western Blot
凝胶制备:分离胶浓度根据靶蛋白分子量选择(如20kDa用15%胶,100kDa用8%胶);
转膜:用湿转或半干转,转膜电流/电压根据蛋白分子量调整,小分子蛋白缩短转膜时间,大分子蛋白延长时间;
封闭:用5%脱脂牛奶或BSA封闭1-2小时,避免非特异性结合(磷酸化蛋白检测需用BSA封闭);
抗体孵育:一抗4℃孵育过夜,二抗室温孵育1小时,减少背景信号。
IHC/IF
组织切片:厚度控制在4-6μm,避免过厚导致染色不均;
抗原修复:IHC常用柠檬酸盐缓冲液(pH6.0)高压修复,IF常用Triton X-100透化,根据抗体说明书选择合适方法;
抗体孵育:IHC用3%H₂O₂灭活内源性过氧化物酶,IF用5%BSA封闭非特异性结合,孵育抗体时注意避光(IF);
染色后处理:IHC用苏木素复染细胞核,IF用DAPI染核,封片时避免产生气泡。
ELISA
包被:用碳酸盐缓冲液(pH9.6)稀释抗原/抗体,4℃包被过夜,确保抗原/抗体均匀吸附在板上;
孵育:严格控制孵育时间和温度,避免出现边缘效应;
洗板:每步洗板3-5次,拍干孔内液体,避免残留未结合的抗体或抗原;
显色:加入底物后避光显色,显色时间根据说明书调整,避免显色过度。
IP
细胞裂解:用温和的非离子型去污剂(如NP-40)裂解细胞,保持蛋白复合物的稳定性;
抗体-磁珠孵育:提前将一抗与Protein A/G磁珠孵育1-2小时,形成抗体-磁珠复合物,减少非特异性结合;
洗涤:用含低浓度去污剂的洗涤液洗涤3-5次,去除非特异性结合的蛋白;
洗脱:用中性pH的洗脱液或煮沸法洗脱,避免蛋白变性。
实验操作结果判断
WB:条带单一清晰为有效结果,若出现杂带,可能是抗体非特异性结合或蛋白降解;
IHC/IF:阳性信号定位准确为有效结果,若背景过高,可能是封闭不充分或抗体浓度过高;
ELISA:孔间吸光度值变异系数(CV)<10%为有效结果,若CV过大,可能是包被不均或洗板不彻底;
IP:能检测到靶蛋白及相互作用蛋白为有效结果,若未检测到,可能是蛋白相互作用弱或裂解条件不当。
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