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人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒
英文名称:PI ELISA Kit总访问:24
国产/进口:国产半年访问:24
产地/品牌:上研生产品类别:其他生物试剂
规       格:48T/96T 最后更新:2026-3-2
货       号:Y-E2921
CAS   号:
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销售商: 上海研生实业有限公司 查看该公司所有产品 >>
  • 产品介绍
  • 公司简介
产品概述:
产品名称 人胰岛素原(PI)ELISA试剂盒 英文名称 PI ELISA Kit
规格 48T/96T 货号 Y-E2921
保存 2-8℃ 用途 仅供科研
 
人胰岛素原(Proinsulin, PI)ELISA试剂盒是一种用于定量检测人源样本中胰岛素原含量的科研工具。胰岛素原是胰岛素的前体分子,在胰岛β细胞功能评估、2型糖尿病及代谢综合征的研究中具有重要价值。
以下为您详解该试剂盒的原理、组成、操作流程及关键注意事项:
检测原理.
该试剂盒通常采用双抗体夹心法(Sandwich ELISA)。
固相包被:酶标板微孔中预包被了特异性的抗人胰岛素原单克隆抗体(捕获抗体)。
样本结合:加入待测样本(如血清、血浆)后,样本中的胰岛素原抗原与固相抗体特异性结合。
酶标识别:随后加入酶标记(通常为辣根过氧化物酶HRP)的检测抗体,形成“捕获抗体-胰岛素原-检测抗体-HRP”的夹心复合物。
显色定量:加入TMB(3,3',5,5'-四甲基联苯胺)底物液,HRP催化底物显色(由无色变蓝),加入终止液(通常为硫酸)后颜色由蓝变黄。在450nm波长下测定吸光度(OD值),样本中胰岛素原浓度与OD值呈正比,通过标准曲线计算浓度。
主要组成成分.
一个标准的试剂盒通常包含以下核心组分:
预包被微孔板:96孔或48孔,已包被捕获抗体(部分品牌为可拆条设计)。
胰岛素原标准品:用于绘制标准曲线,通常为冻干粉或原倍液。不同品牌检测范围差异较大(例如:1.56-50 pM 或 12.5-800 pg/mL)。
酶标二抗/检测液:HRP标记的抗人胰岛素原抗体。
样本稀释液:用于稀释样本,减少基质效应。
浓缩洗涤液:通常为20×或30×浓缩液(含吐温20),使用前需用蒸馏水稀释。
TMB显色液:底物A液和B液(或预混液),需避光保存。
终止液:通常为2M硫酸溶液。
封板膜:用于孵育时密封。
适用样本类型.
该试剂盒可用于定量检测多种生物样本:
血清:室温凝固后离心取上清。
血浆:可使用EDTA或肝素抗凝,采集后立即离心取上清。
细胞培养上清:检测细胞分泌的胰岛素原。
组织匀浆:如胰腺组织匀浆液。
标准操作流程 (SOP).
平衡与配液:试剂盒从-20℃或4℃取出,在室温(20-25℃)平衡30分钟。将浓缩洗涤液按比例(如1:20)用蒸馏水稀释。
加样:设标准品孔和样本孔。每孔加入50-100μL标准品或待测样本(建议做复孔)。
温育:37℃恒温箱孵育1-2小时。
洗板:弃去孔内液体,每孔注满洗涤液,静置1-2分钟后弃去,在吸水纸上拍干。重复5次。
加酶:每孔加入100μL酶标二抗工作液,37℃孵育1小时。
洗板:同上。
显色:每孔加入100μL TMB显色液,37℃避光显色15分钟。
终止:每孔加入50μL终止液,混匀。
读数:在15分钟内,于450nm波长处测定OD值。
结果计算
绘制标准曲线:以标准品浓度为横坐标(X),平均OD值为纵坐标(Y),使用对数坐标或四参数逻辑拟合绘制曲线。
计算浓度:根据样本的OD值,在标准曲线上查出对应浓度。
校正结果:若样本经过稀释,最终浓度需乘以稀释倍数。
关键注意事项.
样本保存:样本收集后如不立即检测,应分装冻存于-20℃或-80℃,避免反复冻融。
洗涤操作:洗涤不彻底会导致背景过高,影响结果准确性。
试剂活性:TMB显色液若变蓝则不可使用;终止液为强酸,具有腐蚀性,操作需小心。
标准品配制:标准品溶解后应静置10分钟以上并混匀,稀释过程需在2小时内完成。"
公司正在出售的产品:
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