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人血管活性肽酶抑制剂(VPI)ELISA试剂盒
英文名称:VPI ELISA Kit总访问:5
国产/进口:国产半年访问:5
产地/品牌:上研生产品类别:其他生物试剂
规       格:48T/96T 最后更新:2026-3-2
货       号:Y-E2531
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销售商: 上海研生实业有限公司 查看该公司所有产品 >>
  • 产品介绍
  • 公司简介
产品概述:
产品名称 人血管活性肽酶抑制剂(VPI)ELISA试剂盒 英文名称 VPI ELISA Kit
规格 48T/96T 货号 Y-E2531
保存 2-8℃ 用途 仅供科研
 
人血管活性肽酶抑制剂(Vasoactive Peptidase Inhibitors, VPI)ELISA试剂盒是一种用于体外定量检测人源样本(如血清、血浆、细胞培养上清等)中VPI蛋白含量的科研工具。该试剂盒通常采用双抗体夹心法(Sandwich-ELISA)进行检测。
以下是对该试剂盒的详细解析:
检测原理.
试剂盒基于双抗体夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)原理:
包被: 酶标板微孔中预先包被了针对人VPI的特异性捕获抗体。
结合: 向微孔中加入标准品或待测样本。样本中的VPI抗原会与包被在板上的捕获抗体特异性结合。
孵育与洗涤: 温育后,洗去未结合的游离成分。
酶标: 加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体。该抗体将与已结合的VPI抗原结合,形成“固相抗体-抗原-酶标抗体”的夹心复合物。
显色: 洗涤去除未结合的酶标抗体后,加入底物TMB。HRP催化TMB显色,溶液呈蓝色。
终止与测定: 加入终止液(通常为硫酸溶液)后,颜色由蓝变黄。在酶标仪450nm波长下测定各孔的吸光度(OD值)。样本中VPI的浓度与OD值成正比,通过标准曲线即可计算出其具体含量。
试剂盒组成.
不同品牌的试剂盒组分可能略有差异,但核心成分基本一致。以下是标准配置:
酶标包被板: 96孔或48孔,已包被捕获抗体(部分品牌为预包被板条)。
标准品: 用于配制标准曲线,通常为冻干粉或液体,需按说明书稀释。
酶标试剂/检测抗体-HRP: HRP标记的抗人VPI抗体。
样本稀释液: 用于稀释待测样本。
标准品稀释液: 用于溶解和稀释标准品。
浓缩洗涤液: 通常为20×或30×浓缩液,主要成分为含吐温-20的磷酸盐缓冲液,使用前需用蒸馏水稀释。
显色剂A液和B液: 即TMB底物溶液。
终止液: 通常为2M或1N的硫酸溶液。
封板膜/密封袋: 用于在孵育时密封微孔板,防止蒸发和污染。
说明书: 详细的操作步骤、标准品稀释梯度和注意事项。
样本要求与处理.
为确保检测结果的准确性,样本的采集和处理至关重要:
样本类型: 血清、血浆(EDTA、肝素抗凝)、细胞培养上清、组织匀浆等。
样本采集:
血清: 全血标本于室温放置2小时或4℃过夜,然后以1000×g离心20分钟,取上清。
血浆: 使用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,采集后30分钟内于2-8℃以1000×g离心15分钟,取上清。
注意事项:.
样本应清澈透明,若出现悬浮物需再次离心去除。
避免溶血和高血脂样本,这可能会影响检测结果。
样本保存:
若在1周内检测,可保存于4℃。
若不能及时检测,应按一次使用量分装,冻存于-20℃(1个月内检测)或-80℃(6个月内检测),避免反复冻融。
操作步骤概览.
试剂平衡: 从冰箱取出试剂盒,在室温(20-25℃)平衡15-30分钟。若浓缩洗涤液有结晶,需水浴溶解。
配置标准品: 按说明书将标准品进行梯度稀释(如2000、1000、500、250、125、62.5 pg/mL)。
加样: 在微孔板中分别加入50μL标准品和待测样本。
温育: 用封板膜封板,在37℃恒温箱中温育30-60分钟(具体时间视品牌而定)。
洗涤: 弃去孔内液体,用洗涤液洗板5次,并拍干。
加酶标试剂: 每孔加入酶标试剂(通常为50-100μL),37℃温育30-60分钟。
再次洗涤: 重复步骤5的洗涤过程。
显色: 每孔加入显色剂A和B各50μL,37℃避光显色10-15分钟。
终止: 每孔加入终止液50μL,轻轻震荡混匀。
读数与计算: 在15分钟内使用酶标仪在450nm波长下测定OD值。以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线,计算样本浓度。"
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