"人乙醛脱氢酶(Aldehyde Dehydrogenase, ALDH)ELISA试剂盒是用于体外定量检测生物样本中ALDH蛋白含量的专用科研工具。ALDH是一类重要的解毒酶,不仅在酒精代谢中起核心作用,也是干细胞分选和肿瘤研究中的重要标志物。
| 产品名称 |
人乙醛脱氢酶(ALDH)ELISA试剂盒 |
英文名称 |
ALDH Elisa Kit |
| 规格 |
48T/96T |
货号 |
Y-E894 |
| 保存 |
2-8℃ |
用途 |
仅供科研 |
以下为您详解该试剂盒的原理、操作流程、参数及生物学背景。
ALDH 蛋白简介

全称:人乙醛脱氢酶(Aldehyde Dehydrogenase, ALDH)。
功能:该酶能将有毒的醛类(如乙醇代谢产生的乙醛)氧化为无毒的羧酸,是体内重要的解毒系统。此外,ALDH在细胞视黄酸代谢、氧化应激防御中也扮演关键角色。
亚型与意义:
ALDH1A1 / ALDH2:最常见的检测亚型。ALDH2主要负责乙醛的代谢;ALDH1A1常作为干细胞(如造血干细胞、癌症干细胞)的标志物。
科研价值:ALDH活性或表达水平与酒精性肝病、Fanconi贫血、多种肿瘤(如乳腺癌、肺癌、白血病)的发生发展及耐药性密切相关。
试剂盒基本原理

人ALDH ELISA试剂盒通常采用双抗体夹心法原理:
固相包被:微孔板中已预包被针对人ALDH(或特定亚型如ALDH1A1)的特异性捕获抗体。
加样与结合:向孔中加入标准品(已知浓度)或待测样本(如细胞裂解液、组织匀浆、血清)。样本中的ALDH会与孔壁上的抗体结合。
酶标二抗:洗涤去除未结合物质后,加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体。它会与已固定的ALDH结合,形成“抗体-抗原-酶标抗体”夹心复合物。
显色反应:加入底物TMB溶液。HRP酶催化TMB,使溶液呈现蓝色。
终止与检测:加入终止液(通常为硫酸溶液)后,颜色由蓝变黄。使用酶标仪在 450nm 波长下测定吸光度(OD值)。
定量计算:OD值的大小与样本中ALDH的浓度呈正相关。通过标准品绘制的标准曲线,即可计算出样本中ALDH的实际浓度。
典型试剂盒参数

参数项 典型指标/说明
检测方法 双抗体夹心法 ELISA
检测范围 视亚型和品牌而定(如 3.75 - 120 U/L 或 0.156 - 10 ng/mL)
灵敏度 最低检测限通常小于 0.1 U/L (或 0.05 ng/mL)
样本类型 组织匀浆、细胞裂解液、血清、血浆、细胞培养上清等
种属反应性 主要为人(Human),部分试剂盒兼容小鼠、大鼠
特异性 不与其它可溶性结构类似物发生显著交叉反应
规格 48T / 96T
保存条件 2-8℃ 避光保存
有效期 6个月
样本处理与操作要点

样本处理
组织/细胞样本:ALDH常用于检测细胞或组织中的表达水平。
细胞裂解:常用含蛋白酶抑制剂的RIPA缓冲液裂解细胞。
组织匀浆:需在冰上用PBS或裂解液进行匀浆,离心取上清。
血清/血浆:常规采集血液,离心取上清。
保存:若不立即检测,应分装后于 -20℃ 保存,避免反复冻融,以免蛋白降解影响结果。
操作关键点
平衡温度:试剂盒从冰箱取出后,需在室温(20-25℃)平衡 15-60分钟 再打开密封袋,以防冷凝水影响结果。
洗涤液:浓缩洗涤液(20×或30×)在低温下可能会有结晶析出,属正常现象,需在水浴中温热溶解后再稀释使用。
标准品稀释:标准品溶解后应充分混匀,建议现配现用。
科研应用背景

肿瘤干细胞:ALDH高活性(ALDHbr)是多种癌症干细胞的标志,用于分离和鉴定肿瘤干细胞。
酒精代谢研究:研究ALDH2基因多态性与酒精代谢能力、酒精性肝病易感性的关系。
药物研发:筛选ALDH抑制剂(如用于治疗癌症或酒精依赖的药物)。"