| 产品名称 |
人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)ELISA试剂盒 |
英文名称 |
ES-Ab ELISA Kit |
| 规格 |
48T/96T |
货号 |
Y-E2520 |
| 保存 |
2-8℃ |
用途 |
仅供科研 |
人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人源样本(如血清、血浆等)中血管内皮抑素抗体(ES-Ab)含量的科研试剂。
血管内皮抑素(Endostatin, ES)是胶原XVIII的C端片段,是一种强效的内源性血管生成抑制剂。检测其抗体水平有助于研究肿瘤血管生成、自身免疫反应以及抗肿瘤药物的疗效评估。
以下是对人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)ELISA试剂盒的详细解析:
检测原理

试剂盒通常采用间接法或双抗体夹心法原理,具体取决于试剂盒的设计目标(检测抗原还是抗体)。针对人血管内皮抑素抗体(ES-Ab)的检测试剂盒,通常采用间接ELISA法:
包被:将纯化的血管内皮抑素抗原(ES)预先包被在微孔板上。
加样:加入待测样本(如血清)。如果样本中含有ES-Ab,它就会与包被在板上的ES抗原结合。
加酶标二抗:加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的抗人IgG(或IgM/IgA,视试剂盒类型而定)抗体。该酶标二抗会与已结合在板上的ES-Ab结合。
显色:加入TMB底物液,HRP催化底物显色(蓝色)。
终止与测定:加入终止液(硫酸),颜色由蓝变黄。在酶标仪450nm波长下测定吸光度(OD值)。样本中ES-Ab的含量与OD值呈正比。
(注:部分试剂盒可能采用双抗体夹心法检测ES抗原本身,购买和使用时请务必确认试剂盒检测目标是“抗体(ES-Ab)”还是“抗原(ES)”。)
典型性能参数

不同品牌试剂盒的参数略有差异,以下是常见指标范围:
参数指标 典型数值/范围 说明
检测范围 0.313 - 20 ng/mL 或更宽 视具体试剂盒而定
灵敏度 < 10 pg/mL 或 0.188 ng/mL 最小可检测剂量
样本类型 血清、血浆(EDTA/肝素) 组织匀浆需做预实验
检测时间 2.5 - 5 小时 视具体操作步骤而定
特异性 与VEGF等其他血管因子无交叉反应 具体视说明书为准
主要组成成分

以常见的96孔试剂盒为例,通常包含以下组分:
微孔酶标板:96孔(12条×8孔),预包被血管内皮抑素抗原(ES)。
标准品:冻干粉或液体,用于梯度稀释制作标准曲线。
标准品稀释液:用于溶解和稀释标准品。
样本稀释液:用于稀释待测样本。
检测抗体-HRP:HRP标记的抗人抗体(如抗人IgG)。
浓缩洗涤液:通常为20×或30×浓缩液,使用前需用蒸馏水稀释。
显色剂A和B:TMB底物溶液,需避光保存。
终止液:通常为2M硫酸。
封板膜:用于孵育时密封微孔板。
样本处理与收集

正确的样本处理是获得准确结果的关键。
1. 血清
采集:使用不含热原和内毒素的试管。
凝固:室温静置2小时或4℃过夜,使其充分凝固。
离心:1000×g离心20分钟,取上清。
保存:立即检测或分装后-20℃保存。
2. 血浆
抗凝剂:可使用EDTA、肝素或柠檬酸盐抗凝。
操作:采集后30分钟内,2-8℃下1000×g离心15-20分钟,取上清。
3. 组织/细胞样本
组织匀浆:按1:9的重量体积比加入PBS在冰上研磨,5000×g离心取上清。
细胞上清:离心去除细胞碎片后取上清检测。"