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| 销售商： 上海研生实业有限公司 | 查看该公司所有产品 >> |
产品概述：
| 产品名称 | 人血管紧张素Ⅰ(Ang-Ⅰ)ELISA试剂盒 | 英文名称 | Ang-Ⅰ Elisa Kit |
| 规格 | 48T/96T | 货号 | Y-E679 |
| 保存 | 2-8℃ | 用途 | 仅供科研 |
人血管紧张素Ⅰ（Angiotensin I, Ang-Ⅰ）ELISA试剂盒是一种用于定量检测生物样本中血管紧张素Ⅰ含量的体外科研工具。血管紧张素Ⅰ是肾素-血管紧张素系统（RAS）中的关键前体多肽，由血管紧张素原经肾素作用裂解产生，其血浆水平是评估肾素活性和RAS系统功能状态的重要指标。
以下为您详解该试剂盒的原理、组成、操作流程及关键注意事项：
检测原理
该试剂盒通常采用双抗体夹心法（Sandwich ELISA）。
固相包被：酶标板微孔中预包被了抗人血管紧张素Ⅰ的特异性捕获抗体。
结合抗原：加入样本（如血清、血浆）后，样本中的血管紧张素Ⅰ抗原与固相抗体特异性结合。
酶标识别：随后加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的检测抗体，它会与已结合的血管紧张素Ⅰ形成“抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
显色定量：加入TMB（3,3',5,5'-四甲基联苯胺）底物液后，HRP酶催化其显色，溶液由无色变为蓝色。加入终止液（通常为硫酸溶液）后，颜色由蓝变黄。在酶标仪450nm波长下测定各孔的吸光度（OD值）。样本中血管紧张素Ⅰ的浓度与OD值呈正相关，通过标准曲线即可计算出精确浓度。
主要组成成分
一个标准的试剂盒通常包含以下核心组分：
预包被微孔板：96孔或48孔，已包被捕获抗体（部分试剂盒可能提供未包被的板条，需用户自行包被）。
标准品：用于绘制标准曲线，浓度已知的重组人血管紧张素Ⅰ蛋白，使用前需按说明书用样品稀释液溶解并进行系列倍比稀释。
酶标二抗/检测溶液：HRP标记的抗血管紧张素Ⅰ抗体，用于识别已结合的抗原。
样品稀释液：用于稀释血清、血浆等样本，以减少基质效应。
浓缩洗涤液：通常为20×浓缩液，使用前需用蒸馏水稀释，用于洗去未结合的物质。
TMB显色液：底物溶液，需避光保存。
终止液：用于终止酶促反应，通常为2M或2N的硫酸溶液。
封板膜/封口胶：用于孵育时密封微孔板，防止蒸发和污染。
适用样本类型
该试剂盒可用于定量检测多种生物液体样本中的血管紧张素Ⅰ含量，包括：
血浆（推荐使用EDTA或肝素抗凝，避免使用含肾素激活剂的抗凝管）。
血清。
细胞培养上清液。
组织匀浆液（如肾组织等）。
标准操作流程 (SOP)
试剂准备：将试剂盒从2-8℃冷藏环境中取出，在室温（18-25℃）平衡15-30分钟。检查浓缩洗涤液是否有结晶析出，如有需水浴加热溶解。
配液：按说明书比例用蒸馏水稀释浓缩洗涤液。
加样：在微孔中加入50-100μL标准品或待测样本，每个样本建议设复孔以减少误差。
孵育：用封板膜封板，在37℃恒温箱中孵育（通常30-60分钟）。
洗涤：弃去孔内液体，用洗涤液注满每孔，静置1-2分钟后弃液，在吸水纸上拍干。此过程通常重复5次。
加酶与显色：每孔加入酶标二抗工作液，重复孵育和洗涤步骤。然后加入TMB显色液，37℃避光显色10-20分钟。
终止与读数：每孔加入终止液，混匀后立即在酶标仪450nm波长下测定OD值。
结果计算
计算均值：将每个标准品和样本的复孔OD值取平均数。
绘制标准曲线：以标准品的浓度为横坐标，对应的平均OD值为纵坐标，在坐标纸上或使用专业软件绘制标准曲线。
计算浓度：根据待测样本的OD值，在标准曲线上查出对应的浓度，或代入直线回归方程计算。如果样本经过稀释，最终结果需要乘以稀释倍数。
关键注意事项
样本采集与处理：血管紧张素Ⅰ在体外极不稳定，易受温度和酶的影响而降解。
抗凝剂：推荐使用EDTA或肝素抗凝。
抑制剂：建议在采血时加入酶抑制剂（如EDTA、8-羟基喹啉等）以防止Ang-Ⅰ降解。
温度：采血后应立即置于冰上，并尽快分离血浆（通常需低温离心），分离后的样本应立即检测或冻存于-20℃或-80℃，避免反复冻融。"
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