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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
以下基于酶联免疫吸附试验（ELISA）原理，为您详解该试剂盒的特性与操作：
公司正在出售的产品：
人肿瘤坏死因子α（Tumor Necrosis Factor-α, TNF-α）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清、血浆、细胞培养上清等生物样本中TNF-α含量的科研工具。
TNF-α是一种关键的多效性细胞因子，主要由活化的巨噬细胞、单核细胞和T淋巴细胞产生。它在调节免疫反应、诱导炎症、抗肿瘤活性以及介导败血症和自身免疫性疾病（如类风湿性关节炎、炎症性肠病）中起核心作用。因此，准确测定TNF-α水平对于免疫学研究和药物开发至关重要。
| 产品名称 | 人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒 | 英文名称 | TNF-α Elisa Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E108 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
检测原理.
试剂盒采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）：
包被：用纯化的抗人TNF-α单克隆抗体预包被在微孔板上，制成固相抗体。
加样与结合：加入标准品或待测样本。样本中的TNF-α与固相抗体特异性结合。
加酶标二抗：加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的抗人TNF-α检测抗体。抗体与抗原结合，形成“固相抗体-TNF-α-酶标抗体”夹心复合物。
洗涤：洗去未结合的游离酶标抗体。
显色：加入TMB（四甲基联苯胺）底物液，HRP催化TMB显色，溶液呈蓝色。
终止与测定：加入终止液（硫酸），反应终止，颜色由蓝变黄。在酶标仪450nm波长下测定吸光度（OD值）。样本中TNF-α的浓度与OD值呈正比，通过标准曲线即可计算出TNF-α的准确浓度。
典型性能参数.
不同品牌试剂盒的检测范围和灵敏度有所差异，以下是综合主流产品信息的参考参数：
参数指标 典型数值/范围 说明
检测范围 15.6 pg/mL - 1000 pg/mL (常见)
24.58 pg/mL - 6000 pg/mL (Sigma)
7.8 pg/mL - 500 pg/mL 跨度较大，购买时需注意灵敏度
灵敏度 < 1 pg/mL - 15.6 pg/mL 最低检测限，取决于试剂盒品牌
样本类型 血清、血浆（EDTA/肝素）、细胞培养上清、尿液、组织匀浆 需根据说明书处理.
检测时间 2.5 - 5 小时 视具体操作步骤而定
特异性 识别天然和重组人TNF-α 不与IL-2, IL-4, IL-6, TNF-β等交叉反应
主要组成成分
以常见的96孔试剂盒为例，通常包含以下组分：
微孔酶标板：96孔（12条×8孔），预包被抗人TNF-α抗体。
标准品：冻干粉或液体（通常包含6个梯度浓度，如1000、500、250、125、62.5、31.25、15.6 pg/mL）。
标准品/样本稀释液：用于溶解标准品及稀释样本。
检测抗体-HRP：HRP标记的抗人TNF-α抗体。
浓缩洗涤液：通常为20×浓缩液，使用前需用蒸馏水稀释。
显色剂A和B：TMB底物溶液，需避光保存。
终止液：通常为2M硫酸。
封板膜：用于孵育时密封微孔板。
样本处理与收集.
正确的样本处理是获得准确结果的关键。
1. 血清
采集：使用无热原、无内毒素的试管。
凝固：室温静置2小时或4℃过夜，使其充分凝固。
离心：2000-3000转/分离心20分钟，取上清。
2. 血浆
抗凝剂：推荐使用EDTA或肝素抗凝。
操作：采集后30分钟内，2000-3000转/分离心15分钟，取上清。
3. 细胞培养上清
处理：收集细胞培养液，2000-3000转/分离心10-20分钟，去除细胞碎片，取上清检测。
关键禁忌：
避免使用溶血、高血脂或浑浊的样本。
样本应避免反复冻融，建议分装保存于-20℃或-80℃。
标准操作流程 (SOP).
平衡：试剂盒从冷藏环境（2-8℃）取出，在室温（20-25℃）平衡15-30分钟。
配液：将浓缩洗涤液用蒸馏水稀释至工作浓度（如1:20稀释）。
加样：设标准品孔和样本孔。每孔加入50-100μL标准品或待测样本。
孵育：封板，37℃温育30-60分钟。
洗板：弃去孔内液体，甩干。用洗涤液注满每孔，静置30秒-1分钟，甩干。重复5次，拍干。
加酶：每孔加入酶标试剂，封板，37℃温育30-60分钟。
洗板：重复步骤5的洗涤过程。
显色：每孔加入TMB显色液，37℃避光显色10-15分钟。
终止：每孔加入终止液，混匀。
读数：在15分钟内于450nm波长下测定OD值。
注意事项.
洗板：洗板不彻底会导致背景过高，拍干不彻底会稀释后续试剂。建议使用自动洗板机以提高重复性。
显色：TMB底物对光敏感，显色过程应避光。若底物变蓝则不可使用。
结晶处理：浓缩洗涤液在低温下可能会有结晶析出，属正常现象，可在37℃水浴中溶解后再使用。
结果计算：建议所有样本做复孔。以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线，根据样本OD值计算浓度，并乘以样本稀释倍数，即为实际浓度。"
| GST融合蛋白THROMBIN酶切试剂盒 | 体液胱（cystine）含量高效液相色谱法定量检测试剂盒 |
| 人ELISA试剂盒 | 组织科萨基病毒A（Coxsackievirus A）定量PCR扩增检测试剂盒 |
| AF680标记的CD20抗体 | 甲基化CpG结合蛋白抗体 |
| 细胞碱性磷酸酶活性比色法定量检测试剂盒 | APC标记人CD200单克隆抗体 |
| PE标记人CD273 (B7-DC, PD-L2)单克隆抗体 | 同源转录因子DLX5抗体 |
| 干扰素诱导蛋白44样蛋白抗体 | 磷酸化CBX5抗体 |
| 蛛毒素受体2抗体 | PH2-3显色（CRESOL RED）指示溶液 |
| FAM46C蛋白抗体 | 细胞5’－核苷酸酶（5’－NT）活性比色法定量检测试剂盒 |
| 脑蛋白CG6抗体 | ?细胞PAR-3蛋白表达流式细胞仪检测试剂盒 |
| 凋亡加强结构域蛋白12抗体 | 人肿瘤坏死因子α(TNF-α)ELISA试剂盒细胞糖原硫酸蒽酮比色法定量检测试剂盒 |
| 抑制蛋白结构域蛋白2抗体 | 组织P38a激酶活性定量检测试剂盒（A/B/C） |
| 细胞ER BETA 蛋白表达荧光定量检测试剂盒 | CD56-PE |
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