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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
| 产品名称 | 人血小板衍生生长因子(PDGF)ELISA试剂盒 | 英文名称 | PDGF ELISA Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E2885 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
人血小板衍生生长因子（Platelet-Derived Growth Factor, PDGF）ELISA试剂盒是一种用于定量检测人源样本中PDGF含量的科研工具。PDGF是一种重要的促有丝分裂因子，在伤口愈合、组织修复、血管生成及肿瘤发生发展中起关键作用。
以下为您详解该试剂盒的原理、组成、操作流程及关键注意事项：
检测原理
该试剂盒普遍采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。
固相包被：酶标板微孔中预包被了特异性的抗人PDGF单克隆抗体（捕获抗体）。
样本结合：加入待测样本（如血清、血浆、细胞上清）后，样本中的PDGF抗原与固相抗体特异性结合。
酶标识别：随后加入酶标记（通常为辣根过氧化物酶HRP）的检测抗体，形成“捕获抗体-PDGF-检测抗体-HRP”的夹心复合物。
显色定量：加入TMB底物液，HRP催化底物显色（由无色变蓝），加入终止液（通常为硫酸）后颜色由蓝变黄。在450nm波长下测定吸光度（OD值），样本中PDGF浓度与OD值呈正比，通过标准曲线计算浓度。
主要组成成分
一个标准的试剂盒通常包含以下核心组分：
预包被微孔板：96孔或48孔，已包被捕获抗体。
PDGF标准品：用于绘制标准曲线，通常为冻干粉（如2000 pg/mL）或原倍液，需按说明书进行梯度稀释。
酶标二抗/检测液：HRP标记的抗人PDGF抗体。
样本稀释液：用于稀释样本，减少基质效应。
浓缩洗涤液：通常为20×浓缩液（含吐温20），使用前需用蒸馏水稀释。
TMB显色液：底物A液和B液（或预混液），需避光保存。
终止液：通常为2M硫酸溶液。
封板膜：用于孵育时密封。
适用样本类型
该试剂盒可用于定量检测多种生物样本：
血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心取上清。
血浆：可使用EDTA、柠檬酸钠或肝素抗凝，采集后立即离心取上清。
细胞培养上清：离心去除细胞碎片。
组织匀浆：用PBS缓冲液匀浆，离心取上清。
标准操作流程 (SOP)
平衡与配液：试剂盒从2-8℃冷藏环境中取出，在室温（20-25℃）平衡30分钟。检查浓缩洗涤液是否有结晶，如有需37℃水浴溶解，然后按1:20比例用蒸馏水稀释。
加样：设标准品孔和样本孔。每孔加入50-100μL标准品或待测样本（建议做复孔）。
温育：37℃恒温箱孵育1-2小时。
洗板：弃去孔内液体，每孔注满洗涤液，静置1分钟后弃去，在吸水纸上拍干。重复5次。
加酶：每孔加入100μL酶标二抗工作液，37℃孵育1小时。
洗板：同上。
显色：每孔加入100μL TMB显色液，37℃避光显色15-30分钟。
终止：每孔加入50μL终止液，混匀。
读数：在15分钟内，于450nm波长处测定OD值。
结果计算
绘制标准曲线：以标准品浓度为横坐标（X），平均OD值为纵坐标（Y），使用四参数逻辑拟合或对数坐标绘制曲线。
计算浓度：根据样本的OD值，在标准曲线上查出对应浓度。
校正结果：若样本经过稀释，最终浓度需乘以稀释倍数。
关键注意事项
样本保存：样本收集后如不立即检测，应分装冻存于-20℃（≤1个月）或-80℃（≤3个月），避免反复冻融。
避免溶血：采集血液样本时应尽量避免溶血，溶血或高血脂样本可能干扰检测结果。
洗涤操作：洗涤是ELISA实验的关键。洗涤不充分会导致背景过高，拍干不彻底会稀释后续试剂，影响结果准确性。
试剂活性：TMB显色液若变蓝则不可使用；终止液为强酸，具有腐蚀性，操作需小心。
标准品稀释：标准品稀释应在实验前现用现配，配制后应静置10分钟以上并混匀。"
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