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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
人肿瘤坏死因子α转化酶（Tumor Necrosis Factor-α Converting Enzyme, TACE），也称为ADAM17，是一种重要的金属蛋白酶。它在炎症反应、细胞增殖及肿瘤进展等多种生理病理过程中发挥关键作用，是类风湿性关节炎、癌症等疾病机制研究和药物研发的重要靶点。
人TACE ELISA试剂盒是利用酶联免疫吸附测定法（ELISA），用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清或组织匀浆中TACE蛋白浓度的科研工具。
| 产品名称 | 人肿瘤坏死因子α转化酶(TACE)ELISA试剂盒 | 英文名称 | TACE Elisa Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E3034 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）：
包被： 酶标板微孔中预先包被了高亲和力的抗人TACE特异性捕获抗体。
加样与结合： 加入标准品或待测样本后，样本中的TACE抗原与包被抗体特异性结合。
检测抗体结合： 洗涤后加入生物素标记的检测抗体，该抗体与TACE抗原的另一表位结合，形成“捕获抗体-抗原-检测抗体”夹心复合物。
酶结合物连接： 再加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的链霉亲和素，通过生物素-亲和素反应连接到复合物上。
显色与定量： 加入TMB底物溶液，HRP催化底物显色（蓝色），终止反应后颜色转为黄色。在酶标仪450nm波长下测定吸光度（OD值），样本中TACE的浓度与OD值成正比，通过标准曲线计算具体浓度。
试剂盒组成
标准配置通常包含以下组分：
组分名称 描述 保存条件
微孔酶标板 96孔或48孔，已包被捕获抗体 2-8℃密封保存
TACE标准品 纯化的人TACE蛋白（冻干粉或液体） -20℃或4℃保存
生物素标记检测抗体 生物素化的抗人TACE单克隆抗体 2-8℃避光保存
HRP-链霉亲和素 辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素 2-8℃避光保存
标准品稀释液 用于溶解和稀释标准品 2-8℃
样本稀释液 用于稀释待测样本 2-8℃
浓缩洗涤液 25×或20× PBS-Tween 20 2-8℃
显色剂（TMB） 底物溶液 2-8℃避光保存
终止液 2M H₂SO₄ 常温
样本要求与处理
TACE检测对样本处理要求严格，需防止蛋白降解和活性改变。
适用样本：
血清： 使用无热原试管采集，室温静置凝固后离心取上清。
血浆： 可使用EDTA、肝素钠等抗凝剂处理的全血，经离心分离后取上清。
细胞培养上清/组织匀浆： 细胞裂解液或组织匀浆液经离心后取上清检测。
采集规范：
离心： 建议3000转/分离心10-20分钟，确保样本澄清。
避免溶血： 溶血会释放细胞内成分，可能干扰检测结果。
保存条件：
若不立即检测，应按一次使用量分装，冻存于-20℃或-80℃，严禁反复冻融。
典型性能参数
检测范围： 常见范围如 62.5 ～ 4000 pg/mL。
灵敏度： 最低检测限通常小于 15.6 pg/mL。
特异性： 识别天然和重组人TACE（ADAM17），与其它相关蛋白无明显交叉反应。
重复性： 板内、板间变异系数（CV）通常<10% ～ 15%。
操作步骤概览
平衡： 试剂盒从冷藏环境取出，在室温（20-25℃）平衡15-30分钟。
配液： 将浓缩洗涤液按说明书比例（如1:25）用蒸馏水稀释。
配制标准品： 将冻干标准品溶解并进行倍比稀释。
加样： 设定标准品孔和样本孔，加入对应液体（通常50-100μL/孔），37℃温育60分钟。
洗板： 弃液后用洗涤液洗板5次，拍干。
加检测抗体： 加入生物素标记抗体，37℃温育60分钟，洗板。
加酶结合物： 加入HRP-链霉亲和素，37℃温育30分钟，洗板。
显色： 加入TMB显色液，37℃避光显色15-30分钟。
读数： 加终止液后，15分钟内于450nm波长下读取OD值，计算浓度。
注意事项
洗板彻底： 洗板不彻底是导致背景过高和数据误差的主要原因，务必确保洗涤充分且孔内无残留液体。
标准品现配： 稀释后的标准品应立即使用，不可保存。
安全防护： 终止液为强酸，操作时请佩戴手套和护目镜。所有样本均应视为潜在传染源处理。"
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