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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
人血红蛋白H（Hemoglobin H, HbH）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清、血浆、尿液、细胞上清或组织匀浆等生物样本中HbH含量的科研试剂。HbH是α-地中海贫血及相关血液病研究中的重要指标。
公司正在出售的产品：
| 产品名称 | 人血红蛋白H(HbH)ELISA试剂盒 | 英文名称 | HbH ELISA Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E2798 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
人血红蛋白H（Hemoglobin H, HbH）ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人血清、血浆、尿液、细胞上清或组织匀浆等生物样本中HbH含量的科研试剂。HbH是α-地中海贫血及相关血液病研究中的重要指标。
以下基于双抗体夹心法原理，为您详解该试剂盒的使用与特性：
检测原理.
试剂盒采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）：
包被： 酶标板微孔中已预先包被抗人HbH的特异性捕获抗体。
加样与结合： 加入样本（如血清、血浆）后，样本中的HbH抗原与包被抗体结合。
酶标反应： 洗涤后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”夹心复合物。
显色与终止： 加入TMB底物显色（蓝色），反应终止后颜色转为黄色。
定量： 在酶标仪450nm波长下测定吸光度（OD值），样本中HbH的浓度与OD值成正比，通过标准曲线计算具体浓度。
试剂盒组成.
标准配置通常包含以下组分：
组分名称 规格/描述 注意事项
酶标包被板 12孔×8条（96孔）或12孔×4条（48孔） 未用完需密封保存于2-8℃
标准品 冻干粉或液体（如0.5ml/支） 需按说明书梯度稀释，用于绘制标准曲线
酶标试剂 HRP标记的抗体（如6ml/瓶） 避光保存，防止失活
样品稀释液 用于稀释待测样本 需与标准品稀释液区分
浓缩洗涤液 20×或30×浓缩液（含吐温-20） 使用前需用蒸馏水稀释，低温下可能有结晶，需温水浴溶解
显色剂A液/B液 TMB底物溶液 避光操作，变蓝则不可使用
终止液 2M 硫酸溶液 具腐蚀性，需小心操作
样本要求与处理.
样本的质量直接决定了检测结果的准确性。
适用样本：
血清： 使用无热原、无内毒素试管，3000转/分离心10分钟。
血浆： 可使用EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝，3000转/分离心10-30分钟。
其他： 尿液、细胞上清、组织匀浆（需加生理盐水捣碎后离心取上清）。
关键禁忌：
避免溶血： 虽然检测的是血红蛋白，但样本溶血通常指红细胞在采集后非正常破裂，可能干扰定量。
保存条件：
若不立即检测，应分装冻存于-20℃或-80℃，严禁反复冻融。
解冻时应在室温下均匀解冻。
操作步骤概览.
平衡： 试剂盒从冷藏环境取出，在室温（20-25℃）平衡15-30分钟。
配液： 将浓缩洗涤液按说明书比例（如1:30）用蒸馏水稀释。
加样：
设定标准品孔（通常6-7个浓度梯度）。
待测样本孔中先加样品稀释液，再加待测样本（如40μl稀释液+10μl样本，稀释倍数为5倍）。
温育与洗涤： 37℃温育30-60分钟后，洗板5次拍干。
加酶标试剂： 每孔加入酶标试剂，37℃温育30-60分钟，再次洗板。
显色与终止： 加入TMB显色液，37℃避光显色10-15分钟，加入终止液终止反应。
读数： 在15分钟内于450nm波长下读取OD值，计算浓度。
注意事项.
洗板质量： 洗板不彻底是导致背景过高和数据误差的主要原因，务必确保洗涤充分且孔内无残留液体。
标准曲线： 每次检测都应重新制作标准曲线，不可套用旧数据。
加样精度： 使用校准过的移液器，加样时避免气泡产生，尽量将液体加在孔底。
安全防护： 操作时请穿实验服并佩戴手套，终止液具有腐蚀性，避免接触皮肤。"
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