支链α-酮酸脱氢酶E2抗体
商品属性
| 产品名称 |
支链α-酮酸脱氢酶E2抗体 |
货号 |
GOY-01K0722 |
| 英文名称 |
DBT Rabbit pAb |
品牌 |
谷研 |
| 规格 |
50µL、100µL、200µL |
用途 |
仅供科研实验 |
产品概述
支链α-酮酸脱氢酶E2(BCKD E2)是线粒体中支链氨基酸分解代谢复合物的核心组分,参与缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的氧化脱羧反应,其缺陷可导致枫糖尿症等代谢疾病。支链α-酮酸脱氢酶E2抗体可特异性识别该蛋白,常用于代谢性疾病研究,可通过WB、IHC等实验检测其表达水平及酶活性变化。
英文名称:DBT Rabbit pAb
中文名称:支链α-酮酸脱氢酶E2抗体
英文别名:BCATE2; BCKAD E2 subunit; Branched chain acyltransferase, E2 component; Dihydrolipoamide branched chain transacylase(E2 component of branched chain keto acid dehydrogenase complex; maple syrup urine disease); Dihydrolipoamide branched chain transacylase; Dihydrolipoamide branched chain transacylase E2; Dihydrolipoyl transacylase; Dihydrolipoyllysine residue(2 methylpropanoyl)transferase; E2; ODB2_HUMAN; E2 component of branched chain alpha keto acid dehydrogenase complex; E2B; Lipoamide acyltransferase component of mitochondrial branched chain alpha keto acid dehydrogenase complex; Mitochondrial branched chain alpha keto acid dehydrogenase transacylase subunit(E2b).
产品应用:IHC-P=1:100-500, IHC-F=1:100-500, IF=1:100-500, ICC/IF=1:100-500, ELISA=1:5000-10000
抗体来源:Rabbit
免疫源:KLH conjugated synthetic peptide derived from human DBT
亚型:IgG
性状:Liquid
纯化方法:affinity purified by Protein A
克隆类型:Polyclonal
理论分子量:46 kDa
浓度:1mg/ml
储存液:0.01M TBS (pH7.4) with 1% BSA, 0.02% Proclin300 and 50% Glycerol.
抗体的制备过程
1. 免疫原的制备
普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原。
小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物
常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量生产时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集
一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用心脏采血,家兔、山羊、绵羊可采用静脉采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定
得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存
建议将抗体分装后进行保存。抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
抗体的鉴定
1)抗体的效价鉴定:鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制备抗抗体的效价,一般就采用琼脂扩散试验来鉴定。
2)抗体的特异性鉴定:抗体的特异性是指与相应抗原或近似抗原物质的识别能力。抗体的特异性高,它的识别能力就强。衡量特异性通常以交叉反应率来表示。交叉反应率可用竞争抑制试验测定。以不同浓度抗原和近似抗原分别做竞争抑制曲线,计算各自的结合率,求出各自在IC50时的浓度,并按公式计算交叉反应率。
3)抗体的亲和力:是指抗体和抗原结合的牢固程度。亲和力的高低是由抗原分子的大小,抗体分子的结合位点与抗原决定簇之间立体构型的合适度决定的。有助于维持抗原抗体复合物稳定的分子间力有氢键,疏水键,侧链相反电荷基因的库仑力,范德华力和空间斥力。亲和力常以亲和常数K表示,K的单位是L/mol。
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