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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
| 产品名称 | 人胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISA试剂盒 | 英文名称 | IGF-2 Elisa Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E158 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
人胰岛素样生长因子2（Insulin-like Growth Factor 2, IGF-2）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人源样本中IGF-2蛋白浓度的科研工具。IGF-2是一种与胰岛素结构相似的多肽生长因子，在胎儿发育、细胞增殖、分化及代谢调节中起关键作用，且与多种肿瘤的发生发展密切相关。
以下基于双抗体夹心法原理，为您详解该试剂盒的使用与特性：
检测原理
试剂盒采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）：
包被： 酶标板微孔中预先包被了抗人IGF-2的特异性捕获抗体。
加样与结合： 加入标准品或待测样本后，样本中的IGF-2抗原与包被抗体特异性结合。
酶标反应： 洗涤后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”夹心复合物。
显色与终止： 加入TMB底物显色（蓝色），反应终止后颜色转为黄色。
定量： 在酶标仪450nm波长下测定吸光度（OD值），样本中IGF-2的浓度与OD值成正比，通过标准曲线计算具体浓度。
试剂盒组成
标准配置通常包含以下组分：
组分名称 描述 保存条件
酶标包被板 96孔（12×8条）或48孔，已包被捕获抗体 2-8℃密封保存
标准品 重组人IGF-2（通常为冻干粉） -20℃或4℃
酶标试剂 HRP标记的抗人IGF-2抗体 2-8℃避光保存
样品稀释液 用于稀释待测样本 2-8℃
标准品稀释液 用于溶解和稀释标准品 2-8℃
浓缩洗涤液 20×或30×浓缩液（含吐温-20） 2-8℃
显色剂A液和B液 TMB底物溶液 2-8℃避光保存
终止液 2M H₂SO₄ 常温
样本要求与处理
IGF-2在血液中主要与结合蛋白（IGFBPs）形成复合物，部分检测方法可能需要酸化处理以解离复合物，具体需参照说明书。
适用样本：
血清： 使用无热原试管采集，室温静置凝固后离心取上清。
血浆： 可使用EDTA、肝素或枸橼酸钠抗凝，采集后30分钟内离心取上清。
细胞上清/组织匀浆： 细胞培养液或组织匀浆液离心取上清检测。
采集规范：
避免溶血： 溶血会释放内源性酶类干扰显色反应。
酸化处理（注意）： 部分试剂盒（如ALPCO品牌）要求样本需经酸化处理以解离IGF-2/IGFBP复合物，此时需严格按照说明书进行预处理。
保存条件：
若不立即检测，应按一次使用量分装，冻存于-20℃或-80℃，严禁反复冻融。
典型性能参数
检测范围： 不同品牌差异较大，常见范围如 1.56 ng/mL ～ 100 ng/mL 或 31.25 pg/mL ～ 2000 pg/mL。
灵敏度： 最低检测限通常小于 0.78 ng/mL（或15.6 pg/mL）。
特异性： 与人IGF-1、胰岛素及其他细胞因子无交叉反应（部分试剂盒可能存在极低交叉反应）。
重复性： 板内、板间变异系数（CV）通常<10%。
操作步骤概览
平衡： 试剂盒从冷藏环境取出，在室温（20-25℃）平衡15-30分钟。
配液： 将浓缩洗涤液按说明书比例（如1:20）用蒸馏水稀释。
配制标准品： 将冻干标准品溶解并进行倍比稀释。
加样： 设定标准品孔和样本孔，加入对应液体（通常50-100μL/孔），37℃温育60-90分钟。
洗板： 弃液后用洗涤液洗板5次，拍干。
加酶标： 加入酶标试剂，37℃温育30-60分钟，再次洗板。
显色： 加入TMB显色液，37℃避光显色10-15分钟。
读数： 加终止液后，15分钟内于450nm波长下读取OD值，计算浓度。
注意事项
酸化处理： 务必仔细阅读说明书，确认是否需要对样本进行酸化提取处理，这一步骤对结果准确性至关重要。
洗板质量： 洗板不彻底会导致背景过高，建议洗板后在吸水纸上拍干，且洗涤液注满微孔。
安全防护： 终止液为强酸，操作时请佩戴手套和护目镜。所有样本均应视为潜在传染源处理。"
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