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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
人胰激肽原酶（Kallikrein, KLK 或 Prekallikrein, PK）ELISA试剂盒是一种用于定量检测人源样本中胰激肽原酶含量的科研工具。该酶在激肽释放酶-激肽系统（KKS）中扮演关键角色，参与调节血压、炎症反应和血管通透性。
公司正在出售的产品：
| 产品名称 | 人胰激肽原酶(PK)ELISA试剂盒 | 英文名称 | PK Elisa Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E3042 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
人胰激肽原酶（Kallikrein, KLK 或 Prekallikrein, PK）ELISA试剂盒是一种用于定量检测人源样本中胰激肽原酶含量的科研工具。该酶在激肽释放酶-激肽系统（KKS）中扮演关键角色，参与调节血压、炎症反应和血管通透性。
以下为您详解该试剂盒的原理、组成、操作流程及关键注意事项：
检测原理.
该试剂盒普遍采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。
固相包被：酶标板微孔中预包被了特异性的抗人胰激肽原酶单克隆抗体（捕获抗体）。
样本结合：加入待测样本（如血清、血浆、细胞上清）后，样本中的胰激肽原酶抗原与固相抗体特异性结合。
酶标识别：随后加入酶标记（通常为辣根过氧化物酶HRP）的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
显色定量：加入TMB底物液，HRP催化底物显色（蓝色），加入终止液（通常为硫酸）后颜色由蓝变黄。在450nm波长下测定吸光度（OD值），样本中胰激肽原酶的浓度与OD值呈正比，通过标准曲线计算浓度。
主要组成成分.
一个标准的试剂盒通常包含以下核心组分：
酶标包被板：96孔或48孔，已包被捕获抗体。
标准品：人胰激肽原酶标准品，用于绘制标准曲线。不同品牌检测范围不同（例如：15.6-1000 pg/mL 或 1.56-100 ng/mL）。
酶标试剂：HRP标记的检测抗体。
样品稀释液：用于稀释样本。
浓缩洗涤液：通常为20×或30×浓缩液，使用前需用蒸馏水稀释。
显色剂A液和B液：TMB底物溶液。
终止液：通常为2M硫酸溶液。
封板膜：用于孵育时密封。
适用样本类型.
该试剂盒可用于定量检测多种生物样本：
血清：使用不含热原和内毒素的试管收集。
血浆：可使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
细胞培养上清：离心去除细胞碎片。
组织匀浆：如胰腺、肾脏等组织匀浆液。
标准操作流程 (SOP).
平衡与配液：试剂盒从冷藏环境中取出，在室温（20-25℃）平衡30分钟。检查浓缩洗涤液是否有结晶，如有需水浴溶解，然后按说明书比例（如1:20）用蒸馏水稀释。
加样：设标准品孔和样本孔。每孔加入50-100μL标准品或待测样本（建议做复孔）。
温育：37℃恒温箱孵育30-60分钟。
洗板：弃去孔内液体，每孔注满洗涤液，静置1分钟后弃去，在吸水纸上拍干。重复5次。
加酶：每孔加入100μL酶标试剂，37℃孵育30-60分钟。
洗板：同上。
显色：每孔加入TMB显色液（A、B液各50μL），37℃避光显色10-15分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，混匀。
读数：在15分钟内，于450nm波长处测定OD值。
结果计算
绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标（X），平均OD值为纵坐标（Y），使用四参数逻辑拟合或对数坐标绘制曲线。
计算浓度：根据样本的OD值，在标准曲线上查出对应浓度。
校正结果：若样本经过稀释（如稀释了5倍），最终浓度需乘以稀释倍数。
关键注意事项.
样本保存：样本收集后如不立即检测，应分装冻存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。避免使用溶血或高血脂样本。
洗涤液结晶：浓缩洗涤液在低温下可能会有结晶析出，属正常现象，水浴加热溶解后使用。
加样精度：建议使用多通道移液器，加样时间最好控制在5分钟内，以减少误差。
试剂混匀：所有液体组分在使用前必须充分摇匀，特别是从冷藏环境中取出的试剂，需平衡至室温并混匀后使用。"
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